王玉柱
- 作品数：49 被引量：137H指数：7
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- 肿瘤易感基因101对肝癌细胞增殖侵袭转移的影响
- 2016年
- 目的观察肿瘤易感基因101（TSG101）对肝癌细胞的增殖、侵袭、转移的影响。方法建立稳定表达TSG101的肝癌细胞株，将细胞分为转染组、空质粒组、空白对照组，通过细胞计数试剂盒（CCK-8）增殖实验观察各组细胞增殖；通过Transwel小室侵袭实验观察各组细胞侵袭能力；通过Transwel小室迁移实验观察各组细胞转移能力。结果（1）CCK-8增殖实验可见TSG101组36h后细胞增殖比例（1．93±0．45）明显高于空白对照组（1．28±0．51）与空质粒组（1．31±0．29），且差异有统计学意义（P〈0．05）；空白对照组与空质粒组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；（2）Transwell小室细胞侵袭实验：TSG101组[（125．0±10．3）个]细胞穿透个数明显高于空白对照组[（83．0±8．7）个]与空质粒组[（85．0±9．2）个]，且差异有统计学意义（P〈0．05）；空白对照组与空质粒组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；（3）Transwell小室细胞迁移实验：TSG101组[（88．0±7．0）个]穿透细胞个数高于空白对照组[（59．0±6．8）个]与空质粒组[（53．0±7．7）个]，且差异有统计学意义（P〈0．05）；空白对照组与空质粒组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论高表达TSG101蛋白的肝癌细胞增殖、侵袭、转移能力均增强。
- 胡明星付强张旭王玉柱刘传江何冬梅
- 关键词：癌细胞增殖
- 活化激酶C受体1对胆管癌细胞迁移和侵袭能力的影响被引量：5
- 2021年
- 目的:检测活化激酶C受体1(RACK1)在胆管癌细胞中的表达,探讨其对胆管癌细胞生物学表型的影响。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RACK1在人正常胆管上皮细胞HIBEC和2株胆管癌细胞RBE、HUH28中的表达水平。采用t检验分析RACK1细胞水平表达差异。慢病毒构建RACK1低表达稳定株,分为sh-RACK1-1、sh-RACK1-2组和阴性对照组(NC-RACK1组),qPCR检测其转染效率;Transwell实验检测胆管癌细胞的迁移和侵袭能力。采用t检验分析敲低RACK1后胆管癌细胞的迁移和侵袭能力变化。结果:qPCR结果显示RACK1在RBE、HUH28胆管癌细胞株中的表达量(3.45±0.92、3.21±0.33)明显高于人正常胆管上皮细胞HIBEC(1.43±0.58,t=21.965、24.153,P<0.01),差异均有统计学意义;Western blot结果表明RACK1在RBE和HUH28胆管癌细胞株中的表达水平明显高于人正常胆管上皮细胞HIBEC;Transwell迁移实验结果提示RBE中sh-RACK1-1、sh-RACK1-2组细胞穿膜数量为[(261.89±8.65)、(231.07±9.73)个/视野],明显低于NC-RACK1组[(430.19±10.15)个/视野,t=30.684、24.380,P<0.01],差异均有统计学意义;HUH28中sh-RACK1-1、sh-RACK1-2组细胞穿膜数量[(253.57±7.28)、(210.11±6.09)个/视野]低于NC-RACK1组[(424.78±8.03)个/视野,t=35.442、36.781,P<0.01],差异均有统计学意义;侵袭实验结果表明RBE中sh-RACK1-1、sh-RACK1-2组细胞穿膜数量为[(52.15±1.43)、(60.58±2.01)个/视野]明显低于NC-RACK1组[(125.39±4.03)个/视野,t=9.935、12.566,P<0.05],差异均有统计学意义;HUH28中sh-RACK1-1、sh-RACK1-2组细胞穿膜数量[(60.91±1.30)、(51.19±0.96)个/视野]低于NC-RACK1组[(150.88±7.28)个/视野,t=13.554、15.328,P<0.01],差异均有统计学意义。结论:RACK1在胆管癌细胞中表达上调,降低RACK1表达后可抑制胆管细胞迁移及侵袭能力,RACK1可促进胆管癌发生发展。
- 许立霞付强胡明星王玉柱秦涛
- 关键词：胆管癌迁移
- 微小RNA-92b在大鼠急性胰腺炎中对腺泡细胞凋亡的影响被引量：7
- 2013年
