王金平
- 作品数：13 被引量：60H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 自身免疫性心肌病小鼠免疫球蛋白G亚类和Th细胞亚群分析被引量：4
- 2005年
- 目的:探讨Th细胞介导的免疫应答在自身免疫性扩张型心肌病(DCM)发生中的作用趋势。方法:应用 线粒体ADP/ATP载体肽(免疫应答组)和不含肽的免疫液(对照组)免疫Balb/c小鼠,试验期内(6个月)光镜和电 镜观察心肌组织病理学变化,ELISA法检测其血清抗ADP/ATP载体自身抗体及IgG亚类水平,三色荧光标记的流 式细胞术测其脾细胞中Th细胞亚群分布。结果:免疫应答组小鼠自身抗体均为阳性,且在免疫过程中其抗体水平、 血清IgG1及IgG2a亚类、Th1/Th2细胞亚群含量均持续高于对照组(P均<0.01)。免疫的第1个月末,免疫应答 组小鼠心脏形态及病理学变化类似心肌炎,IgG2a亚类与Th1细胞亚群在体内占优势;第6个月末,心脏改变类似 扩张型心肌病,且以IgG1与Th2亚群为主,对照组均正常。结论:线粒体ADP/ATP载体肽可诱导小鼠血清IgG2a 向IgG1优势的转化,此转化与Th1、Th2免疫应答分别在自身免疫性DCM发生的早期和后期阶段起优势作用有关。
- 袁璟廖玉华汪朝晖张景辉董继华王金平
- 关键词：IGG亚型TH1/TH2细胞亚群ADP/ATP载体小鼠
- 对ANT合成肽诱导的自身免疫性心肌病传染性耐受的小鼠T细胞信号机制分析被引量：1
- 2008年
- 目的:通过对T细胞信号分子和CD45的表达分析探讨T细胞信号转导在自身免疫性心肌病小鼠传染性耐受中的作用。方法:用含有人线粒体腺苷酸转位酶(ANT)多肽的免疫液多次免疫BALB/c小鼠得到心肌病组(n=6),单抗组(n=6)小鼠在给予ADP/ATP肽免疫的第0、1和2天,同时接受尾静脉注射400μg抗L3T4单抗;第180天时,将单抗组小鼠的脾淋巴细胞取出转输到正常小鼠体内(转输组,n=6),此小鼠亦同时给予多肽免疫,方法同心肌病组。正常对照组(n=6),以不含多肽的盐水免疫小鼠,时间和剂量同心肌病组。以实时荧光定量PCR法检测各组小鼠T细胞中的信号分子(p56lck、p59fyn和zap-70)mRNA的表达;免疫组化法观察其T细胞表面CD45的表达;流式细胞术检测其Th细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4的含量。结果:过继转输组小鼠T细胞内三个信号分子的mRNA表达均受到抑制,T细胞表面CD45的表达强度亦明显低于心肌病组;通过流式细胞术检测到的IFN-γ和IL-4的含量在转输组亦明显降低。结论:T细胞信号机制在自身免疫性心肌病的发病机制中起重要作用,通过对T细胞信号通路的干预,可能阻止实验鼠自身免疫性心肌病的发生。
- 汪朝晖袁璟廖玉华王敏张景辉田元董继华王金平
- 关键词：心肌病T细胞细胞因子信号转导CD45
- 扩张型心肌病小鼠Th1/Th2细胞亚群及其相关细胞因子的分析被引量：7
- 2005年
- 目的:探讨体液免疫在扩张型心肌病发病机制中的重要性。方法:以线粒体腺苷酸转位酶(adeninenucleotidetranslocator,ANT)合成肽免疫液免疫小鼠建立扩张型心肌病动物模型(DCM组) ,运用三色荧光标记流式细胞术检测其脾淋巴细胞中Th细胞亚群分布,ELISA法检测其血清细胞因子IFN γ、IL 4、IL 2、IL 6、TNF α的表达及其抗ANT自身抗体的产生。以不含肽的免疫液免疫小鼠为对照组。结果:DCM组小鼠Th1及Th2细胞亚群较对照组均有增多,以Th2更为显著,且Th1/Th2比值明显低于对照组(P均<0 0 1) ;IL 4、IL 6和TNF α表达明显增高,而IFN γ和IL 2却较对照组明显降低(P均<0 0 1) ;抗ANT自身抗体均为阳性,对照组为阴性。结论:ANT合成肽诱导扩张型心肌病时Th细胞均被激活,Th2细胞介导的体液免疫应答在该病发病机理中起着优势作用。
