盛楠
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组flap核酸内切酶1的表达及活性测定方法的建立被引量：3
- 2016年
- Flap核酸内切酶1(Flap endonuclease 1,FEN1)是一种能催化核酸侵入反应的核酸内切酶,可应用于信号放大检测方法,但该酶详细的表达纯化工艺尚无报道,并且活性难以准确测定,限制了其应用。通过合成嗜热古球菌Archaeoglobus fulgidus来源的FEN1基因序列,构建了p ET24a(+)-FEN1-His重组质粒,并通过优化表达条件,得到了FEN1最优表达条件为:37℃、200 r/min振荡培养8 h后,加入诱导剂IPTG至终浓度为0.05 mmol/L,再于37℃、200 r/min诱导表达11 h,最终经镍亲和层析成功纯化得到了分子量约为38 k Da的重组FEN1。同时建立了基于荧光标记探针的FEN1活性测定方法,准确测定了重组FEN1的活性,为建立基于该酶的核酸检测方法提供了可靠的酶活力依据。最终将重组FEN1用于实时荧光PCR偶联高特异核酸侵入信号扩增法检测了乙醛脱氢酶2基因(aldh2)的基因型,得到了准确的分型结果,表明重组FEN1能用于基因多态性的分型检测中,为发展基于核酸侵入反应的核酸检测方法提供了可靠的工具酶。
- 盛楠马寅姣王建平邹秉杰周国华
- 关键词：信号放大活性测定
- 激活沉默基因的方法及在微生物制药领域的新进展被引量：5
- 2014年
- 微生物的次级代谢产物在微生物制药领域一直发挥着重要作用。随着基因测序技术的发展,微生物基因组也在不断被解密,并发现了大量的具有潜在生物合成作用的沉默基因,激活这些基因,将会获得许多新颖有用的天然产物。本文将介绍几种激活沉默基因的方法,旨在为微生物制药研究提供新的思路。
- 盛楠顾觉奋
- 关键词：沉默基因次级代谢产物
