陈思宇 作品数:16 被引量:15 H指数:2 供职机构: 第三军医大学大坪医院野战外科研究所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
FGF2对破骨细胞体外分化以及骨吸收功能的直接调控作用 被引量:2 2014年 目的研究成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)对于破骨细胞(osteoclast,OC)体外分化与功能的直接调控作用。方法分离野生型C3H/HeJ小鼠骨髓单核细胞,利用核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)以及巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)诱导向破骨细胞分化,同时在实验组中加入FGF2,观察骨髓单核细胞向破骨细胞分化发育过程,鬼笔环肽(phalloidine)染色观察破骨细胞肌动蛋白环(actin ring)变化,Real-time PCR检测破骨细胞Trap、Mmp9、Ctsk以及Clcn7表达,破骨细胞与骨片共培养检测骨吸收功能变化,并用Western blot检测相关信号通路分子表达情况。结果①TRAP染色显示实验组与对照组破骨细胞数量无明显差异(P>0.05);②鬼笔环肽染色提示实验组与对照组肌动蛋白环均正常;③实验组Trap、Mmp9及Ctsk mRNA表达量均高于对照组(P<0.05),而Clcn7 mRNA表达2组无明显差异;④体外骨片吸收实验提示实验组骨吸收陷窝面积显著大于对照组(P<0.05);⑤Western blot检测实验组磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)较对照组表达明显增多。结论 FGF2不影响破骨细胞前体细胞向破骨细胞的分化以及肌动蛋白环的形成,但可以通过ERK信号通路正向调控成熟破骨细胞的骨吸收功能。 李晓刚 苏楠 唐玉彬 温轩 唐浚洲 陈思宇 李灿 杜晓兰 陈林关键词:破骨细胞 成纤维细胞生长因子2 细胞外信号调节激酶 破骨细胞中FGFR3功能缺失导致小鼠破骨细胞功能障碍和骨量增加 目的破骨细胞是骨组织中具有骨吸收功能的细胞,其分化和功能受体内多种因素影响,其中包括成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)家族成员。我们前期工作发现FG... 苏楠 李晓刚 陈思宇 杜晓兰 陈林H1-calponin负性调节小鼠骨形成 苏楠 陈锚锚 陈思宇 李灿 赵玲 何启芬 陈林小鼠胫骨骨皮质损伤修复过程中成纤维生长因子受体的表达 被引量:3 2011年 目的观察小鼠胫骨骨皮质损伤修复过程中成纤维生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)的表达变化。方法通过建立小鼠胫骨骨皮质损伤模型,在组织学水平观察皮质损伤后愈合情况,同时提取损伤后3、7、14、21 d 4个时相点损伤部位新生骨痂组织RNA,采用定量PCR检测FGFRs及骨形成标记分子核结合因子al(Cbfa1)、骨钙素(OC)、骨桥蛋白(OP)等mRNA的动态表达谱。结果骨皮质损伤后第7天,小鼠骨髓腔有新生骨组织出现,到第21天,皮质骨缺损处出现新的板层骨结构。Cbfa1、OP的mRNA表达水平在骨皮质损伤后早期即迅速升高,OC则在修复阶段中后期表达升高。FGFR1、2在损伤后迅速升高,于第3天达到峰值(2.09±0.25,1.82±0.15,P<0.01),然后逐渐回落;FGFR3于损伤后7 d达到峰值(3.61±0.52,P<0.01).14 d稍有回落,在第21天时则又显著升高(P<0.01)。