陈芳芳
- 作品数：18 被引量：69H指数：5
- 供职机构：广西动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西省自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 猪促炎细胞因子多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用
- 2012年
- 为建立及应用定量检测猪促炎细胞因子mRNA表达水平的方法,从分子水平研究脑心肌炎病毒(EMCV)的致病机制,分别构建含有猪促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α以及管家基因β-actin基因片段的重组质粒标准品,建立了检测IL-1β/β-actin、IL-6/β-actin、TNF-α/β-actin的多重TaqMan real-time PCR检测方法。标准曲线的相关系数均达到0.998以上;初始模板的检出下限均达到10拷贝/μL;只有以目标cDNA为模板,并加入特异性引物和探针的反应才能检测到荧光信号;组内与组间的变异系数均小于2%。应用所建立的检测方法,对猪源EMCV GXLC株感染仔猪心肌中IL-1β、TNF-α、IL-6mRNA的表达水平进行检测。结果表明,所建立的多重TaqMan real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于猪IL-1β、IL-6、TNF-α基因的检测及定量分析。
- 施开创梁媛陈芳芳屈素洁莫胜兰李军
- 关键词：促炎细胞因子脑心肌炎病毒TAQMAN探针
- 猪流行性腹泻病毒强毒株和疫苗株多重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用被引量：8
- 2017年
- 为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)的快速鉴别检测方法,针对PEDV基因序列设计3对特异性引物。第1对引物扩增野毒株(经典株、变异株)和疫苗株ORF3基因198 bp和148 bp片段;第2对引物扩增经典株和疫苗株S基因429 bp片段;第3对引物扩增变异株S基因274 bp片段。经过反应条件的优化,建立了能够同时检测并区分PEDV经典株、变异株及疫苗株的多重RT-PCR检测方法。该方法可以特异地检测PEDV,而与猪的其他重要病原FMDV、CSFV、PRRSV、TGEV、PRo V、PCV2、PRV无交叉反应;对重组质粒标准品的检出下限为2.62×10~2copies/L;重复试验获得了均匀一致的结果。应用该方法检测336份临床病料,PEDV阳性的120份,其中变异株96份、疫苗株21份、变异株和疫苗株混合感染3份。结果表明,本研究所建立的多重RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可用于PEDV经典株、变异株和疫苗株的快速鉴别检测和流行病学调查。
- 施开创龙飞翔粟艳琼邹联斌陈芳芳李军陈汉忠
- 关键词：猪流行性腹泻病毒野毒株疫苗株
- 中国“人-猪-禽”基因重排H1N2亚型猪流感病毒全基因克隆及遗传进化的研究被引量：16
- 2008年
- 【目的】为了研究2006年从广西病猪肺组织中分离的H1N2亚型猪流感病毒(SIV)A/Swine/Guangxi/13/2006(H1N2)(Sw/GX/13/06)的遗传学特性和8个基因的来源。【方法】运用RT-PCR方法对其全基因进行了克隆并运用分子生物学软件对其基因序列进行了遗传进化分析。【结果】血凝素(HA)、核蛋白(NP)、基质蛋白(M)和非结构蛋白(NS)基因来源于猪古典H1N1亚型流感病毒;神经氨酸酶(NA)和聚合酶蛋白(PB1)基因来源于人的H3N2亚型流感病毒;聚合酶蛋白(PA)和聚合酶蛋白(PB2)基因来自于禽流感病毒。【结论】可见Sw/GX/13/06是一株"人-猪-禽"三源基因重排H1N2亚型SIV,且与美国(1999?2001年)和韩国(2002年)分离到该型病毒的有明显的亲缘关系。据我们所知,这是中国首次报道含有禽流感病毒基因片段的重排H1N2SIV,该病毒是否对养猪业和人类公共卫生健康具有潜在的威胁,有待于进一步研究。
- 陈义祥蒙雪琼刘棋黄夏黄胜斌刘翠权施开创郭建刚陈芳芳胡丽萍
- 关键词：猪流感病毒基因重排遗传进化
- PRRSV+CSFV+PCV2+HPS混感病例的病理学研究
- 2012年
- 从PCR鉴定为"PRRSV+CSFV+PCV-2+HPS"混合感染的7份猪只病例中选取病变较典型脾、肺、肝以及淋巴结等组织,肉眼观察其剖检病变之后,制成病理切片,在显微镜下观察其病理变化,并将观察结果与PCR鉴定结果相对照。结果显示:"PRRSV+CSFV+PCV-2+HPS"混合感染的7份病例无论是在剖检还是在镜下都具有相似的病变并且与PCR鉴定基本相符;7份病例的病变与其他猪呼吸道疾病引起的病变有很大的共性。可见病理学研究,为我们诊断猪群疫病提供了诊断方向和必不可少的依据,但却不是唯一的依据,更多的时候还要通过临床诊断和实验室诊断。
- 梁媛陈芳芳温丽霞
- 关键词：病理学
- PRRSV+CSFV+PCV2+HPS混感病例的病理学研究被引量：1
