刘玲玲
- 作品数：17 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 不同疾病阶段多发性骨髓瘤患者的疑难配血与解决策略被引量：1
- 2022年
- 目的探讨不同疾病阶段多发性骨髓瘤(MM)患者的疑难配血及解决策略。方法对1名首诊MM、拟输血患者的血液采用微柱凝胶法、试管法与献血者的血液做交叉配血,对于主侧凝集者,取患者的血浆采用凝聚胺法及患者血浆稀释后采用微柱凝胶法再与献血者悬浮红细胞做交叉配血;对1名复发难治MM、拟输血患者的血液采用微柱凝胶法与献血者的血液做交叉配血试验。结果(1)病例1:为首诊MM患者,采用微柱凝胶法患者血液与2名献血者血液交叉配血的主侧均呈细线状凝集,试管法配血主侧同样凝集--显微镜下凝集呈缗钱状;接着用凝聚胺法及患者血浆稀释后用微柱凝胶法和上述2名献血者的血液再次配血:患者血液与献血者血液的交叉配血相合。(2)病例2:诊断为复发难治的MM,用微柱凝胶法患者血液与2名献血者血液交叉配血的主次侧均呈颗粒状凝集;针对患者在使用达雷妥尤单抗(CD38单抗)治疗,以二硫苏糖醇(DTT)处理献血者红细胞后,再用微柱凝胶法与患者的血浆交叉配血,结果配得相合的悬浮红细胞。结论凝聚胺法和患者血浆稀释后微柱凝胶法交叉配血适用于初诊MM的配血;对于CD38单抗治疗的MM患者,加做DTT法即可消除药物对其交叉配血的影响。
- 陆英冯宝莹徐丽娟赖培斌刘玲玲罗广平袁青
- 关键词：多发性骨髓瘤凝聚胺法微柱凝胶法
- 地西他滨对伊马替尼耐药细胞株KBM5-T315I的增殖抑制及诱导凋亡作用研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨地西他滨对伊马替尼耐药细胞株KBM5-T315I的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法应用细胞增殖及毒性检测法(新型四唑单钠盐法)观察不同浓度(0～40μmol/L)地西他滨作用于KBM5-T315I细胞24、48及72h后的细胞增殖活力变化,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术观察不同浓度地西他滨对KBM5-T315I处理24h后的细胞凋亡率,JC-1法检测细胞线粒体膜电位的变化,Western blot检测cleaved PARP的变化。结果地西他滨可显著抑制KBM5-T315I细胞生长,显示出明显的量-效与时-效关系。随着地西他滨药物浓度增加,KBM5-T315I细胞株凋亡率逐渐升高,线粒体膜电位逐渐下降,cleaved PARP表达水平显著上升。结论地西他滨能抑制KBM5-T315I细胞的生长及诱导其凋亡,从而为治疗伊马替尼耐药慢性粒细胞白血病提供实验依据。
- 徐东藩方志刚翟凤仙刘玲玲林东军
- 关键词：慢性粒细胞白血病地西他滨细胞凋亡
- 上调c-myc基因的表达对U937白血病细胞的影响被引量：5
- 2013年
- 目的:构建稳定表达外源c-myc基因的人单核细胞白血病细胞株U937,并初步分析其特性。方法:首先构建重组质粒MSCV-c-myc-IRES-GFP(MMIG)载体,分别用MMIG及空载体MSCV-IRES-GFP(MIG)包装病毒,并感染U937细胞,用流式细胞术分选绿色荧光细胞,获得U937/GFP和U937/MYC细胞,用荧光显微镜及流式细胞术检测GFP阳性率,用Western blotting测定细胞中c-Myc、survivin、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和Bcl-2的蛋白表达水平,流式细胞术检测U937/GFP和U937/MYC细胞周期,并用MTT法测定U937/GFP和U937/MYC细胞的生长情况,克隆形成实验检测克隆形成能力。结果:荧光显微镜观察,MIG和MMIG病毒感染后,2种细胞均表达绿色荧光蛋白;流式细胞术结果显示,MIG病毒感染的细胞荧光率为26.0%,MMIG病毒感染的细胞荧光率为27.7%;Western blotting的结果显示,c-Myc蛋白在MMIG病毒感染的细胞中表达水平升高。流式细胞术分选后,荧光显微镜观察可见绿色荧光蛋白表达明显增多,U937/GFP和U937/MYC细胞绿色荧光蛋白表达率分别达98.7%和93.7%。U937/MYC细胞中c-Myc蛋白表达较U937/GFP细胞显著升高,c-Myc蛋白下游的survivin表达增多,而凋亡相关蛋白XIAP及Bcl-2的表达则没有明显变化。细胞周期检测显示,U937/MYC细胞处于S期的细胞数增多。MTT实验结果显示,U937/MYC细胞的生长速率较U937/GFP细胞增快。U937/MYC细胞的克隆形成能力较U937/GFP细胞强。结论:成功构建了c-myc基因高表达的U937稳定细胞株U937/MYC。在U937/MYC细胞中,c-Myc及其下游的survivin表达明显上调,处于细胞周期S期的细胞数增多、细胞生长加快、克隆形成能力增强,提示c-Myc可能通过增强自我更新能力、加快细胞周期、促进相关抗凋亡蛋白表达从而提高细胞的存活率。
