高楠
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:首都医科大学宣武医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市属高等学校人才强教计划资助项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 一个小型人酪氨酸羟化酶基因启动子的分离和活性分析
- 2009年
- 目的探讨酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)基因上游调控区的功能。方法PCR法扩增人TH基因上游片段,插入pGL3-Basic质粒,构建一个表达荧光素酶的报告基因。将报告基因瞬间转染MES23.5、293及Cos7细胞,用Dual Luciferase Assay法测定目的DNA片段的启动子活性。结果测序结果表明,分离的DNA片段长度为520bp,与人TH基因-493/+27区一致。与pGL3-Basic质粒相比较,构建的报告基因在3种细胞中显著表达(P<0.01)。结论TH基因-493/+27区具有明显的启动子活性,构建的报告基因有助于研究TH基因表达的调节。
- 李尧华叶懿文高楠李昕于顺杨慧陈彪
- 关键词:酪氨酸羟化酶启动子多巴胺帕金森病
- α-突触核蛋白抑制酪氨酸羟化酶基因-495^+25区调节活性
- 2008年
- 高楠李尧华于顺李昕陈彪
- 关键词:Α-突触核蛋白酪氨酸羟化酶调节活性蛋白抑制PARKINSON
- α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶基因启动子的影响被引量:1
- 2007年
- 目的探讨α-突触核蛋白对多巴胺代谢的调节机制。方法以人基因组DNA为模板,PCR法扩增酪氨酸羟化酶(Tyrosine Hydroxylase, TH)基因区的部分DNA片段(-495^+25),将其插入质粒pGL3-Basic,构建荧光素酶报告基因重组质粒pGL3-THprom,转染多巴胺能神经元细胞系MES23.5和MES23.5/hα-Syn+。结果双荧光素酶活性分析表明,pGL3-Basic、pGL3-THprom和pGL3-Control在MES23.5细胞中表达的荧光素酶活性分别为5.60±0.67, 26.80±4.11和32.90±4.75,而pGL3-THprom在MES23.5和MES23.5/hα-Syn+中表达的荧光素酶活性分别为26.80±4.11和14.40±0.61,差异极显著(P<0.01)。结论这些结果提示扩增的DNA片段具有启动子活性,而α-Syn作为反式作用因子通过影响TH基因启动子的功能发挥对多巴胺代谢的负性调控作用。
- 高楠李尧华李昕于顺傅桂莲陈彪
- 关键词:酪氨酸羟化酶基因表达多巴胺
- α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶基因启动子的影响作用研究
- 2007年
- 目的:探讨α-突触核蛋白对多巴胺代谢的调节机制。方法:以人基因组DNA为模板,PCR法扩增酪氨酸羟化酶(Tyrosine Hydroxylase,TH)基因区部分DNA片段(+25~-495bp),将其插入质粒pGL3-Basic,构建荧光素酶报告基因重组质粒pGIm—THprom,转染多巴胺能神经元细胞系MES23.5和MES23.5/hα-Syn^+。结果:双荧光素酶活性分析表明,pGL3-basic、pGIm—THprom和pGL3-control在MES23.5细胞中表达的荧光素酶活性分别为5.60±0.67,26.80±4.11和32.90±4.75,而pGL3-THprom在MES23.5和MES23.5/hα-Syn+中表达的荧光素酶活性分别为26.80±4.11和14.40±0.61。
- 李尧华高楠李昕于顺陈彪傅桂莲
- 关键词:Α-突触核蛋白酪氨酸羟化酶多巴胺能神经元基因重组质粒DNA片段