- 袁璟廖玉华汪朝晖刘仲平董继华王金平
- 关键词：扩张型心肌病流式细胞术细胞因子自身抗体
- 肌球蛋白致自身免疫性心肌疾病的实验研究被引量：17
- 2003年
- 目的 探索在没有病毒感染的情况下 ,自身免疫机制在心肌炎和心肌病发病中的作用。方法 (1)猪心肌肌球蛋白致BALB/C鼠自身免疫性心肌疾病模型的复制 :实验组 (n =32 )于实验的第 0 ,7和 30天 3次注射肌球蛋白 ,对照组 (n =2 0 )与实验组同样的时间注射弗氏完全佐剂 ,于初次免疫后的第 15 ,2 1和 12 0天分别留取血清和心肌标本。 (2 )病毒性心肌炎模型的复制 :病毒接种组 (n =2 2 )给予 10 3 TCID50 / 0 1mlCVB3 溶液腹腔注射 ,对照组 (n =10 )给予Vero细胞冻融液 0 1ml腹腔注射 ,接种时间及采样时间同肌球蛋白免疫组。 (3)抗体检测 :ELISA法检测小鼠血清抗肌球蛋白抗体。结果 病理结果显示 ,肌球蛋白致心肌炎小鼠急性期 (15和 2 1d)以心肌纤维变性坏死和淋巴细胞浸润较明显 ,间质病变较轻 ,内膜和心瓣膜无明显改变 ;慢性期 (12 0d)仅见心肌纤维化 ,急慢性期均可检测到高滴度的抗肌球蛋白抗体 (P <0 0 0 1) ,对照组为正常心肌 ,抗体滴度低。病毒接种组慢性期亦显示成纤维细胞增生。结论 心肌肌球蛋白可以作为自身抗原刺激机体产生自身免疫反应 ,在没有病毒感染的情况下 ,单一的自身免疫机制即可导致心肌炎向心肌病的转化。
- 汪朝晖廖玉华董继华李淑莉王金平
- 关键词：肌球蛋白病毒性心肌炎扩张型心肌病
- 过继转输抗L3T4单抗治疗的心肌病小鼠脾细胞对心肌抗体的影响
- 2008年
- 目的通过对心肌自身抗体的分析探讨Th细胞在自身免疫性心肌病发病机制中的作用。方法用含有人线粒体ADP/ATP载体肽的免疫液多次免疫Balb/c小鼠得到心肌病组(n=6),单抗组(n=6)小鼠在给予ADP/ATP肽免疫的第0、1和2天,同时接受尾静脉注射400μg抗L3T4单抗;第180天时,将单抗组小鼠的脾细胞取出转输到正常小鼠体内(转输组,n=6),此小鼠亦同时给予多肽免疫,方法同心肌病组。对照组(n=6),以不含多肽的盐水免疫小鼠,时间和剂量同心肌病组。以ELISA法检测各组小鼠血清抗ADP/ATP载体自身抗体水平及IgG亚型的变化;以实时荧光定量PCR法检测各组小鼠T细胞中的细胞因子mRNA的表达。结果转输组小鼠血清自身抗体在各时间点均为阴性,类似于单抗组和对照组,而心肌病组抗体水平在各时间点均显著高于对照组(P<0.01);转输组IgG1亚型的生成受到明显抑制;细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6)表达在单抗组和转输组均受到显著抑制。结论Th细胞介导的免疫应答在自身免疫性心肌病的发病机制中起重要作用。
- 汪朝晖袁璟廖玉华张莉张景辉田元董继华王金平
- 关键词：心肌病T细胞抗体
- 抗L3T4单抗对线粒体腺苷酸转移酶多肽诱导小鼠心肌病的免疫治疗被引量：9
- 2004年
