汪训明 作品数:29 被引量:175 H指数:8 供职机构: 复旦大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
人降钙素基因相关肽转基因马铃薯的RT-PCR分析 被引量:5 2003年 报道经过农杆菌介导将人降钙素基因相关肽 (calcitoningene relatedpeptide ,CGRP)基因由马铃薯块茎专一表达classIpatatin基因 5′侧翼区和CaMV 35S启动子驱动构建的马铃薯表达载体导入马铃薯 ,PCR鉴定获得了转基因植株。RT PCR分析证实classIpatatin基因 5′侧翼区驱动的CGRPmRNA在转基因马铃薯中的表达。研究结果在开发转基因马铃薯生物反应器表达医用多肽中具有重要意义。 宋东光 张英慧 杨泉女 黄碧琳 胡祎娜 聂呈荣 钟希琼 董华强 汪训明关键词:转基因马铃薯 RT-PCR分析 农杆菌介导 水稻线粒体DNA的分离纯化及其脉冲电泳分析 1989年 为了水稻线粒体基因文库的构建和细胞质雄性不育分子机制的研究,用简化的方法提纯了水稻线粒体DNA,限制性内切酶酶切图谱显示了清晰的带型。HindⅢ酶切产生37条带,Xho酶切产生30条带,该方法重复性好。同时用新技术——脉冲电泳,测定了水稻线粒体DNA的分了量,并就其作为一种新手段,在植物线粒体DNA的异质性、结构和分子大小等方面的研究所具有的优越性进行了讨论。 鹿炳伟 柴建华 汪训明 叶正祥关键词:线粒体DNA 脉冲电泳 构型 ELISA检测人降钙素基因相关肽在转基因马铃薯块茎中的专一性表达 被引量:1 2010年 通过间接ELISA检测了人CGRP基因在转基因马铃薯中的表达。马铃薯class I patatin基因5'侧翼区驱动下人CGRP的表达表现了明显的块茎专一性,茎段中没有检测到CGRP活性,CGRP的表达量在不同转基因株系中有差异,最高达到约50ng/mg可溶性蛋白。 宋东光 邓日烈 聂呈荣 张英慧 陈淑珍 仇月明 汪训明关键词:ELISA 转基因马铃薯 高含量人体必需氨基酸基因的化学全合成 被引量:5 1990年 采用固相亚磷酰胺法合成了编码高含量人体必需氨基酸蛋白质的基因。该基因有300个碱基对,共编码94个氨基酸,其中92%以上为人体必需氨基酸。从该基因的两个方向均可被翻译成具有人体必需氨基酸的蛋白质。该基因选用了植物所偏爱的密码子,并间隔地插入了编码赖氨酸的密码子,使之所编码的蛋白质可被胰蛋白酶消化。 张晓东 杨迪 汪训明 闵永洁 谢毅 王鄂生 王启松关键词:氨基酸 基因 含Gus基因的工程质粒转化马铃薯细胞 1992年 应用“三亲株杂交”法,将含有卡那霉素抗性基因(NPT-Ⅱ基因)和β-葡糖苷酸酶(Gus)基因的双向质粒pBI121转移到根癌农杆菌LBA4404(内含mini-Ti质粒中),得到由mini-Ti质粒和pBI121组成的双元载体系统(LBA4404/pBI121).用类似叶盘转化的茎盘转化法,将农杆菌LBA4404*pBI121感染马铃薯无菌苗茎段.通过选择培养基筛选,获得具有K_M^R表型的愈伤组织,且能分化成芽.经Gus和NPT-Ⅱ分析,表明外源基因已在抗性愈伤组织和再生芽中表达. 应燕如 叶建江 杨金水 葛扣麟 汪训明关键词:质粒 马铃薯 GUS基因 绛红色小单孢噬菌体MPh1在大肠杆菌中有启动子功能的DNA片段的克隆及顺序测定 1995年 从绛红色小单孢噬菌体Mph1DNA中,用大肠杆菌启动子探测质粒pGA46克隆到在大肠杆菌中具有启动子功能的DNA片段,筛选到的启动子功能片段具有抗四环素能力达100μg/ml以上。