毛玲
- 作品数：9 被引量：38H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 异基因骨髓移植后的慢性移植物抗宿主病所致的脑脉管炎
- 2006年
- 毛玲梅元武陈运平郭娟陈梅霞
- 关键词：骨髓移植慢性移植物抗宿主病中枢神经系统
- Shh—Gli信号激活对人神经母细胞瘤SK—N—AS细胞存活的影响及其机制被引量：3
- 2009年
- 目的证实Shh—Gli信号途径在人神经母细胞瘤细胞株SK—N—AS细胞中的存在，探讨激活该途径对神经母细胞瘤的存活的影响及其作用机制。方法用免疫细胞化学和Western blot检测SK-N—AS细胞株中Ptch-1、Gli-1、Gli-2蛋白的表达，用噻唑蓝（MTT）比色法检测Shh对细胞存活率的影响，用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的变化。结果Ptch-1、Gli-1和Gli-2在SK—N—AS细胞株中强阳性表达，Shh使细胞存活率提高了13．9％，该效应具有时间依赖性和剂量依赖性，流式检测显示Shh作用使细胞凋亡率较对照组比较下降31％，周期检测显示Shh应用后，G0／G1期细胞百分比，从对照组61．81％下降至47．29％，S期从16．55％上升至45．66％，以上差异有统计学意义（P〈0．05）。结论激活Shh—Gli信号可减少SK—N—AS细胞的凋亡，加速其进入增殖周期，促进神经母细胞瘤的存活。
- 戴若莲胡波夏远鹏周昱男毛玲
- 关键词：神经母细胞瘤脱噬作用
- Eph/Ephrin-B1通过Src酪氨酸激酶/丝裂原活化蛋白激酶信号抑制睫状神经节神经元的尼古丁乙酰胆碱受体电流被引量：1
- 2008年
- 本研究旨在探讨Eph/Ephrin-B1信号对急性分离的鸡胚睫状神经节(ciliary ganglion,CG)神经元上α3-尼古丁乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,α3-nAChRs)和α7-尼古丁乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,α7-nAChRs)电流的影响及可能机制。用膜片钳技术在急性分离的CG神经元上分别记录α3-nAChRs和α7-nAChRs全细胞电流。为检测Ephrin-B1对细胞nAChRs电流的影响,细胞被随机分为:对照组、Ephrin-B1Fc处理组(用Ephrin-B1与IgG重组后形成的Ephrin-B1Fc刺激细胞)、IgG处理组(用与Ephrin-B1Fc处理组重组所需的相同浓度的IgG刺激细胞)和Ephrin-B1处理组(用与Ephrin-B1Fc处理组重组所需的相同浓度的Ephrin-B1刺激细胞)。为探讨Ephrin-B1调节细胞nAChRs电流的机制,分别用Src信号抑制剂PP2和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号抑制剂PD98095预处理细胞后,再用Ephrin-B1Fc处理细胞,观察α3-nAChRs和α7-nAChRs电流的变化,细胞被随机分为:对照组、Ephrin-B1Fc处理组、PP2或PD98095(PP2/PD)处理组、Ephrin-B1Fc+PP2或PD98095处理组。结果显示:对照组、IgG处理组和Ephrin-B1处理组之间α3-nAChRs和α7-nAChRs电流无显著差异,而Ephrin-B1Fc处理组可显著抑制α3-nAChRs和α7-nAChRs电流,与对照组比较有显著差异(P=0.002、P=0.003);此外,PP2可部分恢复被Ephrin-B1Fc所抑制的α7-nAChRs电流,PD98095则可部分恢复被Ephrin-B1Fc所抑制的α3-nAChRs电流。以上结果提示,Eph/Ephrin-B1信号可能分别通过MAPK和Src信号途径抑制急性分离的CG神经元上α3-nAChRs和α7-nAChRs的电流,表明Eph/Ephrin-B1可能参与交感神经系统功能的调控。
