王凯
- 作品数：21 被引量：60H指数：5
- 供职机构：同济大学附属第一妇婴保健院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金上海市科技人才计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ET-1及受体在不明原因复发性流产绒毛中的表达及其对滋养细胞迁移的调节被引量：1
- 2015年
- 目的通过检测内皮素-1(endothelin-1,ET-1)及受体(endothelin receptors,ETR)在不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)绒毛组织中的表达,探讨其与URSA的关系。方法不明原因复发性流产患者30例(RSA组)及正常早孕人流妇女30例(正常组,即CTL组),采用实时荧光定量PCR(RealTime PCR)及Western印迹法检测两组绒毛组织中ET-1、ETR-A、ETR-B mRNA及蛋白的表达。取体外培养的妊娠早期绒毛外滋养细胞Transwell迁移实验法检测ET-1、ETR-A阻断剂BQ-123及ETR-B阻断剂BQ-788受体对绒毛外滋养细胞迁移能力的影响。结果 RSA组较正常组绒毛组织中ETR-B mRNA及蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05),而ET-1、ETR-A mRNA及蛋白在二组绒毛组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。ET-1促进HTR-8细胞迁移,ETR-B阻断剂阻断ET-1的促迁移作用。结论 ET-1可能通过ETR-B受体促进妊娠早期绒毛外滋养细胞迁移,URSA患者较正常组绒毛中ETR-B mRNA及蛋白表达降低可能与URSA相关。
- 周红娣宗姗姗罗成凤王凯周倩
- 关键词：不明原因复发性流产绒毛内皮素-1内皮素受体
- Tie2基因过表达对单核细胞功能的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨过表达Tie2基因后单核细胞功能的变化及对内皮细胞增殖、迁移、小管形成的影响,初步研究TEMs(Tie2-expressing monocytes)促血管生成的机制。方法:建立过表达Tie2单核细胞系,荧光倒置显微镜下观察U937细胞的感染情况,RT-PCR、Western blot分别检测感染后U937细胞Tie2 mRNA和蛋白水平的表达情况;实时定量PCR检测感染后空载组NC-L.V-U937和实验组TEK-L.V-U937细胞mRNA水平表达的差异;ELISA检测NC-L.V-U937和TEK-L.V-U937细胞上清中细胞因子分泌的异同;增殖、迁移、小管形成实验分别观察TEK-L.V-U937细胞对内皮细胞增殖、迁移、小管形成的影响。结果:首次建立了转染Tie2基因的单核细胞系;RT-PCR及Western blot结果显示,与空载组NC-L.V-U937细胞相比,实验组TEK-L.V-U937细胞在mRNA和蛋白水平Tie2的表达显著增加,而NC-L.V-U937细胞几乎不表达Tie2;Real time-PCR结果显示,TEK-L.V-U937细胞IL-8的表达较空载组显著增加(P<0.01),IL-10的表达也有所上升(P>0.05);与空载组相比,TEK-L.V-U937细胞IL-8蛋白分泌明显增多(P<0.05),VEGFA蛋白分泌量也有上升的趋势(P>0.05),但两组细胞几乎都无EGF的分泌;TEK-L.V-U937的条件培养基刺激内皮细胞形成的小管数较多,IL-8中和抗体能抑制内皮小管的形成;NC-L.V-U937、TEK-L.V-U937饥饿培养上清对内皮细胞的迁移作用不明显(P>0.05);增殖的第3天,与空载组相比,TEK-L.VU937的条件培养基能显著地引起内皮细胞的增殖(P<0.05)。结论:过表达Tie2基因后显著地增加U937单核细胞系IL-8的表达,并进一步促进了内皮细胞的增殖与小管形成。