- 目的观察微小RNA-92b（miRNA-92b）在大鼠急性胰腺炎中的表达及其对急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的影响。方法以50μg/L肿瘤坏死因子（TNF）-α诱导大鼠胰腺腺泡细胞（AR42J）建立体外急性水肿型胰腺炎模型，未处理的AR42J作为对照，检测干预12h后培养基中淀粉酶含量，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测miRNA-92b在1、3、6h时表达量变化。慢病毒携带miRNA-92b的模拟物（miRNAmimic）及反义寡核苷酸链（miRNAAMO）转染AR42J，转染空病毒组作为对照。建立体外急性胰腺炎模型后，使用FQ-PCR检测miRNA-92b表达量；流式细胞术检测AR42J细胞凋亡率，Westernblot法检测活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3（Caspase-3）表达量变化。结果TNF—α.诱导AR42J建立的体外急性胰腺炎模型，miRNA-92b3h表达水平较对照组升高（1．81±0．09）倍（P〈0．05）；转染miRNA-92bmimic组miRNA-92b表达量较空病毒组升高（3．71±0．33）倍（P〈0．05），AR42J凋亡率[（41．20±2．42）％]较空病毒组[（23．50±1．85）％]明显升高（P〈0．05），活性Caspase-3表达量明显升高；转染miRNA-92bAMO组较空病毒组miRNA-92b表达量降低（O．58±0．15）倍（P〈0．05），AR42J凋亡率[（13．80±0．40）％]较空病毒组[（23．50±1．85）％]明显降低（P〈0．05），活性Caspase-3表达量明显降低。转染空病毒组较未转染组miRNA-92b表达量、细胞凋亡率、活性Caspase-3表达量差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论急性水肿性胰腺炎发生时miRNA-92b表达量明显升高；上调miRNA-92b的表达，胰腺腺泡细胞的凋亡率增高，下调其表达胰腺腺泡细胞的凋亡率降低。
- 付强张宏伟秦涛刘传江胡明星唐强王玉柱薛飞张莉
- 关键词：急性胰腺炎脱噬作用微小RNA
- 骨髓间充质干细胞对大鼠慢性胰腺炎中星状细胞的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察骨髓间充质干细胞（BMSCs）对慢性胰腺炎（CP）中星状细胞（PSC）的活化、增殖和分化的影响。方法将80只SD大鼠随机分为空白组（20只，注射无菌生理盐水）、模型组[20只，尾静脉注射二氯二丁基酯（DBTC）制作大鼠CP模型]、治疗组（20只，于CP模型制作成功后尾静脉注射体外培养的同种异体GFP-MSCs）、假治疗组（20只，于CP模型制作成功后尾静脉注射等量的无菌生理盐水）。取大鼠胰腺检测PSC活化表达的Desmin、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）水平，组织中Ⅰ、Ⅲ胶原含量及白细胞介素（IL）-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α、转化生长因子（TGF）-β1表达水平。结果治疗组PSC表达的Desmin、GFAP、α-SMA，组织中Ⅰ（0．135±0．030）ng／g、Ⅲ胶原含量（0．029±0．008）ng／g，TGF-β1（0．020±0．006）μg／L浓度均低于假治疗组（P〈0．05），但IL-10（603．799±89．374）g/ml，TNF-α（507．45±90．13）μg／L均高于假治疗组（P〈0．05），后者与模型组之间的差异无统计学意义（P〉0．05），空白组未见明显异常。结论BMSCs可以通过对细胞因子的调控减少PSC的活化，抑制其增殖及分化，降低细胞外基质的沉积。
- 刘传江秦涛刘健康唐强王玉柱张宏伟
- 关键词：骨髓间充质干细胞慢性胰腺炎星状细胞
- 微小RNA在大鼠慢性胰腺炎与正常胰腺组织中的表达差异被引量：1
- 2014年
- 目的 比较大鼠慢性胰腺炎（CP）胰腺组织与正常胰腺组织微小RNA （miRNA）表达谱的差异,探讨CP发病中潜在的关键调节作用的miRNA及其靶基因功能.方法 将16只SD大鼠随机分为实验组和对照组,分别尾部静脉注射二氯二丁基酯和无菌生理盐水建立模型,8周后检测血清淀粉酶及胰腺组织病理变化.检测分析胰腺组织miRNA表达谱差异,对差异表达的miRNA进行靶基因预测、Gene Ontology（GO）分析和信号通路分析.结果 实验组与对照组血清淀粉酶、病理组织学评分差异有统计学意义（P＜0.05）;两组miRNA表达谱差异明显,与对照组胰腺组织比较,实验组胰腺组织中上调miRNA共49个,下调miRNA共37个（变化倍数＞2.0,P＜0.05）,上调的部分miRNA参与胰腺组织的纤维化和细胞的凋亡.在差异表达miRNA中有24个（占27.91％）可以找到相应的靶基因,GO分析结果表明靶基因在细胞物质代谢、增殖周期、信号传导、胞外结构活动、细胞器合成等过程中起重要调节作用;信号通路分析表明基因在代谢通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路、癌症通路和Hedgehog信号通路等富集有显著变化.结论 慢性胰腺炎大鼠胰腺组织与正常大鼠胰腺组织中miRNA表达谱差异有统计学意义,miRNA通过调节靶基因的表达参与调控代谢通路、MAPK信号通路、癌症通路和Hedgehog信号通路等,在胰腺实质纤维化的进展和癌变中起重要调节作用.