- 夏远鹏胡波周昱男毛玲戴若莲董丽萍
- 关键词：尼古丁乙酰胆碱受体丝裂原活化蛋白激酶SRC酪氨酸激酶
- 基质金属蛋白酶-9与脑缺血血脑屏障损伤的关系被引量：25
- 2006年
- 基质金属蛋白酶9(MMP9)是一种基质金属蛋白酶,脑缺血时可以通过降解基底膜及紧密连接破坏血脑屏障,从而导致脑缺血后继发性脑水肿和脑出血。了解MMP9及其与脑缺血性损伤的关系、脑缺血时其在中枢神经系统的变化、及其在脑缺血时如何作用于血脑屏障,无疑为预防和治疗脑缺血后的并发症指出了新的方向。
- 毛玲查运红梅元武
- 关键词：基质金属蛋白酶-9血脑屏障脑缺血脑水肿
- Snail基因修饰对骨髓基质干细胞骨架结构稳定作用及促迁移和对无血清培养诱导细胞凋亡的保护作用研究被引量：4
- 2007年
- 转录因子Snail是调控肿瘤细胞迁徙转移的重要调控分子,基于干细胞与肿瘤细胞分子机制的重叠性,提出通过借鉴肿瘤细胞迁移的相关机制以用于提高骨髓基质干细胞向缺氧受损组织迁移能力的假设和研究思路,探讨Snail基因在人骨髓基质干细胞(MSCs)中的转染和表达情况,及转染后对基质干细胞促迁移作用、骨架结构的稳定作用及对无血清培养诱导细胞凋亡的保护作用。密度梯度离心法及细胞体外培养分离纯化人骨髓MSCs,脂质体法将重组表达载体pCAGGSneo-Snail-HA转染MSCs,G418筛选稳定表达,流式细胞仪检测MSCs表面抗原,采用免疫荧光染色技术检测转染后MSCs报告基因HA及目的基因Snail表达,Transwell细胞迁移实验和Western-blot评估细胞迁移能力和检测有关细胞信号转导通路分子水平变化,荧光染色分析细胞骨架,Sub-G1凋亡峰流式细胞仪检测细胞凋亡率并评估细胞抗凋亡能力。经流式细胞仪选择检测分离纯化扩增MSCs表面分子特点为CD34(-)/CD29(+),Snail及报告基因在转染后MSCs呈阳性表达,Snail质粒转染MSCs(MSCs-Sna)较对照空质粒转染MSCs(MSCs-neo)细胞迁移率增加(P<0.05),PI-3K信号通路特异性抑制剂Wortmannin能显著抑制此迁移率的增加,无血清培养72h后,MSCs-Sna凋亡率较MSCs-neo低(P<0.05)。经Snail基因转染,MSCs迁移能力、骨架结构的稳定性及在无血清培养环境中抗凋亡能力增加。
- 查运红梅元武毛玲贺杰峰殷涛张立王全胜
- 关键词：骨髓基质干细胞肿瘤细胞迁移细胞骨架凋亡
- 慢性全脑低灌注大鼠血脑屏障的改变及MMP-9表达的实验研究被引量：6
- 2007年
- 目的观察慢性全脑低灌注大鼠模型血脑屏障的改变及MMP-9的表达并探讨其意义。方法雄性SD大鼠,随机分成7组,模型组鼠行双侧颈总动脉分期永久结扎制备慢性全脑低灌注大鼠模型,正常对照组分离出颈总动脉后不予结扎即缝合皮肤。采用HE染色法、辣根过氧化物酶(HRP)染色法及免疫组织化学染色法观察正常对照组及模型组各个时间点(3、24、48h、3d、1和2周)海马区锥体细胞的变化、血脑屏障的变化及脑组织MMP-9的表达。结果通过光学显微镜观察,发现HRP的反应产物和MMP-9的表达主要出现于模型组海马区血管周围,模型制备3h后即开始出现,随着全脑低灌注时间的延长,其表达量逐渐增加,至第3d时表达最明显,1周时开始下降,2周时降至最低,而在正常对照组鼠的脑中未发现HRP的反应产物和MMP-9的表达。同时还发现,海马区锥体细胞从3h起即开始变性、固缩、坏死,随着全脑低灌注时间的延长,海马区完整的细胞逐渐减少。结论慢性全脑低灌注大鼠模型制作的早期,MMP-9的表达增加,通过破坏血脑屏障,促进海马区锥体细胞的损害。
- 毛玲查运红黄敬梅元武
- 关键词：血脑屏障MMP-9
- Cyclopamine对神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞生长周期的影响及其机制
