王剑锋
- 作品数：27 被引量：106H指数：7
- 供职机构：东华理工大学化学生物与材料科学学院更多>>
- 发文基金：江西省教育厅科学技术研究项目重庆市科技攻关计划江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 新型高活性耐热真菌漆酶发酵生产技术
- 本文在分离筛选漆酶产生菌黑烟管菌等多种真菌菌种,并在实验室进行菌种驯化、发酵工艺和漆酶分离提取技术的前期研究基础上,采用200L发酵罐对漆酶的小试发酵生产工业进行了探讨,产酶达到9000IU/ML以上,超过目前国内外报道...
- 苏国成王剑锋王璋
- 关键词：真菌漆酶发酵技术
- 文献传递
- 棘孢木霉胞外β-糖苷水解酶的产生条件及基本特征被引量：2
- 2010年
- 分离自煤炭样品的菌株Trichderma asperellumW03在液态培养条件下能同时分泌产生3种酶学性质相近的β-糖苷水解酶：木聚糖酶、羧甲基纤维素酶和几丁质酶,3种酶的最适反应温度分别为45、45和40℃,最适反应pH值为4.5并且在pH值2.5－5.0的条件下酶活稳定;3种活性酶的合成与菌体生长偶联,对碳源、氮源、KH2PO4、MgSO4、CaCl2、pH值和发酵时间等培养因素的响应趋势一致。优化的产酶培养基为（g/L）：土豆200、羧甲基纤维素钠2.0、葡萄糖5.0、KNO31.0、蛋白胨1.0、KH2PO41.0、MgSO4.7H2O 0.5、pH 6.0;在33℃、180 r/min和50 mL/250mL的摇瓶培养条件下发酵72 h,木聚糖酶、CMC酶和几丁质酶的酶活分别达到87u/mL,58u/mL和30 u/mL,该菌株在生物防治和饲料加工方面具有潜在应用价值。
- 王剑锋李江杨红谭可张浩刘亚洁
- 关键词：木聚糖酶几丁质酶生物防治
- 黑曲霉耐酸性α-半乳糖苷酶的分离及其酶学性质被引量：3
- 2012年
- 采用耐酸性黑曲霉(Aspergillus niger L.)发酵豆渣产α-半乳糖苷酶,粗酶液依次经过聚乙二醇6000-KH2PO4双水相萃取、Sephadex G-100凝胶过滤,获得了电泳纯的α-半乳糖苷酶,纯化倍数为36.4,总酶活力回收率达到70%。凝胶过滤表明:该酶表观分子质量为125kD,SDS-PAGE显示其分子质量为58.5kD。该酶水解对硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷的最适pH值为4.0,最适温度为65℃,表观Km值为0.915mmol/L,表观kcat/Km值为1.07×105L/(mol.s);水解蜜二糖的表观Km、kcat/Km值分别是21.0mmol/L、9.96×103L/(mol.s);对棉子糖只有微弱的水解作用。水解活性受多种金属离子的普遍抑制,其中Fe3+、Fe2+、Mn2+、Hg+等强烈抑制酶活力。该酶活力在pH1.5～8.2保持稳定,在60℃时保温60min,剩余酶活力达到了60%,是一种热稳定酸性α-半乳糖苷酶。
- 王剑锋王璋李江饶军
- 关键词：双水相萃取Α-半乳糖苷酶
- 黑曲霉发酵豆渣产酸性β-葡萄糖苷酶及其水解京尼平苷的性质被引量：1
- 2011年
- 利用单因素、正交试验考察了黑曲霉L菌株发酵豆渣产β-葡萄糖苷酶的条件和酶解京尼平苷的特性。结果表明:2%豆渣适宜作为实验菌株液体发酵产酶培养基,当培养基中接种孢子浓度大于每毫升2×105个时,菌株产酶受发酵温度、装液量的影响显著,而不受接种量、摇床转速的影响,培养基初始pH值1.5时,菌株仍能正常产酶;优化的产酶培养基组成为豆渣1%、米糠1%和Tween 800.1%,初始pH值5.5;菌株在发酵温度28℃、装液量50 mL(250 mL摇瓶)、摇床转速150 r/min的发酵条件下发酵120 h,发酵液酶活为(200±10)U/mL。所产β-葡萄糖苷酶水解京尼平苷的最适温度为55℃、最适pH值2.5、最佳水解时间15 min;在该条件下酶的表观米氏常数(Km)为1.35 g/L,最大水解速率(Vmax)为26.45 g/(L.min.mg),酶活半衰期为15 min,50℃时大于60 min;酶的水解活性受Na+、Ca2+的显著激活,受Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Hg+、Zn2+、Mn2+等离子(10 mmol/L)和葡萄糖、乙醇的抑制。
- 王剑锋徐琼肖志强余奇峰钱皇辉熊飞飞
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶豆渣京尼平黑曲霉