- 张宏伟罗乾坤秦涛刘传江胡明星王玉柱
- 关键词：慢性胰腺炎微小RNA
- 环氧化酶-2、血管内皮生长因子-C和CD44v6在胰腺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系被引量：1
- 2009年
- 目的探讨胰腺癌组织中环氧化酶（COX）-2、血管内皮生长因子（VEGF）-C和CD44v6蛋白的表达及与胰腺癌病理学特征的关系。方法采用免疫组织化学（ABC）法检测48例胰腺癌组织和14例癌旁组织中COX-2、VEGF-C和CD44v6蛋白的表达。结果48例患者的胰腺组织中，COX-2、VEGF—C和CD44v6均呈高表达，阳性表达率分别为79．2％、58．3％、62．5％，而在癌旁组织中均未见表达，差异有统计学意义（P〈0．01）。COX-2、VEGF—C和CD44v6蛋白表达与性别、分期、分化程度无明显相关（P均〉0．05），而VEGF—C和CIM4v6与淋巴结转移正相关（P〈0．05）。COX-2与VEGF—C蛋白表达相关（P〈0．05），而与CD44v6无明显相关（P〉0．05）。结论COX-2、VEGF—C、CD44v6蛋白在胰腺癌组织中呈高表达，VEGF—C、CD44v6表达与肿瘤的有无淋巴结转移有关，可作为胰腺癌浸润、转移的重要指标。
- 张宏伟胡明星秦涛唐强王玉柱张莉
- 关键词：胰腺肿瘤环氧化酶-2血管内皮生长因子
- 沙利度胺对肝癌BEL7402细胞株细胞周期和血管内皮生长因子表达的影响被引量：6
- 2016年
- 目的观察沙利度胺对肝癌BEL7402细胞株体外生长及对血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法体外培养BEL7402细胞株，加入不同浓度（25、50、100μg／ml）的沙利度胺体外培养24h，同时设空白对照组；采用噻唑蓝（MTT）法检测沙利度胺对肝癌BEL7402细胞株增殖的抑制率；流式细胞术分别检测细胞周期分布状况；反转录．聚合酶链反应（RT—PCR）检测沙利度胺作用后血管内皮生长因子基因表达水平的变化。结果沙利度胺抑制肝癌BEL7402细胞增殖，呈浓度依赖性，当200彬L浓度沙利度胺作用24h，其抑制率为46．73％。流式细胞术结果显示加入25、50、100μg／ml沙利度胺干预后，G0／G1期细胞比例增加为46．41±2．02、2．15±3．22、68．11±1．84，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），S期细胞比例下降为39．20±1．45、28．08±2．56、18．33±2．15，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。RT-PCR检测结果显示加入25、50、100μg／ml沙利度胺干预后，VEGFmRNA相对表达量分别为0．382±0．310、0．206±0．250、0．098±0．460，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论沙利度胺抑制肝癌BEL7402细胞增殖、诱导细胞周期G0／G1期阻滞，其作用机制可能与沙利度胺下调VEGF的表达有关。
- 秦涛胡明星王玉柱付强张旭潘延凤
- 关键词：肝细胞沙利度胺细胞周期
- 葛根素对人胆管癌RBE细胞凋亡的影响
- 2018年
- 目的观察葛根素对人胆管癌（RBE）细胞增殖和凋亡的影响，及其相关基因表达量变化。方法RBE细胞培养后，使用不同浓度（0、100、250、500、1 000、1 500 μg/ml）的葛根素处理细胞，噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力；（500、1 000 μg/ml）葛根素处理RBE细胞，流式细胞学技术（FCM）检测细胞凋亡；实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关X蛋白（bax）基因的表达；Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果MTT法细胞活力检测显示高浓度葛根素（500、1 000、1 500 μg/ml）以时间-剂量依赖的方式抑制RBE细胞的增殖，12 h抑制率[（8.14±1.85）%、（12.57±3.10）%、（18.26±2.74）%，P＝0.000、0.005、0.003]，24 