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Armillariella tabescens(E-20)cDNA文库部分克隆随机测序及阿拉伯糖苷酶全长cDNA的克隆与表达: 假密环菌(Armillariella tabescens)为白磨科真菌,寄生于树干基部或根部,引起多种树木腐病,菌体可食用。有报道菌丝体可用于治疗急性胆囊炎,慢性胆囊炎急性发作,急性传染性肝炎,迁延性肝炎,慢性肝炎。其含...; 黄辉; 关键词：毕赤酵母菌生物信息学阿拉伯糖苷酶; 文献传递

Armillariella tabescens阿拉伯糖苷酶基因的克隆及在毕赤酵母中的分泌表达: 本文根据已克隆出的阿拉伯糖苷酶基因序列，设计引物从假密环菌的mRNA中克隆出阿拉伯糖苷酶的ORF片段，构建重组质粒pPIC9-AF与组氨酸标签融合，电转化毕赤酵母菌GS115并进行诱导表达。; 谢春芳黄辉刘大岭姚冬生; 关键词：克隆毕赤酵母; 文献传递

Armillariella tabescens阿拉伯糖苷酶基因全长cDNA的克隆与表达被引量：1: 2006年; 通过对假密环菌(Arm illariella tabescens)的表达cDNA克隆文库进行随机测序,获得一段与多形拟杆菌的阿拉伯糖苷酶序列同源性很高的EST序列(AJ620046).根据获得的EST序列用SMART-RACE技术成功从假密环菌中克隆出了阿拉伯糖苷酶基因的全长cDNA,用生物信息学的方法对所获的序列进行信息学分析.分析结果显示其全长cDNA为1 016 bp,其最长的开放阅读框架为924 bp,编码307个氨基酸,该全长cDNA序列与多形拟杆菌的阿拉伯糖苷酶序列具有较高同源性,80~279位氨基酸序列属于阿拉伯糖苷酶超家族,58~184位氨基酸是一个典型的结构功能域,蛋白分子质量预测为32 881 u,等电点为4.59.构建重组质粒pPIC9-AF,并在毕赤酵母菌GS115中对所获得的基因进行了表达,相对酶活达到了81.25%.; 谢春芳黄辉姚冬生刘大岭梁郁强; 关键词：阿拉伯糖苷酶生物信息学

重组阿拉伯糖苷酶在毕赤酵母中的分泌表达及其活性分析被引量：2: 2006年; 假密环菌是一种果树腐病菌,具有较强的分解代谢纤维素的能力。根据已克隆出的阿拉伯糖苷酶基因序列(Accession Number AJ620046)设计引物从假密环菌的mRNA中克隆出阿拉伯糖苷酶的ORF片段,构建重组质粒pPIC9-AF,与组氨酸标签融合,电转化毕赤酵母菌GS115并进行诱导表达。所得到的重组阿拉伯糖苷酶在30-35℃时有较高的酶活,最适反应活性pH值在 6．0～8．0之间,而在pH4．0～8．0范围内酶活基本保持在80％以上,比大多已报道的阿拉伯糖苷酶最适pH范围宽。对于高效表达重组阿拉伯糖苷酶以及对其进一步的酶学性质研究提供了良好的基础。; 姚冬生谭慧媚黄辉刘大岭谢春芳

假密环菌cDNA文库的构建及其阿拉伯糖苷酶基因的克隆(英文)被引量：6: 2005年; 用SMART技术构建了载体为λTriplEx2的假密环菌的表达型cDNA文库。文库滴度为1.0×106pfu/ml,重组率约为98.3%,扩增后滴度为3.1×1 08pfu/ml,容量约为4.2×1010。从文库中随机挑选176个克隆进行5’端测序,得到147条表达序列标签(EST),并将测序结果提交到EMBL数据库。随机测序结果表明:插入片段长度均在200-800之间。测序结果经过生物信息学分析,发现有43 条序列与已知序列有明显同源性,其中序列AJ620046与多形拟杆菌的阿拉伯糖苷酶序列有很高的序列一致性。用SMART-RACE技术成功获得了AJ620046的全长cDNA,克隆了AJ620046的开放阅读框AF,并成功构建了重组质粒pHIL-S1-AF,在毕赤酵母菌中进行了初步表达。; 姚冬生黄辉赵龙谢春芳刘大岭; 关键词：CDNA文库阿拉伯糖苷酶基因克隆 SMART技术基因表达

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黄辉