- 吴丽王凯王昕婧朱沁怡汪希鹏
- 关键词：TIE2过表达U937细胞系白介素-8
- 吲哚胺2,3双加氧酶对人绒毛膜癌JEG-3细胞增殖及迁移能力的影响被引量：1
- 2016年
- 目的观察吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)对人绒毛膜癌JEG-3细胞体外增殖、迁移能力的影响。方法通过IDO抑制剂(1-L-MT)及短发夹RNA基因干扰抑制IDO表达,利用MTS增殖实验、Transwell迁移试验检测对细胞增殖和迁移能力的影响。结果基因敲减能明显降低IDO表达水平。1-L-MT和基因敲减的JEG-3细胞与对照组相比,细胞的增殖和迁移能力明显下降。结论抑制IDO能够降低绒癌细胞系JEG-3细胞的增殖和迁移能力。
- 宗姗姗赵鑫罗成凤李春青王凯周倩
- 关键词：JEG-3细胞增殖细胞迁移
- microRNA的研究进展被引量：3
- 2011年
- 微小核糖核酸(miRNA)是一类长20～22个核苷酸的小分子非编码RNA,它通过与靶基因3'端非翻译序列结合促进靶基因降解或抑制翻译过程,从而抑制靶基因表达。miRNA参与生物体的生长、发育和凋亡的调控,并在疾病发生和发展过程中起着重要作用。现从miRNA的产生、作用机制、在生物体发育和疾病发生中的作用、作为生物学标记的研究进展以及病理状态下在胎盘中的差异表达等方面予以综述。
- 郝克红段涛王凯周倩
- 关键词：微小核糖核酸发育疾病生物标志物胎盘
- 上皮性卵巢癌患者肿瘤局部微环境中Treg/Th17比例平衡的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨上皮性卵巢癌(EOC)患者外周血、卵巢癌组织和癌旁腹膜中Treg/Th17是否存在失衡。方法:选取2011年9月至2013年12月同济大学第一妇婴保健院收治的16例EOC(EOC组)、11例良性上皮性肿瘤(良性肿瘤组)及14例健康成年女性(对照组),收集患者外周血并分离淋巴细胞;收集4例EOC患者腹水并分离淋巴细胞。流式细胞术检测外周血及腹水中Th17、Treg细胞占CD4+T细胞的比例。选取同一时间段在本院手术患者术中留取的卵巢肿瘤组织、腹膜组织及转移灶组织,包括13例EOC、16例EOC种植灶癌旁腹膜、5例良性卵巢肿瘤组织及腹膜,用免疫荧光染色分析Th17及Treg细胞在良性卵巢肿瘤、EOC原发灶和癌旁腹膜中的浸润情况。结果:(1)EOC患者外周血中Treg比例为(5.16±3.85)%,显著高于对照组[(2.41±1.76)%])和良性肿瘤组[(2.3873±2.336)%](P=0.025,P=0.043),后两组比较无统计学差异。EOC患者外周血中Th17细胞比例为(3.15±3.045)%,显著高于对照组[(1.22±1.13)%](P=0.044);良性肿瘤患者[(1.93±1.745)%]与EOC患者和对照组比较,差异均无统计学意义;Treg/Th17细胞比值在3组间均无统计学差异。EOC患者腹水与外周血中的Th17、Treg细胞比例及Treg/Th17比值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)EOC组肿瘤组织中Treg和Th17细胞比例及Treg/Th17比值分别为(0.1062±0.077)%、(0.143±0.056)%和0.80±0.56,与良性肿瘤组织[0%、(0.0789±0.11)%、0]比较,均显著增高(P均<0.05)。(3)卵巢良性肿瘤腹膜中未见Treg及Th17细胞浸润,EOC腹膜种植灶癌旁腹膜中Treg、Th17细胞比例及Treg/Th17比值分别为(0.1024±0.1)%、(0.2254±0.23)%和0.8113±1.097,较良性肿瘤组均显著提高(P<0.05)。(4)早期和晚期EOC组织中Th17、Treg比例以及Treg/Th17比值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:卵巢癌患者外周血Treg和Th17比例升高,但并未发现失衡。卵巢癌组织及癌旁腹膜微环境中存在失衡,这一失衡可能�
- 吴小丽张婷王昕婧吴丽王凯汪希鹏
- 关键词：TH17调节性T细胞上皮性卵巢癌
- 外泌体在子痫前期发病机理中的研究进展被引量：7
- 2016年
- 外泌体(exosome)是由多种细胞分泌的膜性纳米囊泡,携带蛋白、m RNA、mi RNA和脂质等内含物,通过靶细胞传递内含物,介导细胞与细胞之间的通讯。孕妇血浆中由胎盘释放的外泌体浓度是未孕女性的50倍,子痫前期患者体内外泌体的蛋白和mi RNA的表达水平发生了变化,使母体滋养细胞侵袭能力不足、降低内皮细胞的功能和血管生成能力,导致子痫前期等病理性妊娠。所以孕妇血浆中外泌体表达谱的改变可应用于胎盘功能紊乱的临床诊断。
- 贾林燕周倩王凯
- MTA3通过β-hCG调控上皮性卵巢癌侵袭转移的机制研究被引量：4
- 2017年
- 目的探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)转移相关基因3(metastasis associated gene 3,MTA3)的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系。方法收集晚期(FIGOⅢ-Ⅳ期)EOC术中冰冻标本(8例)及石蜡标本(21例),qRT-PCR和IHC检测卵巢部位肿瘤组织和转移瘤组织中MTA3的表达;Transwell细胞迁移实验观察下调MTA3、下调β-hCG、同时下调MTA3和β-hCG的EOC细胞株(SKOV3和ES-2)体外迁移力的变化。EOC细胞体外分别转染50、100、200 nmol/L siRNA-MTA3,qRT-PCR检测分析MTA3和β-hCG的表达相关性;qRT-PCR及Western印迹法检测分析下调MTA3对β-hCG以及上皮间质转化(EMT)标记物E-cadherin、N-cadherin表达的调控作用。结果qRT-PCR、IHC示EOC转移瘤组织中MTA3的表达显著低于卵巢部位肿瘤组织(P<0.05);Transwell细胞迁移实验示下调MTA3显著增强了EOC细胞的迁移能力(P<0.001),下调β-hCG显著降低了EOC细胞的迁移能力(P<0.001),下调MTA3下调β-hCG显著降低了EOC细胞的迁移能力(P<0.001);qRT-PCR示MTA3与β-hCG的表达呈显著负相关(P<0.05);qRT-PCR、Western印迹法示MTA3下调时,β-hCG和N-cadherin的表达显著上调,而Ecadherin的表达则显著下调。结论 MTA3可能通过β-hCG干预EM T进程,进而调控上皮性卵巢癌侵袭转移。
- 彭书敏王凯詹光熙美丽古丽.莫合买提郭晓青
- 关键词：上皮性卵巢癌Β-HCGEMT肿瘤转移
- 芳香烃受体(AHR)在胎盘生成中的作用被引量：4
- 2013年
- 胎盘是连接母体与胎儿的重要器官,在维持正常的妊娠过程中发挥着重要的作用。胎盘的结构和功能异常不仅易引发妊娠期高血压和糖尿病等妊娠并发症,还易导致早产、胎儿宫内生长受限(intrauterine growth retardation,IUGR)、流产等不良妊娠结局。芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AHR)作为一种配体激活性转录蛋白,参与了生殖调控、免疫功能调节、血管重塑等一系列重要的生理活动。AHR与滋养细胞的增殖和凋亡密切相关,并且具有调节滋养细胞细胞周期的作用。AHR在胎盘血管的生成及血流量的调节中也发挥着重要的作用,它通过调节促血管生成因子与血管生成抑制因子的平衡,参与胎盘血管的正常发育生长;同时AHR还很可能在胎盘的生长发育中介导了胎盘血管的生成以及滋养细胞的侵袭能力;AHR表达异常直接导致了相关妊娠期疾病的发生。
