顾东生
- 作品数：8 被引量：30H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学历史地理更多>>
- 靶向肝脏基因组位点特异性整合治疗血友病B的初步研究
- 研究背景和目的:血友病B是一种由于凝血因子以缺乏导致的严重出血性疾病，为X染色体连锁隐性遗传。主要临床表现是不可预测的、反复自发性软组织及大关节出血.临床上乙型血友病的严重程度与循环中FIX(coagulation fa...
- 顾东生
- 关键词：血友病B腺病毒载体CRE血友病B免疫性血小板减少症CXCL10
- 文献传递
- 一种用于血友病B基因治疗的腺病毒载体及其用途
- 本发明公开了一种用于血友病B基因治疗的腺病毒载体及其用途，该载体能同时表达hFIX与红色荧光蛋白；在hFIX与红色荧光蛋白串联基因表达框两侧各有一个方向相同的Cre整合酶作用位点loxp位点，在表达框内部有位点特异性整合...
- 张磊杨仁池顾东生杜伟廷薛峰
- 文献传递
- 遗传性蛋白S缺陷症2例报告及文献复习被引量：2
- 2008年
- 遗传性蛋白S（PS）缺陷症患者临床较少见。现将我院收治的2例遗传性PS缺陷症病例报告如下，并复习文献，就其发病机制、临床表现及诊断治疗等情况进行讨论.
- 赵海丰杜伟廷顾东生薛峰葛菁李尚珠杨仁池
- 关键词：遗传性蛋白S缺陷症蛋白S
- 抗脐带间充质干细胞表面分子噬菌体ScFv抗体库的构建及初步鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:利用噬菌体展示技术构建抗脐带间充质干细胞表面分子噬菌体ScFv抗体库。方法:收集P3代培养的UC-MSCs免疫BALB/c小鼠,提取其脾细胞总RNA,RT-PCR扩增全套VH和VL基因片段,将其先后克隆入噬菌粒pSEX81中,构建成完整的噬菌体ScFv抗体库。结果:构建的噬菌体ScFv抗体库的库容为2×107cfu,ScFv插入重组率为93%,BstN1酶切图谱呈不同多样性。ScFv抗体库经3轮初步筛选后插入重组率达100%,3个克隆出现了相同的酶切图谱,并且随着筛选次数的增加,输出/输入比明显提高,这说明抗体库得到了特异性富集。结论:成功地构建了抗脐带间充质干细胞表面分子噬菌体ScFv抗体库,这为将来筛选特异性抗体和进一步用于间充质干细胞表面特异性分子研究奠定了坚实的基础。
- 徐洁顾东生廖文斌许静杜伟廷张磊卢士红韩忠朝
- 关键词：间充质干细胞脐带噬菌体展示单链抗体库
- 新型血友病B基因治疗的腺病毒-整合酶嵌合系统的构建及其体外表达鉴定被引量：4
- 2010年
- 本研究构建一种既可高效感染靶细胞又能实现安全定点整合入宿主基因组的腺病毒嵌合载体。通过一系列DNA操作构建腺病毒-整合酶嵌合系统,该系统包含两个腺病毒载体:一个携带转基因表达框,表达框内有hFⅨ,红色荧光蛋白编码序列以及attB(phiC31识别位点),表达框两侧各有1个loxP(Cre识别位点);另一个腺病毒载体携带Cre和phiC31基因。同时构建只表达Cre和只表达phiC31的载体作为对照载体。在体外分别用脂质体转染293A细胞,用荧光显微镜观察荧光蛋白的表达,用RT-PCR鉴定各个基因的表达。结果表明,该腺病毒-整合酶嵌合系统构建成功。体外分别用脂质体转染293A细胞后,可见绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白表达。RT-PCR鉴定表明,该系统能够成功表达各种目的蛋白。结论:成功构建了腺病毒-整合酶嵌合系统,为进一步研究其治疗作用提供良好基础。
- 张磊顾东生薛峰杜伟廷刘鹏霞周泽平卢士红杨仁池
- 关键词：腺病毒载体CRE血友病B
- 一种能够逆转白血病多药耐药的RNA干扰药物
- 本发明公开了一种能够逆转白血病多药耐药的RNA干扰药物，针对多药耐药基因mdr1进行靶点治疗，提供了一段针对多药耐药基因mdr1的干扰RNA的核苷酸序列，其序列为：5-GAUCCCGAAACCAACUGUCAGUGUAU...
- 杨仁池杜伟廷刘斌顾东生
- 文献传递
- 糖尿病患者动员后外周血单个核细胞促血管新生能力被引量：3
- 2007年
- 目的研究糖尿病患者来源的动员后外周血单个核细胞(M-PBMNCs)移植治疗肢体缺血的疗效,探讨糖尿病患者M-PBMNCs促血管新生能力是否有缺陷及其病理生理机制。方法体外培养内皮祖细胞并鉴定和计数。结扎链脲菌素诱导的糖尿病裸鼠股动脉,造成重度缺血模型后,将来自糖尿病患者、正常人的M-PBMNCs(106)及磷酸盐缓冲液(PBS)分别局部注射到缺血组织中。在第1、3、7、14、21、28天分别用激光多普勒检测局部血流,观察缺血肢体的活动度和缺血情况,用免疫组织化学方法检测缺血部位毛细血管密度和小动脉密度。结果体外内皮祖细胞培养显示糖尿病患者M-PBMNCs中的内皮祖细胞数量相对较少(P<0.05),裸鼠局部缺血组织血流量及血管密度均与糖尿病患者的内皮祖细胞数量呈正相关(R=0.486,P<0.05;R=0.491,P<0.05),而糖尿病患者内皮祖细胞的数量又与其病程呈负相关(R=-0.587,P<0.05)。糖尿病患者M-PBMNCs促进缺血下肢血流和功能恢复的疗效强于PBS组,但不及正常人M-PBMNCs组(P<0.05)。移植了糖尿病患者M-PBMNCs的缺血组织的毛细血管、小动脉密度均低于正常人M-PBMNCs组(P<0.05)。结论糖尿病患者M-PBMNCs的促血管新生能力存在缺陷,使其移植治疗肢体缺血的疗效减低。
- 周斌顾东生刘鹏霞郑翠玲董春兰杜伟廷武开宏韩忠朝
- 关键词：糖尿病内皮祖细胞缺血
- 脐带血干细胞的基础与应用研究被引量：20
- 2006年
- 作为造血干/祖细胞(hematopoieticstemcells/hematopoieticprogenitorcells,HSCs/HPCs)的另一来源,脐带血已经应用于临床治疗多种恶性和非恶性疾病。脐带血中HSCs/HPCs的质与量是决定其临床应用效果的最重要因素。同时,脐带血中还存在多种非造血的干细胞和前体细胞,如间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)、内皮前体细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)和非限制性体干细胞(unrestrictedsomaticstemcells,USSCs)等,这些细胞可能会在未来的细胞治疗和再生医学中发挥重要作用。本综述还讨论了脐带血的临床应用及HSCs/HPCs的体外扩增、增加HSCs归巢和再植能力等提高其临床应用能力的相关研究。
- 顾东生刘斌韩忠朝
- 关键词：脐带血造血干细胞
