向贇 作品数:36 被引量:253 H指数:10 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 湖北省自然科学基金 国家自然科学基金 国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
儿童血培养规范化标本采集的中国专家共识 被引量:15 2020年 本共识由中国医师协会检验医师分会儿科疾病检验医学专家委员会(以下简称"专委会")组织来自全国40家儿童医院及妇幼保健院检验专家共同编制。前期专委会在来自全国的240家医院(三级医院占86%)发放调查问卷384份,收集到被调研医院的日均血培养量、采集血培养前操作流程、儿科血培养采集的时机以及采集的血培养瓶/套数等信息。在汇总问卷信息、了解目前我国儿童血培养采集现状的基础上,专委会查阅国内外相关指南、标准和文献,充分咨询微生物检验专家、儿科感染相关专业临床及护理专家,结合我国儿科临床现状,先后4次组织专家讨论与修订,完善儿童血培养采集的临床指征、明确儿童血培养采集规范,最终形成了共识文本。本共识为儿科临床血培养规范化采集提供了参考依据,为进一步提高儿科血流感染诊治能力奠定基础。 无 宋文琪 董方 李启亮 王艳 张泓 向贇 李贵霞 赵锐 莫丽亚 潘秋辉关键词:血培养 血样采集 儿童 环介导等温扩增技术快速检测呼吸道博卡病毒 2013年 目的:建立一种检测呼吸道博卡病毒的环介导等温扩增方法(LAMP)。方法:通过博卡病毒NP1基因特异性序列的6个位点设计4条LAMP引物,建立LAMP检测体系。并对60例疑感染者的咽试子,同时采用实时荧光定量PCR和LAMP方法进行博卡病毒核酸的检测。结果:通过凝胶电泳能观察到LAMP方法扩增引物的存在,且采用此体系的检测60份咽试子中8份阳性反应和实时荧光定量PCR检测结果一致。结论:博卡病毒核酸的LAMP检测方法快速、简单、特异、灵敏、成本低,对实验仪器设备要求不高,适用于基层医疗机构临床检测和现场快速诊断。 闫明哲 向贇 胡适可 张家云 汤行春 艾洪武关键词:环介导等温扩增技术 博卡病毒 实时荧光定量PCR ZW10相互作用着丝粒蛋白对神经母细胞瘤增殖的影响及机制研究 2023年 目的:探讨ZW10相互作用着丝粒蛋白(ZW10 interacting kinetochore protein,ZWINT)对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞增殖的影响及作用机制。方法:利用NB数据集分析ZWINT表达水平与NB预后及临床分期的关系。EdU实验、流式细胞术和γH2AX免疫荧光染色分别检测干扰ZWINT表达对NB细胞增殖、周期分布和DNA损伤修复能力的影响。免疫组织化学/蛋白质印记(Western blot)检测MYCN扩增和无扩增组织及细胞系中ZWINT的表达情况。荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测干扰/过表达MYCN对ZWINT表达的影响。在线预测ZWINT的启动子区域MYCN的结合位点,ChIP-PCR和荧光素酶实验验证MYCN靶向调控ZWINT表达。强力霉素诱导Tet-on MYCN SH-SY-5Y细胞过表达MYCN同时干扰ZWINT表达,检测ZWINT对MYCN介导的细胞增殖、周期和DNA损伤修复功能的影响。结果:ZWINT表达水平与NB患儿总生存率、无事件生存率呈负相关,其表达随NB分期升高而增高。ZWINT干扰组NB细胞增殖明显减少,G_(2)/M期细胞比例显著增高,γH2AX焦点的形成增加。ZWINT在MYCN扩增的NB组织/细胞系中表达水平显著高于无扩增组。MYCN与ZWINT启动子区结合,干扰ZWINT表达可显著抑制MYCN对增殖的促进作用。结论:ZWINT是NB的不良预后指标,其表达受MYCN调控,干扰ZWINT表达导致MYCN扩增的NB细胞周期阻滞在G2/M期,DNA损伤修复增加,抑制NB细胞的增殖。 袁文 蔡秦真 王军 庹文彬 向贇 袁纯辉关键词:神经母细胞瘤 增殖 细胞周期 致儿童下呼吸道感染肺炎链球菌分离株的临床特征及药敏分析 被引量:15 2013年 目的分析下呼吸道感染患儿肺炎链球菌(SP)分离株的临床特征及其对常用抗生素的药敏情况,为临床合理用药提供依据。方法采用回顾性分析法,收集2008年1月到2012年12月自下呼吸道感染患儿分离的SP 6 358株,采用纸片扩散法及E-test法进行抗菌药物敏感试验;按CLSI判断标准分析药敏结果。结果 SP分离株主要来自于儿内科各专业科室,感染病例以各类肺炎和支气管炎为主。在分离的6 358株SP中,青霉素、头孢噻肟、红霉素、克林霉素、复方新诺明、四环素、氯霉素、左氧氟沙星、万古霉素的耐药率分别为5.0%、12.9%、98.7%、96.0%、92.2%、7.3%、5.6%、0.2%、0.0%;青霉素与头孢噻肟的年耐药率差异均有统计学意义(P均<0.05)。