- 陈晓赵真王凯段涛
- 关键词：胎盘滋养细胞血管发生
- 肿瘤相关巨噬细胞通过分泌IL-10影响上皮性卵巢癌肿瘤微环境中T细胞亚群Treg/Th17失衡被引量：13
- 2014年
- 目的:探讨M2型肿瘤相关巨噬细胞(TAM)是否为上皮性卵巢癌外周血和肿瘤微环境中Treg/Th17比例失衡的影响机制之一。方法:流式细胞术检测M2型细胞与CD4+T细胞共培养后Treg/Th17比例变化,Western blot检测T细胞中的转录因子Foxp3及RORrt水平,ELISA检测共培养上清中IL-10的含量,结晶紫检测上清对肿瘤细胞增殖的影响,Transwell法检测上清对肿瘤细胞迁移能力的影响,分析TAM细胞对Treg/Th17失衡影响的机制。结果:①CD4+T细胞与M2型巨噬细胞共培养后,Treg/Th17比例为0.76±0.33相比Control组0.41±0.25,M0组0.40±0.32,M1组0.31±0.16有显著增高(P<0.05);②共培养上清对Skov3细胞具有显著的促增殖能力,共培养1 d后,M2组为14 942.43±434.19较Control组:12 445.57±179.34,CD3/28组12 470.32±434.18明显上升(P<0.001);共培养2 d后,M2组为30 129.09±520.53较Control组25 622.81±897.07,CD3/28组25 721.62±1 808.60显著提高(P<0.05);③共培养后的T细胞中,Treg特异性转录因子Foxp3上调(P=0.047),Th17特异性转录因子RORrt出现下降趋势但无统计学差异(P=0.294)。④T细胞与M2细胞共培养3 d后上清中IL-10含量为(264.04±75.9)pg/ml,较CD3/28组(60.89±46.54)pg/ml,M0组(44.81±32.93)pg/ml,M1组(42.71±26.09)pg/ml均显著提高(P=0.001)。结论:M2型TAM细胞促进Treg/Th17比例增加,上调Treg特异性转录因子Foxp3,下调Th17特异性转录因子RORrt。同时,TAM与T细胞共培养上清具有显著促进肿瘤细胞增殖和迁移的能力。而这一机制可能是与其促进IL-10分泌增多有关。
- 吴小丽张婷王昕婧王凯汪希鹏
- 关键词：上皮性卵巢癌TAMIL-10
- 卵巢上皮性癌中表达Tie2单核巨噬细胞的研究被引量：2
- 2013年
- 目的 探讨卵巢上皮性癌(EOC,epithelial ovarian cancer)患者外周血和癌旁腹膜中表达Tie2单核巨噬细胞(Tie2-expressing moncytes/macrophages,TEMs)的分布情况。方法 2011年7月至2012年12月于同济大学附属第一妇婴保健院,分离正常成年女性、卵巢良性肿瘤及EOC患者外周血单核细胞;RT-PCR检测Tie2 mRNA的表达情况,流式细胞术检测Tie2^+细胞占CD14^+外周血单个核细胞的比例;免疫荧光技术分析TEMs在良性卵巢肿瘤、EOC原位灶及癌旁腹膜中的浸润情况。结果 正常成年女性、良性卵巢肿瘤及EOC患者外周血单核细胞在mRNA和蛋白水平均表达Tie2;良性卵巢肿瘤及EOC患者外周血TEMs的比例分别为(9.41±5.93)%、(1.82%~23.45%)和(7.99±3.90)%(1.71%~15.03%),较正常对照组(4.13±2.86)%(1.18%~9.56%)比例增加,差异有统计学意义(P<0.05);形态学研究证实EOC患者癌旁腹膜中浸润着数量丰富的TEMs(15.17±8.84)%(2.27%~25.81%),而良性卵巢肿瘤患者腹膜中几乎没有TEMs的浸润。结论 EOC患者外周血、原位灶及癌旁腹膜组织中存在表达Tie2的单核巨噬细胞;TEMs比例在EOC患者外周血、腹膜局部显著上升,有利于肿瘤微环境中血管的生成,从而参与调控卵巢癌的进展。
- 吴丽王凯吴小丽胡婧赵肖波汪希鹏
- 关键词：TIE2单核细胞卵巢肿瘤