- 2009年
- 目的探讨Shh信号途径的抑制剂cyclopamine对人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞生长周期的影响及其分子生物学机制。方法以不同浓度的cyclopamine处理SK-N-SH细胞不同时间,在相差倒置显微镜下观察药物作用后的该细胞形态学变化。用四甲基偶氮唑盐(MTT)分析法检测各组SK-N-SH细胞的增殖情况,流式细胞仪检测不同浓度cyclopamine作用后对细胞周期的影响,Westernblot检测药物作用前后细胞周期蛋白D1、P16和P21蛋白表达的变化。结果cyclopamine各处理组SK-N-SH细胞形态学有所不同。MTT法检测结果显示,cyclopamine对SK-N-SH细胞增殖的抑制是浓度依赖性和时间依赖性的(P<0.05)。流式细胞仪检测发现随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞百分比明显增加(P<0.05),而S期细胞百分比明显降低(P<0.05)。Westernblot检测结果显示,随着药物浓度的增加,SK-N-SH细胞中细胞周期蛋白D1表达逐渐降低,P16和P21表达逐渐增高(P<0.05)。结论cyclopamine抑制SK-N-SH细胞生长,阻滞细胞从G1期向S期转化,其机制可能与调控细胞周期蛋白表达有关。cyclopamine可能成为未来治疗神经母细胞瘤的药物之一。
- 周昱男夏远鹏毛玲戴偌连杨雪胡波
- 关键词：神经母细胞瘤CYCLOPAMINE细胞周期蛋白
- EphB/Ephrin-B1信号对睫状神经节α7-尼古丁乙酰胆碱受体电流的影响
- 2008年
- 目的探讨EphB/Ephrin-B1信号对鸡胚睫状神经节(CG)神经元上α7-尼古丁乙酰胆碱受体(α7-nAChRs)电流的影响。方法用膜片钳技术分别在培养的和急性分离的CG神经元上记录α7-nAChRs电流。细胞被随机分为:对照组、Ephrin-B1Fc处理组、IgG处理组和Ephrin-B1处理组,观察电流的变化。结果对照组、IgG组和Ephrin-B1处理组之间α7-nAChRs电流无显著差异(P>0.05),而这3组与Ephrin-B1Fc处理组之间有显著差异(P<0.05)。Ephrin-B1Fc可浓度依赖性抑制α7-nAChRs电流,该过程可在数分钟内发生,并呈现可逆性。培养的和急性分离的CG神经元Ipeak/Cm的IC50分别为0.032mg/L和1.4mg/L。结论Eph/Ephrin-B1信号可影响CG神经元α7-nAChRs的电流,提示Eph/Ephrin-B1可能参与交感神经系统功能的调控。
- 夏远鹏胡波周昱男戴若莲董丽萍毛玲
- 关键词：膜片钳技术鸡胚
- Bmi-1和N—Myc共同超表达在神经母细胞瘤发生中的作用
- 2008年
- 目的研究癌基因Bmi-1和N—Myc在神经母细胞瘤发生中的作用。方法以神经母细胞瘤细胞系SHEP1细胞为模型，采用逆转录病毒转染法转染目的基因Bmi-1和／或N—Myc，免疫印迹法检测转染效果。软琼脂实验观察获得稳定高表达Bmi-1和／或N-Myc的各组细胞的致瘤性，流式细胞术观察Bmi-1和／或N-Myc转染细胞对凋亡因子（TRAIL和抗Fas抗体）的敏感性。结果软琼脂实验显示对照组和单纯转染Bmi-1或N-Myc组均未见克隆形成，而Bmi-1和N-Myc共转染组可见克隆形成。流式细胞术发现，经各种凋亡因子作用后，与对照组相比，单纯转染N-Myc组细胞凋亡率显著升高（P〈0．05），而Bmi-1和N-Myc共转染组与单纯转染N-Myc组相比，细胞凋亡率显著降低（P〈0．05）。结论Bmi-1可以通过抑制N—Myc所致的神经母细胞瘤细胞对凋亡因子的敏感性，从而与N-Myc共同参与神经母细胞瘤的发生，是本病发生的关键环节。
- 毛玲胡波梅元武夏远鹏周昱男戴若莲
- 关键词：神经母细胞瘤癌基因细胞凋亡