结论伴随着骨皮质损伤后成骨细胞分化标记基因的表达升高,FGFR1、2、3的mRNA表达水平在皮质损伤后早期即显著升高,并持续高表达到愈合晚期阶段。提示FGFRs参与调节骨皮质损伤后的骨再生过程。 周锐 苏楠 李灿 陈思宇 谢杨丽 陈林关键词:骨再生 成年小鼠骨细胞的分离鉴定及其成纤维细胞生长因子受体的表达 2015年 目的建立稳定的成年小鼠骨细胞分离和鉴定方法,检测其标志性基因和成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor,FGFR)表达。方法将3月龄C57小鼠的胫骨和股骨分离后剪除干骺端,冲去骨髓,切割成约1 mm碎片,用Ⅰ型胶原酶和EDTA溶液交替消化以获取骨细胞。分别通过形态观察、ALP染色、OC染色和E11/gp38染色鉴定骨细胞。qRT-PCR检测骨细胞标志性基因表达,并与骨细胞系IDG-SW3和MLO-Y4比较。检测FGFRs在骨细胞的表达。结果分离出的骨细胞呈多树突状或星状,并借突触彼此连接。ALP染色可见成骨细胞染色阳性,骨细胞染色阴性。OC染色成骨细胞和骨细胞均阳性,成纤维细胞阴性,而E11/gp38染色仅见骨细胞染色阳性。实验所得细胞表达骨细胞特异基因DMP1、SOST、FGF23,表明骨细胞成功分离,且此原代骨细胞与IDG-SW3和MLOY4细胞系表达有差异。FGFR1-3在骨细胞中均有表达。结论成功分离成年小鼠原代骨细胞,发现FGFR1-3在原代骨细胞中均有表达。 唐玉彬 苏楠 温轩 陈思宇 杜晓兰 陈林关键词:骨细胞 细胞分离 成纤维细胞生长因子受体 FGFR3功能增强点突变导致小鼠骨量减少 目的:成纤维细胞生长因子受体3 (fibroblast growth factor receptor-3,FGFR3)是受体酪氨酸激酶家族成员之一。既往认为FGFR3主要抑制软骨发育,而FGFR3在骨形成和重建中作用尚不... 苏楠 陈思宇 李灿 杜晓兰 陈林成骨细胞中FGFR3增强小鼠成年期骨重建异常 苏楠 周锐 陈思宇 李灿 陈林小鼠胫骨稳定性骨折模型制作及评价 被引量:9 2013年 目的建立稳定的小鼠稳定性胫骨骨折模型。方法通过骨髓穿钢针的方法,建立了小鼠稳定性胫骨骨折模型,取建模后7、14、21 d 3个时间点小鼠,其中每个时间点6只,分别通过X线片、Micro CT以及病理切片来分析骨折愈合中骨痂大小变化及骨痂中细胞类型以评估骨折愈合过程。结果本实验建立的小鼠胫骨稳定性骨折模型愈合,骨折后7 d骨折断端存在极少量软骨痂,基本由未分化间充质细胞构成;第14天软骨痂开始钙化,骨痂中存在大量肥大软骨细胞;第21天骨折已基本愈合,新生骨形成,含有大量成骨细胞及骨细胞。结论通过本方法所制作的骨折模型愈合过程良好,与临床的骨折愈合过程类似,能更客观地观察骨折愈合过程。 温轩 谢杨丽 苏楠 陈思宇 罗凤涛 陈林关键词:胫骨骨折 稳定性 小鼠 骨折愈合 H1-calponin负性调节小鼠骨形成 目的:碱性调宁蛋白(hl-calponin)是调宁蛋白家旅成员,是一种参与平滑肌收缩的肌动蛋闩结合蛋白。它除了能调节平滑肌收缩外,还具有多种生物学功能,近年来发现其还参与了骨骼发育过程,hl-calponin敲除小鼠基因... 苏楠 陈锚锚 陈思宇 李灿 陈林软骨发育不全患者的FGFR3基因突变研究 目的:软骨发育不全(Achondroplasia,ACH),是最常见的常染色体显性遗传性短肢侏儒,发病率约为1/15000,其主要原因是由于FGFR3功能增强点突变引起。本研究拟对17例临床诊断为软骨发育不全的患者进行遗... 苏楠 李灿 赵玲 陈思宇 陈林文献传递