陈白虹
- 作品数:38 被引量:96H指数:6
- 供职机构:南方医科大学生物技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金World Health Organization广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 一种恶性疟原虫多价重组疫苗的体液免疫反应研究被引量:1
- 1995年
- 一种恶性疟原虫多价重组疫苗的体液免疫反应研究陈白虹,缪军,薛采芳,毕惠祥,李英杰(寄生虫学教研室西安710033第一军医大学疟疾免疫学研究室)关键词恶性疟原虫;重组疫苗;ELISA中图号R382.31自杂合肽SPf66在猴和人体内试验中取得了初步的成...
- 陈白虹缪军薛采芳毕惠祥李英杰
- 关键词:恶性疟疟疾重组疫苗疟原虫疫苗
- 间日疟原虫部分乳酸脱氢酶基因的克隆及序列分析被引量:5
- 2006年
- 目的克隆并测定我国间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)的部分基因序列并进行生物信息学分析。方法根据PvLDH基因已知序列设计合成一对引物,应用PCR技术从间日疟原虫基因组DNA中扩增LDH基因,定向克隆入pMD18质粒。阳性质粒经酶切及PCR鉴定后,用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定。应用生物信息学网站www.ncbi.nlm.nih.gov、www.expasy.ch对获得的基因及其推导的氨基酸序列进行生物信息学分析。结果PCR扩增得到特异的间日疟原虫LDH基因序列。酶切及PCR鉴定获得了正确的重组质粒。测序结果表明,获得的间日疟原虫LDH基因全长897bp,编码299个氨基酸。DNAMAN预测PvLDH存在10个潜在抗原表位,均与PfLDH的相应预测表位间有同源序列。同源性分析显示,我国间日疟原虫与SalvadorⅠ株和Belem株间日疟原虫的氨基酸序列同源性为99%,与其它疟原虫LDH的同源性为88%~90%。结论成功克隆了我国间日疟原虫LDH基因,其基因序列与其它疟原虫LDH基因序列有高度同源性。
- 郝文波王萍陈白虹高洋李明
- 关键词:间日疟原虫乳酸脱氢酶克隆
- 腺病毒滴度不同测定方法比较被引量:20
- 2011年
- 目的将目前测定腺病毒滴度常用的OD260法、荧光定量PCR法、绿色荧光蛋白标记法、壳蛋白免疫法、细胞病变(CPE)法进行比较研究,分析和讨论各种方法的优缺点。方法 4种重组腺病毒(Ad-G-AT2R-EGFP、Ad–CMV-EGFP、Ad-mif-shRNA-EGFP和Ad-CBA-GFP)扩增、纯化后,同时分别用OD260值法、荧光定量PCR法、绿色荧光蛋白标记法、壳蛋白免疫法及CPE法测定病毒滴度,并以壳蛋白免疫法测定结果作为标准,对各种方法所得结果进行比较研究。结果绿色荧光蛋白标记法、CPE法与壳蛋白免疫法同时测定4种腺病毒滴度,其结果无统计学差异(P>0.1)。荧光定量PCR法测定值明显高于壳蛋白免疫法(P<0.05),但与该法测定结果间存在良好的相关性(r=0.965),约为壳蛋白免疫法所测得结果的10倍。OD260法测得结果与壳蛋白免疫法测得结果间则无相关性。结论绿色荧光蛋白标记法与壳蛋白免疫法是测定腺病毒感染性滴度最为快速有效的方法,其结果客观可靠,能真实地反映病毒的实际感染力。荧光定量PCR法测定结果反映的是完整的病毒颗粒数,能够间接反映病毒的感染力,且该方法操作简单,耗时短,同样有较高的实用性。
- 孙鹏宇张艳玲荆玉明张信基张哲欢黎诚耀陈白虹谭万龙李红卫
- 关键词:腺病毒绿色荧光蛋白荧光定量PCR
- 人绒毛组织培养干细胞的分离与鉴定
- 2009年
- 目的:探讨人绒毛组织培养干细胞体外培养、分离及鉴定方法。方法:采集广东省人民医院门诊健康妇女孕6-8周新鲜人工流产绒毛组织,体外传代培养,通过镜下观察、细胞生长率以及CD29和CD44细胞周期研究细干细胞的分离与鉴定。结果:细胞生长良好,不同培养基生长率不同,细胞进入生长期,扩增无变化。结论:人绒毛组织培养干细胞方法简便可行。
- 张艳玲王文敬陈白虹
- 关键词:干细胞流式细胞仪
- 恶性疟原虫多表位重组疫苗在大肠杆菌中的表达及纯化被引量:1
- 2000年
- 目的 在体外表达和纯化目的蛋白 ,为下一步抗攻击试验提供安全有效的产品。方法 将化学合成的恶性疟原虫保护性抗原复合基因 (HGFSP)与表达载体pRSET重组 ,在大肠杆菌BL2 1进行表达 :工程菌经超声破菌、离心、离子交换层析、疏水层析、分子筛层析等步骤纯化。结果 SDS -PAGE显示表达产物以非融合、可溶性的形式表达 ,相对分子质量为 2 3kDa ,占总菌体蛋白的 2 3 65 % ;纯度可达 95 %以上。Western -blot分析表明表达产物具有免疫原性。结论 成功构建pRSET -HGFSP重组表达系统并得到高效表达 。
- 陈白虹李明吴岚晓赖声礼
- 关键词:恶性疟原虫
- 间日疟原虫多表位疫苗基因的表达、纯化与初步鉴定被引量:3
