赵宁
- 作品数：73 被引量：323H指数：9
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- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 导向性人干扰素α2a工程菌的高密度发酵被引量：12
- 2004年
- 目的 :优化大肠杆菌表达导向性人干扰素α2a的中试发酵工艺 ,以获得工程菌的高密度发酵和目的蛋白的高表达 .方法 :采用发酵罐发酵 ,对影响工程菌生长和目的蛋白表达的条件 ,如pH值、活化时间、诱导时间、溶氧范围及补料流加方式等进行优化 .结果 :根据优化条件 ,连续三批重复发酵10L工程菌 ,最终菌体密度均达A60 0nm2 5～ 30 ,菌体获得量均可达湿重 5 0g/L以上 ,目的蛋白表达量均为 3.2× 10 9U/L以上 .结论 :此发酵工艺具有周期短、产量高以及重复性稳定性好的特点 ,为下游纯化和进一步大规模生产奠定基础 .
- 孟洁如颜真赵宁张英起
- 关键词：发酵干扰素大肠杆菌
- 新型基因工程人肿瘤坏死因子-α的临床前研究被引量：7
- 2002年
- 目的 研究一种新型基因工程人肿瘤坏死因子－α（ｎｒｈＴＮＦ－α）的临床前药理、毒理和药代动力学特性。方法观察ｎｒｈＴＮＦ－α对动物移植性肿瘤的抑制作用、毒副作用（如急性中毒反应和死亡情况，过敏反应，以及对神经系统、呼吸系统、心血管系统、造血系统和免疫系统的影响）及药代动力学变化。结果ｎｒｈＴＮＦ－α具有明显的抑瘤作用且呈剂量依赖性。对动物的急性中毒表现及病理变化与ｒｈＴＮＦ－α相似，未见其他不良反应。结论ｎｒｈＴＮＦ－α的抑瘤作用明显，毒副反应低，具有良好的临床应用前景。
- 赵宁张英起王增禄
- 关键词：药效毒理药理临床前研究药代动力学
- 一种新的恒河猴T淋巴细胞活化抗原PTA1被引量：2
- 1997年
- 本文应用抗人Ｔ细胞活化抗原ＣＤ２５和ＰＴＡ１ＭｃＡｂ对恒河猴ＰＢＭＣ进行间接免疫荧光染色和流式细胞仪分析，结果发现，恒河猴静止ＰＢＭＣＣＤ２５和ＰＴＡ１均为阴性，而ＰＨＡ活化后或经连续２个月注射ｒＨｕＴＮＦ－α恒河猴ＰＢＭＣ均表达高比率的ＣＤ２５和ＰＴＡ１阳性细胞。此结果表明，ＰＴＡ１抗原可作为恒河猴活化Ｔ淋巴细胞的一种有用标志，为ＰＴＡ１分子结构和功能研究以及采用恒河猴作为灵长类动物模型，观察细胞免疫功能状态提供了有用的资料。
- 刘雪松金伯泉田方赵宁王增禄曹云新
- 关键词：恒河猴PBMCCD25T淋巴细胞活化PTA1细胞免疫功能状态
- 新型重组人肿瘤坏死因子药代动力学的实验方法被引量：5
- 2002年
- 目的 为探讨新型重组人肿瘤坏死因子 (nr TNFα)药代动力学而建立生物样品中 nrh TNFα的检测方法 .方法 1方法 (RA) :动物肌注 1 2 5 标记的 nrh TNFα后 ,测定各生物样品中的总放射活性 ;2方法 (HPL C- RA) :上述生物样品先经 HPL C分离后 ,收集并测定其中 1 2 5 - nrh TNFα部分的放射活性 ;3方法 EIL ISA法 .结果 RA,HPL C- RA法检测的 nrh TNFα质量浓度与放射性呈直线相关 (RA,r=0 .999HPL C- RA,r=0 .999) .EL ISA法证明 rh TNFα的酶联免疫检测药盒适用于 nrh TNFα的检测 ,rh TNFα的标准曲线与 nrh TNFα的标准曲线显正相关 ,r=0 .994 .这一检测系统与其他细胞因子包括 IFNα,TNFβ,IL- 2和 IL- 6无交叉反应 .结论 RA,HPL C- RA和 EL ISA法均可作为 nrh
- 赵宁张英起王增禄刘昌孝陈拯民顾以保蔡永明高连用李全胜曾勇
- 关键词：肿瘤坏死因子Α药代动力学放射测量术HPLCELISA
- 恒河猴肌注新型重组人肿瘤坏死因子的药代动力学被引量：2
- 2001年
- 目的 研究新型重组人肿瘤坏死因子 (nrh TNFα)在恒河猴体内的药代动力学行为 .方法 采用 EL ISA法测定恒河猴 im nrh TNFα后的血药浓度 .结果 恒河猴按 40 μg·kg- 1 剂量 im nrh TNFα后 ,血液中的平均达峰时间为 1.7h;峰浓度的个体差异较大 ,范围为 5 75～ 112 0 ng· L- 1 ,平均峰浓度为 833ng· L- 1 ;药物在血液中的消除符合一房室模型 ,半衰期 T1 / 2 为 1.4～ 2 .4(平均 1.9) h.结论 nrh TNFα im后 ,能被恒河猴吸入血 ,在血液中的消除符合一房室模型 ,在灵长类动物恒河猴的药代动力学行为与啮齿类动物小鼠的相类似 。
- 陈拯民蔡永明曾勇高连用顾以保李全胜刘昌孝张英起赵宁王增禄
- 关键词：肿瘤坏死因子药代动力学猕猴属
- 分泌高效价抗碱性磷酸酶McAb杂交瘤系的建立及其在APAAP免疫组化研究中的应用被引量：2