h抑制率[（22.38±2.77）%、（29.14±3.85）%、（37.43±2.11）%，P＝0.005、0.007、0.002]，48 h抑制率[（35.47±3.75）%、（40.81±2.52）%、（52.29±3.98）%，P＝0.007、0.000、0.002]差异均有统计学意义；（500、1 000 μg/ml）葛根素处理RBE细胞24 h后，RBE细胞凋亡率[（14.21±2.53）%、（22.87±2.74）%]较对照组[（3.246±2.25）%]明显升高，差异有统计学意义（P＝0.013、0.008）；凋亡基因bax表达量与对照组（0.98±0.04）比较升高[（2.37±0.17）、（3.78±0.41）倍，P＝0.005、0.003]，bcl-2表达量与对照组（0.99±0.03）比较下降（1.57±0.14、2.86±0.55）倍（P＝0.002、0.008），差异均有统计学意义；活化半胱酰胺天冬氨酸特异性蛋白酶（Cleaved-caspase）-8、Cleaved-Caspase-9蛋白及bax蛋白表达水平升高（P＝0.015、0.003、0.008），bcl-2蛋白表达水平降低（P＝0.021），差异均有统计学意义。结论葛根素具有抑制RBE细胞增殖，促进其凋亡的作用。
- 李彬彬付强王玉柱胡明星刘传江秦涛
- 关键词：葛根素胆管癌增殖脱噬作用
- 微小RNA-135a通过抑制其靶基因Sp3的表达促进大鼠胰腺腺泡细胞凋亡被引量：7
- 2016年
- 目的探讨微小RNA135a（miR-135a）是否通过抑制其靶基因Sp3基因的表达促进大鼠急性水肿性胰腺炎中胰腺腺泡细胞（AR42J）凋亡。方法设计miR-135a模拟物及反义寡核苷酸链，并通过慢病毒转染AR42J细胞，72h后于荧光显微镜下观察AR42J细胞荧光表达量，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ．PCR）法检测转染后miR-135a的表达量。使用50陆∥L重组大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF—α）诱导AR42J细胞建立体外急性水肿性胰腺炎模型（AEP），淀粉酶试剂盒检测培养基上清淀粉酶含量，Westernblot法检测活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达量，流式细胞术检测AR42J细胞的凋亡率。构建Sp3野生型（WT）和突变型（Mut）3’非编码区（3’UTR）-荧光素酶报告载体，通过荧光素酶报告系统检测miR-135a对Sp3基因野生型及突变型3’UTR荧光素酶活性的影响，并通过FQ—PCR和Westernblot法检测转染miR-135a模拟物及反义寡核昔酸链后Sp3基因mRNA及蛋白表达量变化。结果转染miR-135a模拟物组较转染空病毒组miR-135a表达量升高（5．84±0．16）倍，转染miR-135a反义寡核苷酸链组miR-135a表达量是转染空病毒组的（0．54±0．01）倍，差异均有统计学意义（P〈0．05）。建立急性水肿性胰腺炎模型后，转染miR-135a模拟物组AR42J细胞凋亡率[（40．63±3．24）％]较转染空病毒组[（25．40±0．79）％]明显升高，转染miR-135a反义寡核苷酸链组AR42J细胞凋亡率[（15．10±0．10）％]较空病毒组明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。生物信息学软件及荧光素酶定量实验结果表明Sp3是mill-135a的靶基因，转染miR-135a模拟物组s03mRNA及蛋白质表达量较转染空病毒组明显降低，转染miR-135a反义寡核苷酸链组Sp3mRNA及蛋白质表达量较空病毒组明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-135a可能能够通过抑制其靶�
- 付强秦涛刘传江陈琳楚皓源胡明星王玉柱张宏伟
- 关键词：急性水肿性胰腺炎胰腺腺泡细胞
- 重症急性胰腺炎的个体化诊治体会被引量：5
- 2011年
- 目的探讨重症急性胰腺炎的临床特点及个体化治疗方法,以提高诊治水平,降低病死率。方法回顾性分析63例重症急性胰腺炎患者的临床资料。结果保守治疗46例,手术治疗17例;总治愈率为88.9%(56/63),其中非手术组治愈率为91.3%(42/46),手术组治愈率82.4%(14/17)。结论正确把握重症急性胰腺炎的个体化诊治原则可提高治愈率。
- 王玉柱张莉秦涛薛飞胡明星唐强张宏伟
- 关键词：个体化预后
