毛敬
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DOC2蛋白在宫颈癌组织中的表达及临床意义
- 2006年
- 目的研究DOC2蛋白在宫颈癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SABC法检测18份正常宫颈、17份慢性宫颈炎、129份宫颈癌组织中DOC2的表达情况。结果宫颈癌组织中DOC2的蛋白表达率显著低于正常宫颈和慢性宫颈炎组织(P<0.01),并且DOC2蛋白表达与宫颈癌患者临床分期、组织类型、分化程度和淋巴结转移无显著相关性。结论DOC2的低表达与宫颈癌的发生、发展密切相关,但与肿瘤分级无明显相关性,它的表达低下或缺失可能是宫颈恶性变的早期事件。
- 李萍辛晓燕刘淑娟马福成毛敬
- 关键词：宫颈癌免疫组织化学
- DOC2抑制对宫颈癌SiHa细胞系的生长
- 2006年
- 目的:探讨卵巢癌缺失2(DOC2)基因对宫颈癌Si-Ha细胞系生长的抑制作用.方法:采用基因转染技术,将含有全长DOC2cDNA的真核重组表达质粒和空载体质粒(pcD-NA3.1)转染到人宫颈癌SiHa细胞系(无DOC2基因的表达)中,了解其对细胞增殖能力及细胞周期的影响.结果:转染DOC2基因的宫颈癌细胞生长受到抑制(P<0.05),其在软琼脂克隆形成能力明显降低(P<0.05).DOC2有使G1期细胞比例增高、S期细胞比例下降的趋势,但SiHa细胞和SiHa-pcD-NA3.1细胞之间无显著差异.结论:DOC2基因能抑制宫颈癌细胞系的增殖.
- 李萍辛晓燕刘淑娟宋庆贺毛敬
- 关键词：宫颈肿瘤基因疗法
- 乙酰肝素酶shRNA双基因共表达真核载体的构建和筛选被引量：1
- 2006年
- 目的：构建并筛选有效的、编码2条shRNA的乙酰肝素酶（Hpa）特异性基因真核表达载体．方法：分别设计、化学合成6对寡核苷酸单链，经退火、连接和磷酸化后得到Hpa shRNA双链，将两两随机问隔4～8个碱基后定向克隆入带有各自的U6启动子和终止码、共同的绿色荧光蛋白（green fluoreseent protein，EGFP）基因和Neo基因的pGenesil-1中，构建3条含两段Hpa基因shRNA的pGenesil-1-Hpa—shRNA真核表达载体，转染卵巢癌细胞株SKOV3，流式细胞仪和荧光显微镜下观察转染效率，免疫组化分析Hpa蛋白表达．结果：酶切与测序证实pGenesil-1-HPSE—shRNA构建成功，无任何碱基突变，3组质粒转染细胞均有Hpa表达的变化，3种不同shRNA质粒转染细胞后Hpa蛋白表达有明显差别．结论：构建并筛选了针对Hpa特异性的双基因shRNA真核表达载体pGenesil-1-Hpa-shRNA．
- 刘玉辛晓燕毛敬张潍
- 关键词：乙酰肝素酶短发夹RNA
- siRNA抑制卵巢癌细胞株SKOV3 HPA基因表达的研究
- 2006年
- 目的：研究siRNA对卵巢癌细胞株SKOV3中乙酰肝素酶(heparanase,HPA)基因表达的抑制作用。方法：设计合成两对HPA编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,通过定向克隆至载体PGenesil-1,构建siRNA真核表达载体,经稳定转染SKOV3细胞后应用RT-PCR、real-time PCR及免疫组化技术检测卵巢癌细胞中HPA基因mRNA及蛋白表达水平的抑制情况。结果：测序证实成功地构建了编码2条shRNA的siRNA真核表达载体。通过RT-PCR、real-time PCR及免疫组化技术检测转染siRNA的SKOV3细胞,与对照组相比,HPA mRNA表达水平和蛋白表达水平明显降低。结论：构建的PGenesil-1(+)-HPA重组质粒能有效的抑制HPA基因在卵巢癌细胞株SKOV3中的表达,为研究HPA基因在肿瘤细胞中的调节途径和肿瘤的基因治疗提供了新的方法。
- 辛晓燕毛敬刘玉于月成李萍
- 关键词：卵巢癌
- 双基因shRNA干扰乙酰肝素酶在卵巢癌细胞中表达的实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的：采用编码2条短发卡式RNA(shRNA)的抗乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)特异性载体干扰卵巢癌细胞中Hpa的表达,观察其对肿瘤生长转移的抑制作用。方法：以脂质体介导的方法将自行设计和构建的抗Hpa短发卡式RNA (Hpa-shRNA)基因真核表达载体稳定转染人卵巢癌细胞SKOV3；流武细胞仪鉴定转染效率,免疫组化和实时定量RT-PCR检测转染前后卵巢癌细胞中Hpa蛋白和mRNA表达,Boyden小室观测细胞增殖和侵袭能力的变化,透射电镜观察卵巢癌细胞超微结构改变。结果：Hpa mRNA表达在SKOV_3-Hpa(转染Hpa)明显升高(P＜0．01),SKOV3-Hpa-shRNA(转染Hpa- sh RNA)显著降低(P＜0．01),SKOV3-DZ-shRNA(转染非特异性sh RNA片段)和SKOV3无显著性差异(P＞0．05)。电镜下,SKOV3-Hpa组Hpa蛋白表达最为明显,SKOV3-Hpa-shRNA Hpa蛋白则最低,各组间比较差别有显著性意义(P＜0．01)。SKOV3-Hpa细胞器发达,细胞表面绒毛丰富,细胞间连接稀少。SKOV3-Hpa-shRNA以变形为主,细胞表面绒毛少,细胞器不发达,部分见线粒体皱缩,肿胀和空泡样改变。SKOV3-Hpa、SKOV3-DZ-shRNA和SKOV3-Hpa-shRNA 3种细胞穿过人工基底膜的细胞数分别为82．3±9．16,36．1±8．73和18．6±10．5,各组间比较有显著性差异(P＜0．01)。结论：双基因Hpa特异性shRNA可显著抑制卵巢癌细胞Hpa表达,降低细胞侵袭能力。
- 刘玉辛晓燕毛敬张潍
- 关键词：卵巢肿瘤RNA干扰乙酰肝素酶SKOV3细胞