- 1991年
- 用碱性磷酸酶长程多途径免疫BALB/C小鼠,采用反向间接ELISA法筛选融合孔上清,获得2株稳定分泌抗碱性磷酸酶McAb杂交瘤细胞株,腹水效价比国外报道高15～30倍,在APAAP免疫组化检测CD抗原、病毒抗原、肿瘤抗原以及细菌菌毛抗原等研究中均获得满意结果。
- 赵宁刘雪松黄传书田方金伯泉薛采芳陈伯虹舒翠玲
- 关键词：单克隆抗体APAAP杂交瘤
- 重组胸腺素α_1的分离纯化和活性测定被引量：7
- 2001年
- 目的 利用融合表达载体 p Thio His A的重组质粒p Thio His A- Tα1 4,转化大肠杆菌 TOP10得到的工程菌 ,来分离纯化表达的胸腺素 α1 (thym osin alpha1,Tα1 ) .方法 将高效表达融合蛋白的工程菌用细胞破碎器裂解 ,经 80℃热处理 ,离心上清采用 Q- Sepharose FF阴离子交换色谱纯化融合蛋白 .融合蛋白经 CNBr裂解后用常压离子交换色谱纯化Tα1 单体 .应用 SDS- PAGE,2 L - Tricine- SDS- PAGE和 HPL C进行鉴定 .结果 SDS- PAGE分析表明菌体表达的融合蛋白占菌体总蛋白的 40 0 g· kg- 1 .经 2 L - Tricine- SDS- PAGE分析证实 ,融合蛋白可裂解出 Tα1 单体 ,裂解物经简单的离子色谱可以纯化出 Tα1 单体 ,HPL C鉴定纯化出的 Tα1 纯度可达95 0 g· kg- 1以上 .利用 3H- Td R进行的生物活性测定表明 ,在致有丝分裂原 Con A存在的条件下 ,融合蛋白和 Tα1 单体均具有刺激小鼠脾淋巴细胞分裂增殖的能力 ,与化学合成的Tα1 相比具有相似的生物活性 .结论 该方法是分离纯化Tα1 简便易行 ,经济有效的方法 ;同时也为 Tα1
- 石继红张英起赵宁颜真韩苇赵永同
- 关键词：胸腺素Α1蛋白质纯化生物活性
- 猕猴外周血淋巴细胞群的免疫学研究初步探讨被引量：1
- 1991年
- 动物淋巴细胞的表面标志,是研究其免疫功能变化的重要指标。目前还没有建立系统的抗猕猴淋巴细胞表面标志的抗体,但已有报道将部分抗人淋巴细胞表面标志的单克隆抗体应用免疫荧光等方法检测猕猴外周血淋巴细胞,发现有不同程度的交叉反应,并在以猕猴为模型的实验研究中得到初步应用。由于动物品系及实验方法的不同,所得结果也有较大差异。本研究组应用抗人淋巴细胞表面标志的单克隆抗体和APAAP染色法,较为系统的研究了猕猴淋巴细胞表面标志,初步建立了我国猕猴淋巴细胞分化抗原、MHC抗原、膜表面免疫球蛋白(SmIg)
- 刘崟金伯泉赵宁施新猷王玉清
- 关键词：免疫学研究细胞表面标志外周血淋巴细胞人淋巴细胞抗原表达
- Bcr-abl特异性系列核酶体外切割活性比较及诱导K562细胞凋亡的实验研究被引量：5
- 2000年
- 目的 构建单、双及三单位核酶 ,鉴定其体外切割活性及对K5 6 2生物学特性的影响 ,探讨核酶用于基因治疗的前景。方法 首先针对bcr abl融合位点设计并合成 3个单核酶 ,而后通过基因重组构建单、双及三核酶载体 ,以体外切割试验鉴定并比较其活性。然后以脂质体将bcr abl三核酶逆转录病毒载体转入K5 6 2细胞 ,观察其对K5 6 2细胞周期、凋亡、超微结构的影响。结果 构建成功bcr abl特异性系列核酶共 6个重组载体 ,切割试验证实系列核酶载体中三核酶体外切割活性最强 ,为 70 8% ,双核酶次之 ,分别为 6 0 7%和 30 3% ,不同位点的单核酶切割活性分别为 5 4 6 %、2 5 3%和3 6 %。bcr abl特异性多核酶通过诱导凋亡抑制K5 6 2细胞增殖。结论 bcr abl特异性核酶在慢性粒细胞白血病基因治疗中具有潜在的应用前景 ,为多核酶体外净化骨髓联合自体骨髓移植治疗提供了理论和实验依据。
- 冯琦孙秉中赵永同孙凯赵宁刘利颜真韩苇张英起
- 关键词：白血病慢性BCR-ABL
- 含凝血酶切点的hTNFα-hPgnK_5的原核表达及活性鉴定
- 2001年
- 目的在原核细胞中表达融合蛋白ｈＴＮＦα－ｈＰｇｎＫ５并鉴定其活性。方法构建ｈＴＮＦα－ｈＰｇｎＫ５基因的表达载体，并在大肠杆菌ＤＨ５α中进行表达。以ＭＴＴ法测定该融合蛋白体外抑制肿瘤细胞或血管内皮细胞增殖的活性。结果成功地构建了ｈＴＮＦα－ｈＰｇｎＫ５表达载体并获得表达。免疫印迹分析表明，该融合蛋白具有ｈＰｇｎＫ５的免疫活性。体外实验表明，该融合蛋白具有抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞增殖的活性。结论ｈＰｇｎＫ５蛋白可与ｈＴＮＦα可共同表达，表达产物可抑制肿瘤细胞和血管内皮细增殖。
- 范彬张英起赵宁颜真药立波苏成芝
- 关键词：肿瘤坏死因子血管生长抑制因子