对这些活性片段进行分子杂交,证明确实来自绛红色小单孢噬菌体Mnh1。在此基础上,对其中一个250bp长的片段从克隆位点的一端进行了DNA序列分析,其结构类似于大肠杆菌启动子。并进行了G+C百分比的统计和限制性内切酶位点分析。 周健明 陈孝康 杜艳 王建红 汪训明 王顺德 江行娟 杨庆云关键词:噬菌体 克隆 DNA测序 Patatin启动子驱动的乙肝表面抗原基因在马铃薯中的表达 被引量:14 2000年 按常规分子克隆方法将马铃薯中高表达的patatin启动子和乙肝表面抗原基因分别插入双元质粒pBI101成为植物表达载体pPHG9,由前者驱动后者表达;通过农杆菌转化法将乙肝表面抗原基因导入马铃薯并获得再生植株;用ELISA方法检测经PCR鉴定的转基因植株中乙肝表面抗原的含量。 宋东光 王光清 汪训明关键词:马铃薯 乙肝 基因表达 转基因植株 Class I patatin基因5′侧翼区驱动的GUS基因在马铃薯块茎中专一性表达 被引量:5 2001年 将1.4kb Class I patatin基因的5′侧翼区与GUS基因融合,构建了双元表达载体pPATIs(含patatin部分信号顺序)和pPATI(不含patatin部分信号顺序)。pPATI通过基因枪介导在块茎切片中获得了瞬间表达。以上建构物通过农杆菌介导转入了马铃薯品种Desiree。X-Gluc染色(PATIs不能染色)及PCR结果证实已获得转基因植株。利用离体块茎诱导系统,GUS的表达进一步用荧光进行定量检测,结果显示,PATI-GUS的转基因植株中GUS比活性均以块茎明显高于茎段,达10-20倍。蔗糖浓度的升高,PATI-GUS植株中的GUS比活性无明显变化,与前人报道有不同。此外,光照促进PATI-GUS的表达。 宋东光 周健 黄大庆 马欢 司徒继锋 王光清 汪训明关键词:马铃薯 块茎 CLASS GUS基因 不同长度马铃薯GBSS基因启动子的块茎专一性表达的初报 被引量:22 1998年 将0.4,0.8,1.6,2.9kbGBSS基因的5'侧翼区与GUS基因融合,构建了双元表达载体.0.8kbGBSS-GUS通过基因枪转化法在块茎切片中获得了瞬间表达.已将上述构建体通过农杆菌转化法导入了马铃薯.X-Gluc染色及PCR结果均证实已获得转基因再生植株.在离体诱导块茎中,2.9,1.6,0.4kbGBSS启动子驱动的GUS活性均明显高于茎段,高出1~15倍;1.6,2.9kbGBSS启动子驱动的GUS活性则大大高于0.8,0.4kbGBSS启动子驱动的GUS活性;其中2.9kb的GBSS启动子显示最强烈的块茎表达专一性. 宋东光 黄大庆 王光清 汪训明关键词:马铃薯 GBSS GUS 启动子 黑麦Rubisco大亚基基因(rbc L)的克隆及其限制性内切酶图谱的构建 1990年 以小麦的rbc L为探针,分别与黑麦ctDNA EcoR I,BamH I,Hind III的酶切谱带进行Southern杂交。结果发现,E13(2.15 kb),B2(10.7 kb),H2(10.4 kb)均含有rbc L基因。用pUC9为载体克隆黑麦ctDNA的B2片段,Southern杂交后表明,得到的重组质粒含有rbc L基因,将其命名为pRCB2。设计了一种快速准确的分析方法,构建出pRCB2质粒DNA的限制性内切酶图谱,rbc L被定位在一个2.8 kb的区域内。 周辉通 李明启 汪训明 柴建华关键词:黑麦 叶绿体DNA 无性系 酶切图谱