黄晓燕
- 作品数：23 被引量：35H指数：3
- 供职机构：宁波市医疗中心李惠利医院更多>>
- 发文基金：宁波市自然科学基金国家自然科学基金宁波市医学科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种治疗2型长QT综合征的药物组合物及其应用
- 本发明属于医药领域，涉及一种治疗2型长QT综合征的药物组合物及其应用。本发明利用免疫印迹检测发现鲁玛卡托和HSF1A二者联合应用对hERG突变蛋白的成熟转运具有明显的促进作用，在转染hERG及其突变质粒的HEK‑293细...
- 廉姜芳杨曦郑泽群黄晓燕宋勇飞袁园
- 文献传递
- 重组质粒pmCherry-WT-hERG和pEGFP-E637K-hERG的构建及其在细胞内的表达和定位
- 2015年
- 目的分别构建先天性长QT综合征(LQTS)相关HERG基因和E637K突变基因与红色和绿色荧光蛋白基因的融合表达载体pmCherry-WT-hERG和pEGFP-E637K-bERG,观察其在细胞内的表达和定位情况。方法将克隆在pcDNA3上的HERG和E637K片段分别亚克隆到红色荧光蛋白载体pmCherry-C2和绿色荧光蛋白载体pEGFP-C1上,转染HEK293T细胞,24 h后利用western blot技术和荧光显微镜观察重组质粒蛋白表达和细胞内定位情况。结果重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误。转染pmCherry-WT-hERG野生型质粒的细胞可以检测到135 kD和155 kD 2条蛋白质条带,而转染pEGFP-E637K-bERG突变型质粒的细胞仅显示1条135 kD蛋白质条带,155 kD处条带缺失。融合蛋白发出的红色和绿色荧光表明,突变型蛋白分布于胞浆中,而野生型蛋白主要位于胞膜上。结论成功构建了pmCherry-WT-hERG和pEGFP-E637K-hERG不同荧光蛋白融合表达载体,并在真核细胞中得到有效表达,为LQTS突变基因的进一步功能研究奠定了基础。
- 黄晓燕杨曦廉姜芳
- 关键词：先天性长QT综合征HERG基因真核表达载体
- 长QT综合征突变基因功能分析和药物及分子干预系列研究
- 廉姜芳周建庆金丽华黄晓燕施波陈治奎姜庆军徐卫峰孙琦
- 深入开展LQTS研究对开发抗心律失常药物和探讨基因特异性治疗有重要意义。在该项目的系列研究中，率先在国内开展HERG突变基因的功能分析，揭示其发病机制；比较研究不同突变位点对通道功能以及药物敏感性的差异，筛选有效的治疗药...
- 关键词：
- 关键词：抗心律失常药物基因治疗
- 先天性长QT综合征HERG-E637K突变体的构建
- 2009年
- 目的构建先天性长QT综合征相关HERG基因E637K突变体。方法采用直接PCR法扩增E637K突变体,将扩增的E637K连接到pGEM-T载体。结果成功构建HERG基因E637K突变体pGEM-HERG-E637K,构建的突变体经DNA直接测序显示HERG基因cDNA1909位点碱基G突变为A。结论用该方法构建了HERG基因E637K突变体,为突变基因的进一步功能研究奠定了基础。
- 张顺廉姜芳黄晓燕杨曦王英周建庆
- 关键词：HERG基因
- miR-148a靶向DNA甲基转移酶1对ATP结合盒转运体G1基因甲基化的调节
- 2017年
- 目的探讨微小RNA(miR-148a)在巨噬细胞中能否靶向DNA甲基转移酶1(DNMT1)从而调节ATP结合盒转运体G1(ABCG1)的甲基化水平。方法运用生物信息学网站预测DNMT1是miR-148a靶基因,利用双萤光素酶报告基因系统验证miR-148a能否与DNMT1(3'UTR)特异性结合;将miR-148a模拟物转染至THP-1源性巨噬细胞,运用实时荧光定量PCR技术检测DNMT1的mRNA水平,运用Western Blot技术检测DNMT1蛋白表达水平;运用焦磷酸测序技术观察miR-148a能否在巨噬细胞中影响ABCG1甲基化水平。结果 miR-148a能显著降低pmir GLODNMT1载体上的萤火虫萤光素酶活性;miR-148a在巨噬细胞中不能降低DNMT1的mRNA水平,但可以降低DNMT1的蛋白质水平,上述差异均有统计学意义(P<0.05);焦磷酸测序发现在THP-1源性巨噬细胞miR-148a未影响ABCG1的甲基化水平。结论 miR-148a可以与DNMT1(3'UTR)特异性结合并且阻遏DNMT1蛋白质合成,但是在巨噬细胞中不能通过改变DNMT1的蛋白水平而影响ABCG1甲基化水平。
- 杨曦李俊骍张霖黄晓燕廉姜芳
- 关键词：DNA甲基转移酶1甲基化THP-1源性巨噬细胞
- 一种心脏来源外泌体生物标志物的筛选鉴定方法及其应用
- 本发明属于生物医药领域，涉及一种心脏来源外泌体生物标志物的筛选鉴定方法及其应用。本发明将外泌体为主标志物，丝氨酸肽酶为辅标志物，基于丝氨酸肽酶仅在心肌细胞中特定高表达的膜蛋白分子(CORIN)来分选血浆中心肌细胞特定来源...