- 潘晓娜方志刚龙梓洁陈家杰刘玲玲范蕊芳林东军
- 关键词：C-MYC蛋白U937细胞
- 稳定过表达外源p62/SQSTM1基因的U937白血病细胞株的建立及初步特性分析
- 2015年
- 【目的】构建稳定过表达外源p62/SQSTM1基因的人急性单核细胞白血病U937细胞株,并初步分析过表达p62基因对U937细胞的影响。【方法】首先在空载体MSCV-IRES-GFP(MIG)基础上构建重组质粒MSCV-p62-IRES-GFP(MPIG),分别用MIG及MPIG载体进行病毒包装,并感染U937细胞,用流式细胞分选仪分选出绿色荧光细胞,获得U937-GFP和U937-p62稳定细胞株,利用流式细胞仪及Western blot分别检测GFP细胞的阳性率及p62蛋白表达水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定U937-GFP和U937-p62细胞的生长情况,流式细胞术检测髓系细胞表面分化抗原CD11b和CD14的表达情况。【结果】荧光显微镜观察结果显示,MIG和MPIG病毒感染后,U937-GFP和U937-p62细胞均表达绿色荧光蛋白;经流式细胞仪分选后,U937-GFP和U937-p62细胞中GFP阳性表达率分别达98.5%和87.3%。Western blot的结果显示U937-p62细胞中p62蛋白表达较U937-GFP显著升高。MTT实验结果显示,与U937-GFP细胞相比,U937-p62细胞的生长速率加快。流式结果显示U937-GFP细胞和U937-p62细胞表达细胞表面分化抗原CD11b及CD14无明显差异。【结论】成功构建了p62基因过表达的U937稳定细胞株,过表达p62可促进U937细胞增殖,并不能促进U937细胞的分化。
- 刘玲玲范蕊芳赖文兴林东军
- 关键词：P62
- 62例骨髓增生异常综合征FAB和WHO分型及形态学特点被引量：1
- 2021年
- 目的分析骨髓增生异常综合征(MDS)的FAB和世界卫生组织(WHO)标准的分型特点,了解其病态造血特点,对MDS的分型及细胞形态学有进一步的认识。方法对中山大学附属第三医院2017年至2021年确诊的62例MDS患者(男33例,女29例,中位年龄为62岁)标本,分别按FAB和WHO标准分型后进行细胞形态学观察,分析粒系、红系及巨核系的病态造血情况。结果通过对62例MDS标本的细胞形态学分析,得出MDS的重要病态造血特征:粒系为颗粒减少或缺失、Pelger-Huet畸形,红系为奇数核及核间桥,巨核系为淋巴样小巨核细胞。WHO分型更符合实际情况的需要。结论FAB及WHO分型标准对MDS病态造血特征的观察有重要的指导意义。
- 蔡晓虹冯达娜赖文兴刘玲玲
- 关键词：骨髓增生异常综合征FAB分型WHO分型
- 噬血细胞综合征的实验室诊断与临床分析被引量：1
- 2021年
- 目的探讨噬血细胞综合征的临床特点和实验室检查对诊断噬血细胞综合征的临床应用价值。方法回顾性分析15例噬血细胞综合征患者的临床特点和实验室检查结果。结果15例患者均有发热和不同程度的肝、脾、淋巴结肿大,实验室指标以血清铁蛋白≥500μg/L(100%),两系以上血细胞减少(87%)最常见。结论噬血细胞综合征的实验室指标及临床特点具有一定的特异性,为临床诊断提供可靠的依据。
- 蔡晓虹陈玉婵赖文兴刘玲玲
- 关键词：噬血细胞综合征
- mTOR抑制剂增强Aurora抑制剂对急性髓系白血病细胞的杀伤作用
- 目的：探讨mTOR抑制剂对Aurora激酶抑制剂诱导的多倍体细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法：细胞增殖及毒性检测法(新型四唑单钠盐法)观察急性髓系白血病细胞株(U937、NB4、KG1a和HL-60)增殖活力的变化；葡...
