韩正祥 作品数:96 被引量:441 H指数:11 供职机构: 徐州医学院附属医院 更多>> 发文基金: 江苏省卫生厅医学科技发展基金 国家自然科学基金 江苏省高校自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
GST-NRP-1融合蛋白的原核表达及纯化 被引量:1 2015年 目的:构建带有GST标签的人NRP-1融合蛋白原核表达载体,在大肠埃希菌(E.coli)中诱导其表达,并进行包涵体的复性及纯化。方法:利用RT-PCR扩增人NRP-1基因,将其克隆至p CR-blunt载体,酶切制备NRP-1基因片段,插入表达载体p GEX-4T-1,生成p GEX-4T-1-NRP-1,转入BL21感受态细胞以IPTG诱导其蛋白的表达。裂解细菌后行Western blot检测GST-NRP-1融合蛋白的表达,表达的包涵体经复性后用Glutathione Sepharose 4B纯化。结果:RT-PCR扩增出NRP-1基因并连入p CR-blunt载体;经亚克隆构建了融合蛋白表达载体p GEX-4T-1-NRP-1。转入BL21感受态细胞后考马斯亮蓝染色检测到GST-NRP-1融合蛋白的表达,经包涵体复性后得到纯化的融合蛋白。结论:成功构建带有GST标签的人NRP-1融合蛋白原核表达载体,为进一步研究NRP-1的结构、功能及其与之相互作用的蛋白奠定了基础。 韩正祥 张梦瑾 徐杰 王红梅 杜秀平 陈翀 徐开林关键词:NRP-1 原核表达 融合蛋白 纯化 老年非小细胞肺癌立体定向体部放疗联合化疗的临床观察 被引量:14 2015年 目的立体定向体部放疗、化疗是治疗老年非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)主要方法,立体定向体部放疗联合化疗是新的治疗模式。本研究观察立体定向体部放疗联合化疗治疗老年NSCLC患者治疗的临床疗效和不良反应。方法选取2011-06—01—2012-06—20徐州医学院附属医院48例ⅢB和Ⅳ期NSCLC的老年初治患者,随机数字表法分为治疗组23例和对照组25例。治疗组应用立体定向体部放疗联合化疗,对照组应用单纯立体定向体部放疗。立体定向体部放疗采用50%周边剂量3.0~4.0Gy/次,总剂量45.0-48.0Gy,1次/d,每周5次。化疗采用吉西他滨800mg/(m^2·d),持续静脉滴入0.5h,d1、d8。顺铂25mg/(m^2·d),静脉滴入,d1~d3。每3周重复,共3~4个周期。对2组患者治疗后的有效率、生活质量KPS评分、1和2年生存率以及不良反应进行比较分析。结果治疗组和对照组患者有效率分别为87%(20/23)和60%(15/25),差异有统计学意义,χ^2=4.408,P=0.036;生活质量评分改善率分别为74%(17/23)和40%(10/25),差异有统计学意义,χ^2=5.598,P=0.018;1年生存率分别为61%(14/23)和32%(8/25),χ^2=4.022,P=0.045;2年的生存率分别为39%(9/23)和12%(3/25),χ^2=4.703,P=0.030;中位生存时间分别为14和7个月,χ^2=8.520,P=0.04;患者放射性肺炎发生率分别为35%(8/23)和20%(5/25),χ^2=1.326,P=0.25;放射性肺纤维化发生率分别为17%(4/23)和12%(3/25),χ^2=0.279,P=0.597;其他不良反应经对症处理后均可耐受。结论采用立体定向体部放疗联合化疗治疗老年NSCLC,可提高患者近期有效率,改善生活质量,提高1、2年生存率及中位生存时间,且耐受性较好。 陈亚平 姜晓晓 冯守信 韩正祥 杜秀平 蒋冠关键词:化疗 非小细胞肺癌 替吉奥联合伊立替康治疗FOLFOX耐药的晚期结直肠癌的临床研究 被引量:5 2014年 目的评价替吉奥(S-1)联合伊立替康(CPT-11)治疗FOLFOX耐药的晚期结直肠癌患者的临床疗效和不良反应。