- 热稳定酸性β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学性质被引量：3
- 2012年
- 耐酸性黑曲霉菌株Aspergillus niger L.的菌丝体破碎液依次经过乙醇沉淀、离子交换层析和凝胶过滤等步骤处理,获得电泳纯的β-葡萄糖苷酶,SDS-PAGE显示其分子质量为125.7kD。β-葡萄糖苷酶水解对硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷的最适pH值为3.0～4.0,最适温度为70℃,表观米氏常数(Km)值为2.35mmol/L,表观kcat/Km值为2.99×104L/(mol.s);水解京尼平苷、水杨苷的表观kcat/Km值分别是1.26×104、1.37×104L/(mol.s);水解活性受Mn2+的显著激活和Fe2+、Zn2+、Cu2+等离子的微弱抑制。该酶活性在pH2.0～8.3保持稳定;酶在65℃时保温60min,残余酶活达到了85%,是一种热稳定酸性β-葡萄糖苷酶。
- 陈今朝王剑锋王慧超谭永忠
- 关键词：乙醇沉淀京尼平苷Β-葡萄糖苷酶
- 烟管菌漆酶的分离纯化及部分酶学性质研究被引量：13
- 2008年
- 烟管菌Bjerkandera adustaWZFF.W-Y11漆酶粗酶液经过丙酮分级沉淀、DEAE-Cellulose离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤,得到了三种电泳纯的漆酶同工酶,总酶活回收率达到65.5%,其中LacA平均纯化了29.2倍,LacB纯化了5.1倍,LacC纯化了18.5倍;三种同工酶的分子量分别为LacA:68.7kDa、LacB:80.2kDa、LacC:77.2kDa。LacA、LacC氧化愈创木酚的Km大于氧化ABTS的Km,最适作用温度在45-70℃,最适反应pH3.0-5.5,65℃时LacC比LacA稳定,LacC在pH3.5-6.0稳定,LacA在pH5.0-9.0稳定,Al3+对LacA、LacC的酶活有促进作用,Cl-、Fe3+、Hg2+抑制LacA、LacC的酶活,Cu2+抑制LacC的酶活,而对LacA的活性没有明显影响。
- 王剑锋王璋饶军李江白涛
- 关键词：同工酶凝胶过滤愈创木酚
- 分泌胞外漆酶大型真菌的分离及高产菌株选育
- 漆酶(苯二醇:氧氧化还原酶,EC 1．10．3．2)是一种含多个铜原子的多酚氧化酶,属单电子氧化酶,能催化氧化6大类近300种包含多酚、芳胺及其相应衍生物等许多难以降解的物质,在氧化底物的同时把氧还原为水。漆酶底物的广泛...
- 王剑锋王璋
- 文献传递
- 漏斗多孔菌液体发酵产漆酶条件研究被引量：9
- 2009年
- 采用单因子实验分析了培养基成分及初始pH对漏斗多孔菌液体发酵产漆酶的影响。结果表明,米糠和甘蔗半纤维素组成复合碳源、NH4Cl和高C/N有利于漆酶的产生,Cu2+、米糠水解液和萘乙酸对漆酶合成具有诱导作用,1-萘酚、愈创木酚、联苯胺、乙醇、吐温80等抑制漆酶的合成,Cu2+和萘乙酸同时存在时也限制漆酶的产生,产酶培养基最适初始pH为5.2-5.7。利用优化的产酶培养基液体摇瓶培养漏斗多孔菌A08,产酶活力提高0.95倍,达到1480U/L。
- 王剑锋王璋李江饶军
- 关键词：生长调节剂半纤维素
- 烟管菌漆酶合成的营养条件研究被引量：21
- 2006年
- 对筛选到的漆酶高效产生菌烟管菌(Bjerkandera adusta)WZFF．W-Y11合成漆酶的营养条件进行了研究,发现该烟管菌漆酶属于一种组成型酶,酶活力高,产酶高峰到来早,酶的合成与菌体生长过程紧密相关。漆酶合成需要丰富的营养因子,麸皮水解液是重要的成分,葡萄糖-淀粉的复合碳源和氯化铵-豆饼粉的复合氮源以及适量的无机盐有利于漆酶的产生。虽然增加 Fe^(2+)的量明显抑制了漆酶的产生,但 Cu^(2+)却能有效地促进漆酶的合成。在经过优化的培养条件下,酶活力高达1 108 U/mL。
- 王剑锋苏国成刘建玲王璋
- 关键词：漆酶营养条件
- 产漆酶木腐真菌的筛选、鉴定及部分酶学性质被引量：2
- 2009年
- 综合菌体培养方式和培养基组成对菌株产漆酶性能的影响,对68株木腐菌进行了筛选,获得了1株适合液态发酵产漆酶的漏斗多孔菌A08,酶学性质研究表明,漆酶反应最适温度为60-65℃,最适pH为5.5,60℃时酶活半衰期大于45min,20℃酶活性在pH3.0-9.0稳定,漆酶活性受Cl-、Ca2+、Fe2+抑制,Mn2+激活,K+、Mg2+、Zn2+、Cu2+等对酶活性没有显著影响。
- 王剑锋李江饶军王璋
- 关键词：漆酶酶学性质
