解建平
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
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- 类猪圆环病毒 P1转录的 Northern Blot 分析被引量：2
- 2014年
- 为鉴定类猪圆环病毒P1的转录本,采用地高辛标记的RNA探针,通过Northern Blot方法,对转染PK15细胞的类猪圆环病毒P1进行了RNA转录分析。结果表明,Northern杂交可检测到2个RNA转录本,包括正链上ORF3的RNA和负链上ORF1的RNA。同时,ORF3 RNA表达时间比ORF1的短,且丰度也大大低于ORF1。类猪圆环病毒P1至少存在ORF1和ORF3 2个转录本。
- 温立斌王凤芝何孔旺倪艳秀张雪寒李彬王小敏郭容利周俊明俞正玉茅爱华吕立新解建平
- 关键词：转录分析NORTHERNBLOT
- 猪圆环病毒2型重组病毒ZJ-R感染性克隆的构建
- 2016年
- 利用无缝克隆方法构建ZJ-R全长基因组的单拷贝分子克隆以及双拷贝串联分子克隆;通过生物信息学技术预测ZJ-R病毒结构蛋白的B细胞抗原表位,人工合成选定的表位肽,然后偶联KLH免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体;免疫组化试验证实该多抗与转染PK15细胞的ZJ-R双拷贝串联分子克隆具有反应性。结果表明构建的ZJ-R双拷贝串联分子克隆具有感染性。
- 温立斌张丹何孔旺解建平董美响
- 关键词：B细胞表位感染性克隆
- 免疫亲和层析纯化类猪圆环病毒P1被引量：1
- 2013年
- 通过免疫亲和层析对类猪圆环病毒因子P1纯化进行了研究。采用环氧活化及NHS活化的琼脂糖凝胶,与兔抗P1表位肽抗体偶联,对P1进行了免疫亲和吸附,通过电镜技术证实获得了纯化病毒。结果表明,免疫亲和层析是有效的P1病毒纯化方法。
- 温立斌何孔旺解建平杨浩周建新金全胜王玉然
- 关键词：纯化
- 类猪圆环病毒P1的免疫电镜观察被引量：1
- 2013年
- 采用氯化铯平衡密度梯度离心获得较为纯净的病毒粒子后,经过免疫电镜技术(液相免疫电镜法和免疫胶体金标记法)对P1病毒进行了观察鉴定。结果表明,P1病毒呈球形、无囊膜、直径约为25 nm。
- 温立斌何孔旺解建平杨浩周建新金全胜王玉然
- 关键词：形态学免疫电镜技术
- 类猪圆环病毒P1的感染及其分子特征被引量：1
- 2013年
- 类猪圆环病毒P1是新发现的一种病原,能引起仔猪出现类似猪断奶后多系统衰竭综合征症状,是目前所知的具有最小基因组的病毒。为了解P1感染范围和基因组分子特征,采用PCR方法扩增P1全基因组,克隆测序后,应用生物信息学进行序列同源性比较及遗传进化分析。结果显示,P1已在我国猪场流行,分离株之间的核苷酸序列同源性为99.1%～100%,可分为2个亚分支;同时免疫组化结果也证实了P1在样品中的分布。
- 温立斌何孔旺王凤芝俞正玉茅爱华解建平
- 关键词：PCR免疫组化分子特征
- 类猪圆环病毒P1诱导PK15细胞自噬的研究
- 2014年
- 旨在探讨类猪圆环病毒P1感染对PK15细胞自噬的影响。将同一批PK15细胞分成对照组和感染组,感染组在类猪圆环病毒P1感染PK15细胞后14,24,48 h分别收集细胞,对照组也在同样时间收获,用透射电镜观察自噬现象的发生。结果表明,与对照组相比,感染组PK15细胞内出现典型自噬形态学变化。揭示类猪圆环病毒P1能诱导PK15细胞发生自噬,但细胞发生自噬的相关信号传导通路还有待进一步研究。
- 温立斌王凤芝何孔旺解建平贾化生
- 关键词：PK15细胞自噬