方法选择对FOLFOX方案耐药的有可评价病灶的晚期结直肠癌患者144例,将其随机分为实验组(72例)和对照组(72例)。实验组给予替吉奥联合伊立替康(IRIS)方案,对照组给予伊立替康联合亚叶酸钙、5-氟尿嘧啶(FOLFIRI)方案。每2个周期评价疗效及不良反应发生情况。结果 144例患者均可评价疗效,实验组和对照组的CBR分别为54.17%和50.00%,RR分别为19.4%和12.86%,PFS分别为6.8和5.1个月。两组间PFS的差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者主要Ⅲ/Ⅳ度不良反应(血液学毒性、腹泻、手足综合症)的发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论替吉奥联合伊立替康治疗FOLFOX耐药的晚期结直肠癌患者,其中位无进展期高于FOLFIRI方案,而毒副反应严重程度无显著差异,可作为转移性结直肠癌晚期二线化疗的一种新的选择。 周冬梅 韩正祥 杜秀平 孔静姝 王红梅关键词:伊立替康 晚期结直肠癌 临床疗效 外周T细胞淋巴瘤的药物治疗进展 2012年 外周T细胞淋巴瘤(FFCL)为异质性血液学肿瘤组,起源于成熟T细胞,预后较差。目前该病的治疗尚处于探索阶段,很多新药的研究正在进行,新的药物组合方案的尝试也已展开,从很大程度上提高了该类患者的临床疗效与预后。本文着重于探索目前PTCL的药物治疗进展。 赵琳玉 韩正祥 高向阳 杜秀平关键词:外周T细胞淋巴瘤 药物治疗 小鼠Lewis肺癌胸腔与皮下移植模型的比较研究 被引量:15 2007年 目的:建立小鼠Lewis肺癌胸腔移植模型与皮下移植模型,比较两种模型生存时间、生活状态以及肿瘤进展情况,寻找适合评价肺癌发展进程的模型。方法:将传代培养的Lewis肺癌细胞(LLC)接种于C57BL/6近交系小鼠的腋后线第6肋间胸腔内和腋后部皮下,建立两组肺癌模型:胸腔组和皮下组。观察两组模型的成瘤率、小鼠的存活时间和生活状态及肿瘤的浸润和转移情况。结果:小鼠Lewis肺癌胸腔组和皮下组接种成瘤率100%。胸腔组小鼠中位生存时间13.5(8~18)d,皮下组中位生存时间45(25~71)d,胸腔组的生存期范围离散程度较皮下组小,P=0.023。胸腔组小鼠在生存过程中可出现肿瘤局部浸润和远处转移的晚期肺癌特征,而皮下组则很少出现上述情况。病程中胸腔组小鼠恶病质状态较皮下组严重,胸腔组小鼠体质量下降、饲料消耗量、游泳试验和常压耐缺氧试验时间均较皮下组严重,差异有统计学意义。结论:小鼠Lewis肺癌胸腔移植模型较皮下移植模型更能反映肺癌发展的进程,胸腔移植模型可作为晚期肺癌的动物模型。 杜秀平 高向阳 韩正祥 彭鹏关键词:动物模型 靶向stathmin和mdr1基因逆转卵巢癌细胞紫杉醇耐药的研究 被引量:6 2011年 目的探讨以RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术靶向stathmin和mdr1基因逆转卵巢癌细胞紫杉醇耐药的可行性。方法分别构建靶向stathmin和mdr1基因的质粒:pGU6-GFP-neo-ST-MN1和pGU6-GFP-neo-MDR1;将质粒转染到卵巢癌紫杉醇耐药细胞株SKOV3/TAX。Real-ti me RT-PCR检测stathminm和mdr1的mRNA变化;Western blot检测其蛋白表达变化;荧光显微镜检测细胞凋亡情况;CCK-8法分析细胞对紫杉醇的敏感度。结果 Real-ti me RT-PCR及Western blot显示pGU6-GFP-neo-MDR1质粒对mdr1基因,pGU6-GFP-STMN1-294shRNA质粒对stathmin基因在mR-NA水平和蛋白水平均有明显抑制(P<0.05),荧光显微镜下共转染组细胞凋亡增多,CCK-8示共转染组逆转紫杉醇耐药效果最明显。