- 目的 :探讨抗L3T4单克隆抗体对线粒体腺苷酸转移酶 (adeninenucleotidetranslocator ,ANT)多肽诱导的小鼠心肌病是否有治疗作用。方法 :15只雄性Balb/c小鼠分为 3组 :①免疫应答组 (n =5 ) :予ANT多肽免疫诱导心肌病的产生 ;②免疫治疗组 (n =5 ) :先予ANT多肽免疫 ,喂养 3个月后再给予抗L3T4单抗进行治疗 ;③对照组 (n =5 ) :以不含ANT合成肽的空白免疫液免疫小鼠。采用ELISA法检测血清抗ANT多肽抗体动态变化 ,实验结束时在光镜和电镜下观察小鼠心肌组织的病理改变 ,计算组织中的胶原纤维容积分数。实验期半年。结果 :免疫应答组小鼠体内均有ANT抗自身抗体的产生 ,且抗体的光密度值 (A )明显增高 ,与对照组相比差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ;免疫治疗组小鼠经抗L3T4单抗治疗后自身抗体出现反应性下降 ,其A值与免疫应答组及对照组比较差异均有统计学意义 (均P <0 .0 1) ;对照组抗体检测为阴性。病理结果显示 ,免疫应答组小鼠心肌组织出现弥漫性纤维化 ,心肌细胞线粒体和肌丝有明显损害 ,心肌胶原纤维容积分数明显高于对照组(P <0 .0 1) ;免疫治疗组小鼠心肌组织的病理改变略轻于免疫应答组 ,心肌胶原纤维容积分数介于免疫应答组和对照组之间 ;对照组心肌组织基本正常。结论
- 袁璟汪朝晖廖玉华王金平董继华
- 关键词：心肌疾病免疫疗法自身抗体
- 过继转输扩张型心肌病小鼠淋巴细胞诱导心肌损害被引量：10
- 2005年
- 目的探讨扩张型心肌病(DCM)小鼠的自身免疫学机制。方法用人线粒体ADP/ATP载体肽免疫小鼠建立扩张型心肌病模型(DCM组),分别将其以伴刀豆凝集素A(ConA)刺激和未刺激的脾淋巴细胞过继转移给同源近交系小鼠(DCM-T-A组和DCM-T组),以用不含肽的对照液体免疫的小鼠为对照组;观察各组小鼠心肌组织病理学变化,以酶联免疫吸附法检测其血清抗ADP/ATP载体自身抗体水平、实时荧光定量聚合酶链反应检测其心肌细胞因子基因表达。结果在免疫或过继后的第1和第6个月末,DCM组和以ConA刺激的DCM-T-A组小鼠血清抗ADP/ATP载体自身抗体均为阳性;心脏在前期分别出现心肌炎性细胞浸润和轻度心肌纤维化,在后期均出现心脏增大、心肌细胞溶解断裂和弥漫性纤维化;心肌中细胞因子表达均增高,其中干扰素(IFN)-γ(DCM组30d:1486.0±243.0,180d:192.0±38.0;DCM-T-A组30d:357.0±38.6,180d:186.0±19.27)和白细胞介素(IL)-2(DCM组30d:197.0±11.0,180d:103.0±19.0;DCIN-T-A组30d:166.0±13.8,180d:96.0±4.47)表达增高在前期明显,IL-4、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α表达增高在后期更为显著。未用ConA刺激的DCM-T组与对照组均无上述改变。结论过继转输DCM小鼠脾淋巴细胞可诱导同源近交系小鼠产生抗ADP/ATP载体自身抗体和T细胞介导的免疫应答,发生过继免疫性心肌损害,且此损害与供体小鼠体内改变相似。
- 袁璟廖玉华汪朝晖张景辉田元董继华王金平
- 关键词：扩张型心肌病心肌损害过继转输ADP/ATP载体干扰素(IFN)-Γ(TNF)-Α
- 腺苷酸转位酶诱导自身免疫性心肌病小鼠的异常T细胞受体信号通路被引量：14
- 2006年
- 目的:通过研究T细胞信号分子的表达,探讨自身免疫性扩张型心肌病发生的分子机制。方法:以线粒体腺苷酸转位酶(ANT)合成肽免疫液免疫Balb/c小鼠,建立自身免疫性扩张型心肌病动物模型(DCM组),运用实时荧光定量PCR法检测其T细胞内P56lck的表达,流式细胞术检测其Th细胞内IFN-γ和IL-4的含量,ELISA法检测其血清抗ANT自身抗体水平,免疫组化法观察其T细胞表面CD45的表达。以不含ANT合成肽免疫液免疫小鼠作为对照组(control),试验期6个月。结果:DCM组小鼠P56lck的基因表达(1369·51±874·05vs47·93±10·21,P<0·01)、IFN-γ和IL-4的百分含量(尤其是IL-4)(8·27±1·29vs5·58±0·59,P<0·01;9·93±1·53vs2·05±0·21,P<0·01)、抗ANT自身抗体的水平(0·105±0·015vs0·006±0·002,P<0·01)、CD45的表达强度(0·154±0·021vs0·026±0·008,P<0·01)均明显高于对照组。结论:异常的T细胞受体信号转导通路在ANT肽诱导扩张型心肌病发生中起着重要作用。
