翟龙飞
- 作品数：12 被引量：13H指数：3
- 供职机构：成都大学更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项四川省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学文化科学更多>>
- 前体物质对Glarea lozoyensis发酵产生纽莫康定B_0的影响（英文）被引量：3
- 2018年
- 纽莫康定B_0是棘白菌素类化合物,其半合成衍生物卡泊芬净已被美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于治疗无效或无法耐受其他抗真菌药的患者的侵袭性曲霉病。然而,通过发酵产生的纽莫康定B_0的效价较低,限制了卡泊芬净的工业生产。本研究将优化好的的培养基进行了改良,添加了4种前体物质。研究结果表明,大豆油、亮氨酸、异丁醇和甲硫氨酸显著影响发酵单位;进一步的正交试验结果表明,大豆油(A)对纽莫康定B_0效价的影响极显著(P<0.05),亮氨酸(B)、异丁醇(C)和甲硫氨酸(D)影响次之,最优发酵条件为A2B2C3D2即大豆油6.0g/L,亮氨酸1.0g/L,异丁醇4.0ml/L,甲硫氨酸0.3g/L时,纽莫康定B_0发酵单位达到1295mg/L左右。此外,还应用正交试验验证各因素的显着性。当将kLa作为指导参数,使用A315型叶轮的100L发酵罐进行放大和工业规模生产时,与原始效价相比,纽莫康定B_0产量增加了361%,并达到了2250mg/m L的水平。
- 方舟孟慧云杨渊林家富翟龙飞褚以文王欣荣
- 关键词：培养基优化
- 刺糖多孢菌高产菌株转录组及其多杀菌素合成代谢调控研究
- 2022年
- 目的 通过对高产多杀菌素的刺糖多孢菌进行转录组分析,挖掘多杀菌素合成相关代谢通路的差异基因,并在此基础上结合发酵优化进一步提高多杀菌素产量。方法 利用RNA-seq技术对高产株SS-168及低产野生菌株SS-WT进行比较转录组分析,通过荧光定量PCR验证差异基因表达,再通过发酵培养基优化考察高产菌株的发酵水平。结果 转录组分析表明,与低产菌株相比高产株中有1341个差异表达基因,GO注释表明DEGs主要参与氧化还原生物过程和脂质代谢及辅因子结合和辅酶结合,主要分布在甘氨酸/丝氨酸/苏氨酸代谢、脂肪酸降解等通路。荧光定量PCR结果与转录组数据一致性达到100%。采用分别含有不同浓度的甘氨酸/丝氨酸/苏氨酸的发酵培养进行筛选,多杀菌素发酵水平显著提高。结论 本研究通过新颖的转录组学方法获得了刺糖多孢菌高产菌株的差异基因,并对其高产机制和发酵优化进行了初步分析,为改良刺糖多孢菌菌株和优化发酵工艺提供重要的理论基础和参考依据。
- 王欣荣唐智超曾茂吕正翟龙飞张新宜刘超兰褚以文王克华黄挺
- 关键词：多杀菌素刺糖多孢菌转录组代谢调控
- NH_4^+对多黏菌素4E产生菌Paenibacillus polymyxa SIIA-1408代谢过程的影响被引量：2
- 2017年
- 目的研究NH_4^+对多黏菌素E产生菌Paenibacillus polymyxa SIIA-1408代谢过程的影响方法通过向Paenibacillus polymyxa SIIA-1408的初始发酵培养基中添加不同浓度的NH_4^+,分析其代谢产物及其产量的变化,对于多黏菌素E以外的目标产物进行分离纯化确定其结构,通过前体的添加和中间代谢产物的验证,确定其可能的代谢途径。结果初始培养基中不添加NH_4^+或添加低浓度的NH_4^+主要产物为(S)-2-羟基-3-苯基丙酸,当NH_4^+的浓度超过一定浓度后主要产物为多黏菌素E。结论在一定浓度范围内,NH_4^+促进Paenibacillus polymyxa SIIA-1408生物合成多黏菌素E,抑制其将苯丙氨酸转化(S)-2-羟基-3-苯基丙酸。
- 杨赞詹良静翟龙飞张新宜王欣荣沙菁洲
- 关键词：PAENIBACILLUSNH4+苯乳酸多黏菌素E
- 自养假诺卡菌突变株SIIA243-924产26-甲基-25-羟基维生素D_3的分离纯化及结构鉴定
- 2016年
- 在骨化二醇产生菌自养假诺卡菌(Pseudonocardia autotrophica)突变株SIIA243-924的发酵液中发现一个骨化二醇的结构类似物,分别采用液-液萃取、硅胶柱色谱和高效液相制备色谱等方法提取分离,得到纯度为97.5%的目标化合物。并进一步通过UV、MS、1H NMR、13C NMR及1H-1HCOSY等光谱分析,结合骨化二醇相关谱图,确定该化合物的结构为(5Z,7E)-9,10-开环胆甾-5,7,10(19)-三烯-(26-甲基)-3β,25-二醇,即26-甲基-25-羟基维生素D3。
- 张敬翟龙飞席章姣曾志刚
- 关键词：骨化二醇
- 链霉菌H8797产生的二酮哌嗪类化合物的分离纯化和结构鉴定
- 2014年