- 廉姜芳金晓俊宋勇飞黄晓燕胡佳勒王英巴艳娜
- 一种与长QT综合征相关的miRNA及其应用
- 本发明公开了一种可作为长QT综合征预判罹患风险和诊断的分子标记物，即miRNA-3619；以及其反义寡聚核苷酸AMO-3619在制备治疗长QT综合征药物中的应用，主要在于药物促进hERG基因功能的应用，其特征在于，药物组...
- 郑梅霞廉姜芳周建庆杨曦黄晓燕庄凯丽国建毛海燕巴艳娜方培亮
- 文献传递
- 二甲双胍治疗26例胰岛素抵抗型多囊卵巢综合征的临床研究被引量：16
- 2013年
- 目的观察二甲双胍治疗胰岛素抵抗型多囊卵巢综合征的临床疗效以及对患者血清中炎症因子、内分泌指标、糖代谢指标水平的影响。方法回顾性分析2010年5月～2011年12月住院的PCOS伴有胰岛素抵抗患者26例,检测血清空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和睾酮(T)的含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清IL-18、TNF-α、CRP的含量。结果 26例胰岛素抵抗型多囊卵巢综合征患者经二甲双胍治疗后,10例月经稀发患者恢复正常7例(70.00%);13例继发闭经患者恢复排卵月经6例(46.15%);15例不孕症患者在治疗观察中怀孕3例(20.00%)。按疗程服用二甲双胍后,与治疗前相比,治疗后E2、FSH水平无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后FPG、FINS、HOMA-IR、T、LH、IL-18、TNF-α、CRP明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论二甲双胍能够有效调节胰岛素抵抗型多囊卵巢综合征患者血清中炎症因子、内分泌、糖代谢指标水平,使患者恢复月经周期及促进排卵,提高受孕,阻断多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗诱导的心血管疾病发病高危因素。
- 张君莉黄晓燕
- 关键词：二甲双胍内分泌糖代谢
- 非小细胞肺癌314例EGFR基因突变的研究被引量：3
- 2014年
- 目的研究中国人非小细胞肺癌表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的情况及其与临床特征(性别、临床分期、吸烟情况)的关系。方法采用PCR扩增和基因测序检测314例非小细胞肺癌(NSCLCs)EGFR外显子19和21的突变情况,分析其突变与临床特征的关系。结果 314例中共检测出120例(38.2%)EGFR突变,EGFR基因突变与性别和吸烟史相关,与临床分期无关。结论中国人NSCLCs的EGFR突变率较高,在使用EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗前进行EGFR基因突变检测很有必要。
- 田辉于凯忠毛争春金成华潘海彬杨曦黄晓燕沈韦羽
- 关键词：表皮生长因子受体非小细胞肺癌基因突变
- 冠心病相关miR-206启动子区转录因子的预测与鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的预测并初步鉴定转录因子对hsa-miR-206启动子区的靶向结合,以进一步研究其转录调控机制。方法通过生物信息学软件预测Myo D在hsa-miR-206启动子区有结合位点,分别构建p GL3-miR206 promoter萤光素酶报告载体和p EGFP-N2-Myo D表达质粒,分组共转染于He La细胞,应用双萤光素酶报告基因法检测定萤光素酶活性。结果生物信息学软件预测hsa-miR-206启动子区有2个转录因子Myo D结合位点。构建的2个载体经电泳及测序证实无误。双萤光素酶报告基因法检测显示,与对照组相比,共转染p GL3-Basic-miR206 promoter荧光素酶报告载体和p EGFP-N2-Myo D表达质粒实验组的荧光素酶活性显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Myo D能在hsa-miR-206启动子区靶向结合,是为hsa-miR-206上游转录因子,为后续研究miR-206的转录调控机制提供了一定的实验基础。
- 杨曦陈小良黄晓燕廉姜芳
- 关键词：启动子转录因子
