韩甫
- 作品数：6 被引量：30H指数：4
- 供职机构：苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 饲养层体系的建立与胚胎干细胞的培养被引量：4
- 2007年
- 胚胎干细胞（ES细胞）是由早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分离、抑制分化培养获得的多潜能细胞。ES细胞的研究已在多种动物实验中获得了突破性进展。ES细胞在体外培养不仅要保持其增殖能力，而且要维持其未分化的状态。由于饲养层细胞能分泌白血病抑制因子（LIF）等抑制ES细胞分化的因子，目前，ES细胞的培养主要是以饲养层来维持其干细胞特性。本实验探讨了胎鼠成纤维细胞（MEF）的分离培养、传代及其作为饲养层细胞的处理条件，建立快速稳定的MEF培养体系，并在此基础上探索了小鼠ES细胞的适宜培养、传代条件。
- 盛利琴叶荣陈学进韩甫张焕相
- 关键词：饲养层细胞胚胎干细胞白血病抑制因子ES细胞原始生殖细胞鼠成纤维细胞
- 小鼠胚胎干细胞在丝素材料上向神经细胞分化的研究被引量：1
- 2008年
- 以小鼠胚胎干细胞(ES)为种子细胞,使用改良的4-/4+RA方案,诱导小鼠ES细胞在丝素材料上向神经细胞分化,探讨丝素材料对其生长、黏附、分化等情况的影响。将小鼠ES细胞悬浮培养4 d得到的拟胚体(EBs)分别接种到经丝素膜和明胶包被的培养皿上进行诱导,比较不同材料上EBs的贴壁率及向神经元分化的比率。结果表明EBs在明胶和柞蚕丝素蛋白膜(TSF)上贴壁较快,平均贴壁率为90.3%和84.4%,在桑蚕丝素蛋白膜(SF)上贴壁较慢,贴壁率低,仅为38.5%,同时三者神经元的分化比率均能达到40%以上,无明显差异。以上实验显示TSF有望成为小鼠ES细胞向神经细胞分化的支架材料。
- 鲍柳君叶荣韩甫张军超张焕相
- 关键词：胚胎干细胞丝素神经细胞
- 小鼠胚胎干细胞无饲养层培养及其生物学特性被引量：4
- 2009年
- 目的建立小鼠胚胎干(ES)细胞株S8在无饲养层的条件下短期内连续传代体系,获得大量纯的ES细胞。方法ES-S8细胞无饲养层连续传代后,检测其未分化指标以及多分化潜能。结果ES-S8细胞在无饲养层条件下培养5代,AKP染色、SSEA-1免疫荧光、OCT-4均显阳性,以及经拟胚体(EB)途径自发分化后,能形成多种类型的细胞。结论ES-S8细胞能够在无饲养层条件下培养,至少传5代仍能保持未分化特异性指标和多分化潜能。
- 韩甫叶荣鲍柳君张军超张焕相
- 关键词：胚胎干细胞饲养层细胞拟胚体小鼠
- 无血清无饲养层条件下培养小鼠胚胎干细胞被引量：8
- 2008年
- 目的研究在无血清无饲养层条件下小鼠胚胎干细胞的培养方法,为最终建立无血清无饲养层培养系统打下基础。方法比较小鼠胚胎干细胞ES-S8株在无血清培养体系和有血清培养体系中的生长情况,分析ES-S8细胞克隆形成效率,测定其生长速度;然后在撤去血清和饲养层的条件下培养ES-S8细胞,进行AKP染色和表面标记物SSEA-1免疫荧光检测。结果ES-S8细胞在无血清培养条件下细胞生长速度减缓,克隆形成率降低,但AKP染色、SSEA-1免疫荧光均显阳性;在无血清无饲养层条件下ES-S8细胞培养仍能形成克隆,且AKP染色、SSEA-1免疫荧光均显阳性。结论研究表明ES-S8细胞能够在无血清无饲养层的培养条件下生长,保持其良好的未分化特性。
- 韩甫叶荣鲍柳君张军超张焕相
- 关键词：载脂蛋白
- 昆明小鼠胚胎成纤维细胞的分离与体外培养被引量：10
- 2007年
- 研究了昆明小鼠胚胎成纤维细胞的分离、培养和生长特征,建立了快速、稳定的优质饲养层细胞培养体系.从不同日龄的胎鼠均分离到胚胎成纤维细胞,但最佳分离时间为13.5~14.5d;三种分离原代胚胎成纤维细胞的方法中胰酶消化法效果最好,能在较短的周期内获得大量原代及传代细胞;MEF细胞形态以小梭形为主,呈漩涡状、火焰状生长;增殖速度较快,每1~2d可传一代,按1∶3比例常规传代;5代以内适宜制作饲养层用,5代以后细胞开始变形呈现典型的衰老特征.
- 盛利琴叶荣韩甫蔡东晖张焕相
- 关键词：胚胎成纤维细胞饲养层体外培养
- 小鼠胚胎干细胞与复合丝素膜的生物相容性研究被引量：3
- 2009年
- 探索胚胎干细胞与丝素材料结合的可行性及生物相容性,建立一套在丝素膜上小鼠胚胎干细胞的体外培养体系。通过形态观察、MTT比色法、克隆形成率分析、碱性磷酸酶检测、免疫荧光染色、核型分析等方法,研究丝素膜对小鼠胚胎干细胞的黏附、生长情况、未分化状态的维持、胚胎干细胞特性、遗传、分化等方面的影响。结果显示,两者之间具有良好的生物相容性,丝素膜材料支持小鼠胚胎干细胞的体外无限扩增和未分化特征,并保持其正常核型。证实丝素材料可作为胚胎干细胞结合的良好生物材料。
- 叶荣盛利琴陈学进李明忠韩甫张焕相
- 关键词：小鼠胚胎干细胞饲养层丝素生物相容性