- 刘玲玲龙梓洁刘强林东军
- 关键词：急性髓系白血病MTORAURORA激酶
- 思维导图在住院医师规范化培训问诊临床思维能力培养中的应用研究被引量：1
- 2023年
- 目的 探讨在住院医师规范化培训问诊临床思维能力培养中开展思维导图教学的效果。方法 选取2020—2021年在中山大学附属第三医院内科基地参加住院医师规范化培训的75名规培住院医师作为研究对象,并随机分配到实验组和对照组,实验组采用思维导图的教学方法,对照组采用传统教学方法,通过结构化问诊考核由两名教师进行教学评价。结果 实验组结构化问诊考核成绩[(83.89±6.13)分]优于对照组[(71.86±7.21)分],差异有统计学意义(t=7.79,P<0.001)。结论 基于思维导图训练的问诊教学方式可提高住院医师的问诊考核成绩,在一定程度上提高规培医师的临床思维能力。
- 涂柳丹姚瑶刘玲玲赵敏菁赵云跃王敏林倍思邵晓琼李瑭温景芸
- 关键词：思维导图住院医师问诊临床思维
- 唑来膦酸抑制U937细胞增殖及诱导凋亡被引量：2
- 2016年
- 目的:研究唑来膦酸(ZOL)对人类急性髓系白血病细胞U937的增殖抑制及促凋亡作用。方法:CCK-8法检测不同时间ZOL对U937细胞的生长抑制率;流式细胞术检测ZOL对U937细胞周期的影响;Annexin V-PI法及Hoechst 33342法检测ZOL作用前后细胞凋亡情况变化,JC-1检测ZOL对U937细胞线粒体膜电位变化的影响;克隆形成实验检测U937细胞克隆形成能力;Western blot法检测ZOL对U937细胞周期和凋亡相关蛋白的变化。结果:CCK-8结果显示ZOL可以抑制U937细胞的活力,并呈时间-剂量依赖性;Annexin V-PI及Hoechst33342结果显示ZOL可以促进U937细胞凋亡,且呈时间-剂量依赖性;JC-1结果显示ZOL可以明显降低U937细胞线粒体膜电位;PI法证实ZOL将U937细胞周期阻滞在S期,克隆形成实验证实0.2 mmol/L ZOL可以完全抑制U937细胞的克隆形成能力;Western blot结果显示ZOL作用于U937细胞48 h后细胞周期相关蛋白p21表达显著增强,促凋亡蛋白Bax表达增强,抑凋亡蛋白Bcl-2表达明显减弱。结论:ZOL抑制U937细胞的增殖和克隆形成主要是由于抑制了细胞周期相关蛋白表达,同时ZOL可以促进U937细胞凋亡,这种作用主要是通过调节线粒体凋亡途径相关蛋白来实现的。
- 范蕊芳刘玲玲张玲郭小燕王晓珍林东军
- 关键词：唑来膦酸U937细胞细胞周期
- 塞来昔布减低HL-60和HL-60A细胞活力、诱导凋亡及抑制自噬被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨塞来昔布对急性髓细胞白血病(AML)HL-60细胞和HL-60A细胞的活力、凋亡及自噬的影响。方法:用不同浓度的(0、20、40、60、80和100μmol/L)塞来昔布作用于HL-60细胞和HL-60A细胞,24h、48h和72h后用MTT法检测细胞活力。用流式细胞术检测塞来昔布作用HL-60细胞和HL-60A细胞24 h后的凋亡率。用Western blot法检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved PARP,自噬相关蛋白LC3、P62,以及mTOR信号途径相关蛋白。结果:塞来昔布作用于HL-60细胞24h、48h和72h的IC_(50)分别为49.4μmol/L、32.0μmol/L和25.1μmol/L,对于HL-60A细胞,相应的IC_(50)分别是69.1μmol/L、42.5μmol/L和29.6μmol/L。塞来昔布作用24h后,流式细胞术检测显示HL-60细胞中Annexin-V^+PI^-、Annexin-V^+PI^+及Annexin-V^-PI^+细胞的比例增多;HL-60A细胞中Annexin-V^+PI^-及Annexin-V^+PI^+细胞的比例增多。Western blot实验结果显示塞来昔布作用后,cleaved caspase-3和cleaved PARP的蛋白水平增高,提示该凋亡作用是通过caspase途径的。自噬相关蛋白LC3Ⅱ及P62的表达均增加,mTOR、p-mTOR以及下游的4-EBP、p-4-EBP的蛋白水平没有变化,说明塞来昔布能够抑制AML细胞自噬,该作用与mTOR途径无关。结论:塞来昔布对HL-60细胞和HL-60A细胞活力的抑制作用呈浓度以及时间依赖性,该作用与塞来昔布诱导细胞凋亡及坏死有关。塞来昔布能够通过非mTOR依赖途径抑制AML细胞自噬,有望联合应用于AML的治疗,有助于增强某些引起保护性自噬的化疗药物的细胞毒作用。
- 陆英刘相富刘玲玲林哲生陈玉婵冯宝莹张祥忠
- 关键词：塞来昔布急性髓细胞白血病自噬
