郭莹
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：大连海洋大学更多>>
- 发文基金：辽宁省重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 大泷六线鱼细胞系的构建方法
- 本发明公开了一种大泷六线鱼细胞系的构建方法，包括如下步骤：⑴选择DＭＥＭ/F12培养基，并加入胎牛血清、人碱性成纤维细胞生长因子、I型胰岛素样生长因子和硫酸软骨素制备细胞培养液，在4℃的环境下存放；⑵在超净工作台上取大泷...
- 李霞郭莹秦艳杰姜志强
- 文献传递
- 大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏组织原代培养的研究被引量：4
- 2012年
- 应用组织块培养法,研究了大泷六线鱼Hexagrammos otakii鳍、吻端和肾脏细胞在含有体积分数为20%胎牛血清(FBS)的L-15、DMEM和DMEM/F12 3种培养基中的生长情况,以及人碱性成纤维细胞(bFGF)、硫酸软骨素、Ⅰ型胰岛素样(IGF-Ⅰ)3种生长因子对细胞贴壁率和迁出率的影响。结果表明:大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏细胞适宜的体外培养体系为DMEM/F12培养基+20%FBS,pH为7.2,温度为25℃;在最适培养基中分别添加5.0 ng/mL bFGF、20μg/mL硫酸软骨素、40 ng/mL IGF-Ⅰ时,3种组织的贴壁率和细胞迁出率均最高;鳍、吻端和肾脏组织分别经培养21、15、18 d后长满单层,主要为成纤维样细胞;采用低渗滴片法制备染色体,3种组织原代细胞的染色体数目为48条。本研究为大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏组织细胞系的构建和生物学特性的研究奠定了基础。
- 郭莹李霞秦艳杰
- 关键词：大泷六线鱼培养基原代培养
- 大泷六线鱼三种组织细胞的有限传代及其生物学特性分析被引量：5
- 2013年
- 采用组织块培养法启动大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏3种组织细胞的原代培养,并稳定传代培养30代、31代和35代。结果发现,用透明质酸酶和Ⅱ型胶原酶联合消化鳍和吻端组织后细胞分散效果更好。培养于添加5 ng/mL人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、20μg/mL硫酸软骨素、40 ng/mLⅠ型胰岛素样生长因子(IGF-I)及20%胎牛血清的DMEM/F12培养基(pH 7.2)中的3种组织细胞生长分裂旺盛,均为成纤维样细胞。在此条件下第20代的鳍、吻端、肾脏组织细胞群体倍增时间分别为58.7,50.4和32.9 h。第25代大泷六线鱼3种组织细胞的特征性染色体数目均为48条。细胞经液氮冷冻保存60 d后,解冻复苏并经台盼蓝染色,3种细胞成活率分别达84.59%±1.07%、85.75%±1.03%和87.39%±1.05%。3种细胞现已保存在中国典型培养物保藏中心。3种组织细胞体外培养方法的建立为鱼类疾病防治和病理机制研究奠定了基础。
- 李霞郭莹秦艳杰姜志强
- 关键词：大泷六线鱼生物学特性