- 2012年
- 从PCR鉴定为"PRRSV+CSFV+PCV-2+HPS"混合感染的7份猪只病例中选取病变较典型脾、肺、肝以及淋巴结等组织,肉眼观察其剖检病变之后,制成病理切片,在显微镜下观察其病理变化,并将观察结果与PCR鉴定结果相对照。结果显示:"PRRSV+CSFV+PCV-2+HPS"混合感染的7份病例无论是在剖检还是在镜下都具有相似的病变并且与PCR鉴定基本相符;7份病例的病变与其他猪呼吸道疾病引起的病变有很大的共性。可见病理学研究,为我们诊断猪群疫病提供了诊断方向和必不可少的依据,但却不是唯一的依据,更多的时候还要通过临床诊断和实验室诊断。
- 梁媛陈芳芳温丽霞
- 关键词：病理
- 广西猪细小病毒与PRRSV、CSFV、PCV2、PRV混合感染的检测被引量：11
- 2007年
- 应用PCR技术,对广西南宁、玉林、贵港、柳州、钦州和桂林6个市的10个规模化猪场送检的141份病猪组织样品进行猪细小病毒(PPV)的检测;同时,对鉴定为PPV阳性的样品进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CS-FV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病毒(PRV)的检测,以确定猪群中PPV与其它病毒混和感染情况。结果,所有样品诸病毒的阳性检出率达17.73%(25/141);流产胎儿PPV阳性率为19.57%(9/46),繁殖障碍母猪扁桃体的PPV阳性率为17.74%(11/62),发病断奶仔猪组织病料的PPV阳性率为15.15%(5/33),PPV与PRRSV、CSFV、PCV2和/或PRV4种病毒均有混合感染现象,混合感染样品占PPV阳性样品的48.00%(12/25)。
- 黄夏陈义祥何丹蒙雪琼陈芳芳胡丽萍赵国明磨龙春
- 广西部分地区规模化猪场主要疫病免疫抗体检测与分析被引量：9
- 2013年
- 为评估广西地区规模场猪群免疫水平,选择生猪养殖发达地区的23个规模场抽取1 072份血清样品,使用ELISA方法检测口蹄疫(FMD)、猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)、猪伪狂犬病(PR)等5种猪群主要疫病的抗体。结果显示,猪群FMDV抗体平均合格率达到89.02%,但存在感染隐患;种猪和育肥猪CSFV抗体水平具有保护力,但仔猪CSFV抗体平均合格率仅为73.91%,可能与母源抗体干扰有关;猪群存在PRRSV和PCV-2隐性感染;种猪存在PRV带毒情况。
- 梁晟杨荣兰彬苏凯陈芳芳郑列丰
- 关键词：规模化猪场传染病抗体
- 规模场种猪主要繁殖障碍性疫病免疫情况调查与分析被引量：3
- 2014年
- 广西是全国生猪养殖优势区域,对于近年生猪养殖业的快速发展,疫病防控成为影响发展的重要环节。种猪是一般规模场繁殖育种的核心,种猪主要疫病的免疫好坏是能否做好规模场猪群疫病整体防控的关键。近年,随着种猪跨省引入日益增多,导致种猪疫病特别是繁殖障碍性疫病不断发生,猪瘟（CSF）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）、猪圆环病毒2型（PCV-2）感染、
- 梁晟钟华训甘海霞郑敏温丽霞杨荣陈芳芳郑列丰
- 关键词：繁殖障碍性疫病种猪模场猪繁殖与呼吸综合征猪圆环病毒2型生猪养殖业
- 兽医实验室质量控制方法被引量：1
- 2015年
- 从内部质量控制和外部质量控制2个方面介绍了兽医实验室质量控制,并从实验室人员、仪器设备与计量器具、实验材料、实验方法、环境条件的质量控制等方面具体阐述了内部质量控制的内容,以期为做好兽医实验室质量控制以确保检测结果的公正性、准确性提供参考。
- 胡丽萍陈芳芳温丽霞马琳杨荣覃芳芸施开创
- 关键词：兽医实验室
- 基因重排H1N2亚型猪流感病毒的分离鉴定和生物学特性的研究被引量：4
- 2008年
- 本研究对2005年～2006年广西和海南省疑似猪流感(SI)病猪的组织病料进行了病毒分离,并对分离毒株进行了亚型鉴定和生物学特性的研究。结果显示:分离的3株流感病毒均为H1N2亚型猪流感病毒(SIV),能凝集多种动物的红细胞,但凝集谱与以往报道略有不同;为热不稳定型病毒;在电镜下可观察到典型流感病毒粒子。动物试验显示:小白鼠、大白鼠和家兔对分离毒株不敏感,而豚鼠较敏感,能较好地复制出流感症状和病理变化;本体试验动物仅有轻微的临床症状,但能检测到抗体升高的变化,并能从鼻腔和上呼吸道检测和分离到SIV。核苷酸同源性分析显示:分离毒株Sw/GX/17/05、Sw/GX/13/06和Sw/HN/1/05的血凝素(HA)基因分别与基因重排H1N2亚型SIVA/Swine/Indiana9K035/99、A/SW/MN/23124-T/01和A/swine/Zhejiang/1/04的核苷酸同源性最高,分别达97.4%、97.0%和95.7%;神经氨酸酶(NA)基因均与基因重排H1N2亚型流感病毒A/Turkey/MO/24093/99的核苷酸同源性最高,达97.2%～98.0%。核苷酸同源性分析进一步证实了分离毒株为基因重排H1N2亚型SIV。
- 蒙雪琼刘棋陈义祥黄胜斌刘翠权郭建刚郑敏赵国明陈芳芳
- 关键词：生物学特性