- 目的研究链霉菌H8797发酵液中抑制LFA-1/ICAM-1介导的人B淋巴瘤JY细胞聚集的活性成分。方法利用HP-20大孔吸附树脂吸附发酵液中的活性成分,梯度解吸,分部收集,跟踪监测活性,再通过C18硅胶柱层析和LH-20柱层析分离,高效制备液相色谱精制,测定活性,通过紫外、红外、元素分析、高分辨质谱、核磁共振进行分析,得到活性单组份。结果分离纯化了活性化合物H8797A并对其进行了结构确证。结论化合物H8797A为首次从天然产物中分离获得,属于二酮哌嗪类化合物,具有抑制LFA-1/ICAM-1介导的人B淋巴瘤JY细胞聚集的活性。
- 翟龙飞刘瑜张新宜詹良静田敏
- 关键词：细胞间粘附分子-1
- 亲水作用色谱法测定纽莫康定B0及其杂质的研究被引量：5
- 2016年
- 目的建立同时检测纽莫康定发酵液中纽莫康定A0、Bo和C0的含量的HILIC方法a方法采用Xlon色谱柱（4．6mm×250mm，10μm）进行分离，以乙腈和水（87：13）为流动相；流速为2．0mL／min;检测波长：210rim；柱温：30℃进样量10此。结果纽莫康定A0、B0和c0三者质量浓度与峰面积分别在0．23-150μg／mL、0．12～100μg／mL、0．34～70μg／mL范围内线性关系良好，尺。均大于0．9993，平均加样回收率分别为96．73％（RSD，1．52％）、99．62％（RSD，1．77％）、102．35％（RSD，2．08％）。结论HILIC法同时检测纽莫康定A0、Bo和co含量的方法简单可行、精密度高、重复性好，为工业生产中分离纯化及质量控制提供依据。
- 杨渊孟慧云王欣荣翟龙飞褚以文
- 关键词：亲水作用色谱
- 反相高效液相色谱法测定维生素D_3微生物转化液中骨化二醇含量
- 2015年
- 目的快速准确地测定维生素D3微生物转化液中骨化二醇的含量。方法采用依利特Hypersil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（85∶15）,流速2.0 m L·min-1,柱温50℃,检测波长265 nm,外标法定量。结果骨化二醇在10.1~2 020μg·m L-1内呈良好线性关系,r=0.999 9,定量限0.6 ng,检出限0.3 ng,平均加样回收率为101.06%（RSD1.44%,n=9）。结论该方法简便,准确,灵敏度高,分离度好,可用于VD3微生物转化生产中定量骨化二醇的要求。
- 谢洪兵曾志刚翟龙飞
- 关键词：反相高效液相色谱骨化二醇
- 生物发酵制备骨化二醇相关杂质的分离及结构鉴定
- 2014年
- 生物发酵的骨化二醇发酵液经板框过滤,液液萃取以及高压制备色谱精制,得到色谱纯度为97.5%的骨化二醇相关杂质单体。通过紫外、质谱和核磁共振波谱综合解析,确证了杂质的化学结构为骨化二醇的同分异构体,即24-羟基维生素D3,是不同于化学合成的一个新的杂质。该实验中确定的制备条件可以为该杂质的制备提供参考,所得杂质单品可以为后续实验提供杂质对照品。
- 席章姣翟龙飞谢洪兵曾志刚
- 关键词：骨化二醇生物工程
- 放线菌SIIA243对维生素D_3的羟基化研究被引量：2
- 2014年
- 目的研究放线菌SIIA243对维生素D3的羟基化作用。方法将VD3加入到不同菌株的培养液中,通过高效液相色谱检测培养液中VD3的转化产物以确定目标菌株,然后在50升发酵罐中培养目标菌株,添加维生素D3,发酵完成后对转化产物进行分离纯化和结构鉴定。结果发现菌株SIIA243转化产物的高效液相图谱中,转化产物1的保留时间与25OHVD3基本相同,转化产物2的保留时间与1α,25(OH)2VD3基本相同;经紫外光谱、质谱和核磁共振谱分析,纯化后得到的两个转化产物分别鉴定为25OHVD3和1α,25(OH)2VD3。结论菌株SIIA243能够将维生素D3转化为25OHVD3和1α,25(OH)2VD3。
- 曾志刚罗红兵翟龙飞徐欣俞岩青黄海
- 关键词：VD3羟基化
- 丝状真菌SIIA-F1108产生抗真菌物质的分离纯化和结构鉴定被引量：6
- 2015年
- 目的研究丝状真菌SIIA-F1108发酵液中抗真菌的活性成分。方法利用大孔吸附树脂吸附、正相硅胶色谱层析和高压液相制备等技术,结合白念珠菌抑菌实验进行跟踪检测,分离丝状真菌SIIA-F1108的发酵液中的活性组分;通过紫外光谱、红外光谱、高分辨质谱、核磁共振进行分析,确定活性组分的结构。结果分离纯化得到SIIA-C1108A和SIIA-C1108B活性组分,分子式均为C_(50)H_(80)N_8O_(17),与文献报道的纽莫康定(pneumocandin)B_0和C_0同质。结论从丝状真菌SIIA-F1108的发酵液中分离得到的两个具有抗真菌活性物质分别为纽莫康定B_0和C_0,其中纽莫康定B_0作为合成醋酸卡泊芬净的前体物质,具备重要的经济价值。
- 孟慧云杨渊王欣荣李旭航翟龙飞