结论体外RNAi可有效沉默卵巢癌紫杉醇耐药株SKOV3/TAX细胞内stathmin基因和mdr1基因,逆转其紫杉醇耐药。 肖玉洁 王红梅 韩正祥 高向阳 裴冬生 曾令宇 杜秀平关键词:RNAI STATHMIN 紫杉醇耐药 小鼠Lewis肺癌模型对不同药物干预的反应 被引量:1 2008年 目的评价小鼠Lewis肺癌胸腔移植模型和皮下移植模型对不同药物治疗的反应。方法建立小鼠Lewis肺癌胸腔和皮下移植模型,分别随机分为对照组、顺铂(DDP)组、吉西他滨(GEM)组和中药组。采用不同药物干预后,观察小鼠的一般生活状态、生存时间、体重、饲料消耗量、游泳试验时间及常压耐缺氧试验时间。结果在不同药物干预下,胸腔移植模型DDP组、GEM组和中药组小鼠生活状态有所好转,生存时间延长、体重和进食均较相应对照组增加(P<0.05),游泳实验和耐缺氧实验时间均有所延长(P<0.05)。结论小鼠Lewis肺癌胸腔移植模型较皮下移植模型可以较好地反映药物的治疗效果。 杜秀平 韩正祥 高向阳 彭鹏关键词:肺癌 动物模型 复方苦参联合放化疗治疗恶性肿瘤 被引量:13 2006年 目的:回顾性分析复方苦参注射液联合放化疗治疗恶性肿瘤的临床疗效和不良反应。方法:选取同期住院的恶性肿瘤患者69例,分为治疗组35例和对照组34例。两组均采用放化疗综合治疗,治疗组在常规化疗或放疗基础上予复方苦参注射液。比较两组近期疗效、胃肠道反应、白细胞计数及血转氨酶水平等指标的差异。结果:治疗组完全缓解(CR)14例,部分缓解(PR)7例,稳定(NC)10例,恶化(PD)4例。对照组CR13例,PR7例,NC9例,PD5例,总有效率58.8%,两组疗效无统计学差异(P=0.980)。治疗组胃肠道反应、白细胞降低及转氨酶升高等不良反应发生率比对照组低(P<0.05)。结论:联合复方苦参虽未能提高放化疗的近期疗效,但能明显减轻放化疗的不良反应。 姚元虎 杜秀平 章龙珍 唐天友 韩正祥 王建设 张璐关键词:复方苦参 化学治疗 恶性肿瘤 沙利度胺对顺铂诱发大鼠异食癖的影响 被引量:3 2012年 目的观察沙利度胺对顺铂引起的大鼠异食癖的作用,探讨其抗化疗呕吐的实验基础。方法健康大鼠24只,随机分为对照组、模型组、低剂量沙利度胺组、高剂量沙利度胺组,观察72h内大鼠摄取高岭土所占总进食量的比值;另取大鼠48只,分组同前,分别于实验开始后5、33h,取大鼠延髓及胃窦组织,放免法测定P物质,免疫组化法测定神经激肽1受体(NK-1R)。结果顺铂10mg/kg可以引起大鼠异食癖,沙利度胺10mg/kg在顺铂应用24h后可以减轻这种异食癖(P〈0.05),同时伴有延髓及胃窦P物质的减少(P〈0.05),而NK-1R未出现明显变化。结论沙利度胺可以减轻顺铂引起的大鼠异食癖,提示在抗呕吐治疗中沙利度胺可能有一定的应用前景。 马剑 韩正祥 高向阳关键词:沙利度胺 顺铂 异食癖 P物质 化疗联合CIK/DC细胞治疗中晚期结肠癌的临床疗效观察 被引量:10 2011年 目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)和树突状细胞(DC)联合化疗治疗结肠癌患者的临床疗效。方法63例中晚期结肠癌患者随机分为2组:研究组(化疗联合过继免疫治疗组)32例,对照组(单纯化疗组)31例,观察2组患者临床疗效、生活质量、免疫指标的变化。结果研究组化疗联合CIK/DC细胞治疗后,总有效率(CR+PR)为65.62%。对照组单纯化疗后,总有效率为41.94%。2组之间总有效率的差异有统计学意义(χ2=4.58,P〈0.05)。研究组第1、2年生存率为96.4%、87.3%,对照组第1、2年生存率为91.3%、82.7%,差异无统计学意义(P〉0.05)。研究组治疗后生活质量及免疫功能明显高于对照组(P〈0.05)。结论化疗联合过继免疫治疗中晚期结肠癌近期疗效好,可明显提高患者的生活质量和免疫功能。 张洁 耿杰 韩正祥 高向阳关键词:中晚期结肠癌 树突状细胞 过继免疫治疗