- 2009年
- 目的构建和筛选间日疟原虫多表位疫苗基因高拷贝Pichia pastoris菌株,研究多表位疫苗基因在酵母菌中的表达,纯化目的产物,为进一步的多表位肽免疫原性研究奠定基础。方法根据文献报道筛选间日疟原虫有效保护性抗原表位,人工合成多表位基因PvDBW,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切构建酵母表达载体pPIC9K-PvDBW,转化大肠埃希菌ToP10;鉴定后转化P.pastoris GS115,构建酵母表达菌株;通过G418压力筛选筛出目的基因高拷贝克隆,用甲醇诱导多表位肽基因表达,分别以RT-PCR和Western blot进行鉴定,用50%饱和硫酸铵沉淀和分子筛凝胶层析分离、纯化目的产物。结果重组质粒用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后可得到786 bp DNA片段;经G418压力筛选筛出两个高拷贝菌株,以α-Factor和3′AOX1为引物、重组菌基因组DNA为模板,PCR扩增出约960 bp的目的片段;SDS-PAGE显示,在GS115细胞内多表位肽呈分泌性表达,表达量为80 mg/L;分离、纯化后,纯度达90%以上;Western blot检测显示表达的多表位肽可被间日疟病人血清识别。结论间日疟原虫多期多阶段多表位疫苗基因在酵母菌中表达成功。
- 王萍李明董文其陈白虹
- IgE低亲和力受体基因的克隆、表达及初步鉴定
- 2010年
- 目的利用基因重组的方法建立IgE低亲和力受体(FcεRⅡ)基因的原核表达系统。方法用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞扩增FcεRⅡcDNA基因,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建原核表达载体FcεRⅡ-pGEX-4T-1,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta,诱导表达FcεRⅡ蛋白,通过割胶回收纯化,并用Western blot检测FcεRⅡ的表达。结果测序表明所扩增FcεRⅡcDNA基因,与已报道的序列一致。获得的重组蛋白经Western blot鉴定可以和人IgE特异性结合。结论成功构建了FcεRⅡ-pGEX-4T-1表达载体,获得了能和人IgE特异性结合的重组蛋白,为下一步FcεRⅡ单克隆抗体的制备及应用研究打下了基础。
- 尹晴陈白虹邱国真付琛颖董文其魏威李珍朱勇王萍
- 关键词:IGE
- 抗恶性疟HRP-11单链抗体的筛选和鉴定(英文)
- 2000年
- 目的 研究开发简便、快速和有效的疟疾诊断技术。方法 利用噬菌体抗体库技术 ,在构建抗恶性疟原虫红内期噬菌体抗体库的基础上 ,经 3轮“吸附 -洗脱 -扩增”的富集反应后 ,筛选抗HRPII阳性克隆株并进行可溶性诱导表达 ,最后用ELISA和Westernblot等进行鉴定。结果 筛选出 6株抗HRPII阳性克隆株 ,表达的单链抗体Mr 为 310 0 0左右 ,能与HRPII抗原起特异性结合反应。
- 徐伟文董文其李明毕惠祥陈白虹王萍
- 关键词:噬菌体抗体库单链抗体恶性疟
- 不同品系大鼠皮下脂肪源干细胞诱导分化能力的比较被引量:2
- 2011年
- 目的:对比SD大鼠和Wistar大鼠皮下脂肪源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)体外诱导分化能力,为ADSCs的进一步应用提供实验依据。方法:SD大鼠和Wistar大鼠各6只取腹股沟脂肪垫,培养扩增ADSCs,相差显微镜下观察两个品系来源的ADSCs的形态。用第4代细胞进行成骨和成脂诱导,分别用茜素红和油红O染色观察向成骨细胞分化后的矿化结节和向脂肪细胞分化后的脂质沉积。结果:两个品系来源的ADSCs在细胞形态上没有显著区别,都能进行成骨和成脂诱导分化。结论:SD大鼠和Wistar大鼠腹股沟脂肪垫来源的ADSCs诱导分化能力差异无显著性。
- 曲戎梅姚红卫戴景兴陈白虹张艳玲林来兴妹原林
- 关键词:干细胞分化成骨诱导
- 噬菌体展示ICAM-1模拟肽的制备及活性鉴定被引量:2
- 2003年
- 目的:获得具有生物学活性的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)模拟肽。方法:以噬菌体扩增及PEG沉淀法,大量制备展示十二肽P1、P2的噬菌体。采用ELISA、竞争抑制试验及免疫组化染色法,分别鉴定P1、P2模拟ICAM-1分子的结合特性及生物学活性。结果:噬菌体展示肽P1、P2能与抗ICAM-1单克隆抗体(mAb)15.2特异性结合。该结合作用可被ICAM-1分子竞争性抑制,P1、P2能模拟ICAM-1分子与LFA-1结合的功能。结论:噬菌体展示的短肽P1、P2具有天然ICAM-1的生物学活性。
- 郝文波徐伟文陈白虹王萍董文其李明
- 关键词:噬菌体活性鉴定