- 袁璟廖玉华汪朝晖张景辉刘仲萍董继华王金平
- 关键词：自身免疫心肌病
- 抗L3T4单抗早期干预对心肌病小鼠细胞因子的影响
- 2008年
- 目的研究早期应用抗L3T4单抗对心肌病小鼠血清和心肌组织中细胞因子的影响,探讨抗L3T4单抗治疗自身免疫性心肌病的机制。方法用含有人线粒体ADP/ATP载体肽的免疫液免疫近交系Balb/C小鼠建立类扩张型心肌病模型(心肌病组);以不含肽免疫液免疫小鼠作为对照组;在同时用含有ADP/ATP载体肽的免疫液免疫小鼠的前1d连续3d以400μg抗L3T4单抗免疫小鼠获得单抗组。采用流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4+T细胞内IFN-γ/IL-4的表达;以ELISA法检测其血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α水平;实时荧光定量PCR法检测其心肌细胞因子基因表达。结果心肌病组小鼠血清IFN-γ和IL-4水平明显高于对照组,而单抗早期干预使其生成受到抑制,此结果与流式细胞仪检测到的T细胞内IFN-γ和IL-4水平相一致;血清中IL-2含量在3组小鼠差异均无显著性;TNF-α则在单抗组显著高于对照组和心肌病组。从心肌组织中细胞因子表达情况来看,心肌病组各种细胞因子合成均增多,而早期应用单抗能够抑制其基因表达。结论抗L3T4单抗能够阻断绝大部分细胞因子的生成,从而能够治疗实验鼠自身免疫性心肌病。
- 汪朝晖廖玉华袁璟王敏张景辉田元董继华王金平
- 关键词：心肌病自身免疫CD4细胞因子
- 抗CD22单克隆抗体对自身免疫性心肌病小鼠B细胞体外增殖功能的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨抗CD22单克隆抗体(anti-CD22 monoclonal antibody,CD22McAb)对自身免疫性心肌病小鼠B细胞体外增殖活性及其生成抗心肌自身抗体的影响。方法借助心肌腺嘌呤核苷转位酶(adenine neucleotide translocator,ANT)肽免疫小鼠建立的自身免疫性心肌病模型,分离其淋巴细胞,在体外予LPS刺激的基础上,加予不同浓度的CD22McAb(5μg/ml,10μg/ml,20μg/ml,40μg/ml)进行干预,并以非特异性的IgG干预作为对照。分别采用MTT法和ELISA法检测淋巴细胞增殖活性及抗ANT抗体生成水平。结果与对照组相比,5μg/ml与10μg/ml CD22McAb均可明显特异性地抑制B淋巴细胞增殖活性,且以前者更为显著(P＜0．01,后者P＜0．05),两组抗ANT抗体检测分别为全阴性及全阳性;20μg/ml CD22McAb可明显促使B淋巴细胞增殖活性增高(P＜0．01),其抗体检测均为阳性,且其抗体水平高于10μg/ml CD22McAb组(P＜0．01);而40μg/ml CD22McAb干预效果又与5μg/ml CD22McAb组相似,抗体检测也均为阴性。实验过程中,对照组小鼠淋巴细胞的增殖活性无明显变化,抗ANT抗体的检测均为阴性。结论在一定浓度范围内,CD22McAb对自身免疫性心肌病小鼠B细胞体外增殖活性及其抗ANT抗体的生成有调控作用。
- 袁景张丽华廖玉华汪朝晖程翔王金平王敏郭和平赵林霜
- 关键词：B细胞增殖心肌病