318株耐青霉素SP对上述药物的耐药率分别为100.0%、42.6%、100.0%、100.0%、99.2%、23.6%、6.8%、0.6%、0.0%,青霉素与头孢噻肟间比较,耐药率差异有统计学意义(P=0.001)。结论下呼吸道感染患儿分离的SP对红霉素、克林霉素、复方新诺明及四环素的耐药率较高,对头孢噻肟的耐药率呈逐年递增的趋势,临床应依据药敏结果选择合适的抗菌药物。 向贇 王瑞耕 张振 刘新文 许敬关键词:肺炎链球菌 下呼吸道感染 耐药率 儿童 结核分枝杆菌PE_PGRS60蛋白通过JNK-COX2轴促进炎症的研究 被引量:3 2021年 目的探究PE_PGRS60蛋白在结核分枝杆菌感染致病中的潜在作用机制。方法用克隆并纯化的PE_PGRS60蛋白刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞,qRT-PCR和Western blot检测环氧合酶2(cyclooxygenase 2,COX2)mRNA和蛋白质表达。筛选可能调控COX2表达的信号通路,并用ELISA检测PE_PGRS60诱导的炎性细胞因子表达,乳酸脱氢酶试验和碘化丙啶(PI)染色,流式细胞术观察细胞死亡情况。Western blot检测活动性肺结核患者的外周血单个核细胞(PBMC)中COX2表达情况。结果克隆纯化的结核分枝杆菌PE_PGRS60蛋白促进RAW264.7细胞中COX2的显著表达,并活化了MAPK家族的3个主要成员即细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)、p38和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK),但只有JNK的抑制剂JNK-IN-7可阻断PE_PGRS60诱导的COX2上调。后续研究发现,COX2在活动性肺结核患者PBMC中的表达也升高。COX2抑制剂塞来昔布可有效阻断PE_PGRS60诱导的炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-6表达,并促进巨噬细胞死亡。结论PE_PGRS60可通过激活JNK/COX2信号轴,促进巨噬细胞释放炎症因子,在COX2的阻止下仍有部分巨噬细胞发生死亡。 沈芯 蔡秦真 孙娜 王军 邬欢 袁纯辉 向贇关键词:结核分枝杆菌 JNK COX2 武汉儿童医院就诊儿童群体乙型肝炎病毒血清标志物检测分析 被引量:2 2022年 目的了解武汉地区儿童群体乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染现状,分析其血清标志物表达模式及分布特征。方法采用电化学发光免疫分析技术对武汉儿童医院住院、门诊以及体检的67027例0d~18岁儿童HBsA、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb五项血清标志物进行检测,使用SPSS 24.0统计软件对检测结果分年龄段和性别进行统计分析。结果所有67027名儿童"全阴性"检出率为18.98%,HBcAb阳性率男女比较差异有统计学意义;0~28d及1~12月组有较高的HBcAb阳性率,1岁以后显著降低,1~14岁HBcAb阳性率为5.02%,而15~18岁略有升高。HBsAb阳性儿童中,1~2岁组HBsAb阳性率达峰值95.65%,6~14岁组最低68.90%,至15岁以前呈逐渐下降趋势。HBsAb浓度≥100 IU/L儿童中,以1~2岁组人数占比最高(76.99%),6~14岁组占比最低(40.99%)。共检出HBV血清标志物表达模式20种,占比≥1.00%的分别为"单HBsAb+","全阴性","HBsAb+/HBcAb+","HBsAb+/HBeAb+/HBcAb+"检出率分别为71.40%、18.98%、4.80%和4.20%。其中不常见表达模式11种,新生儿组检出不常见模式9种,检出率为1.21%,高于其他各年龄组。所有血清学模式中,仅"单项HBcAb+"检出率不同性别之间比较差异有统计学意义。结论武汉地区0~18岁儿童群体各年龄段HBV感染率较低;"单HBsAb+"为主要的血清学模式,HBsAb浓度分布多位于100~999IU/L,同时存在较高的"全阴性"检出率,学龄期儿童应补种乙肝疫苗,可能有利于降低感染风险。 黄永国 孙红 向贇关键词:儿童 乙型肝炎病毒 血清学标志物 电化学发光免疫法 中国儿童全血C反应蛋白检测系统性能评价标准建立专家共识 被引量:5 2021年 C反应蛋白(CRP)是感染性疾病的辅助诊断指标之一。测定CRP的标本类型已不局限于血清,全血CRP检测在各级医疗机构,特别是妇幼保健机构、儿童医院已广泛开展。全血CRP检测设备品牌众多,但尚无相关检测系统的性能评价标准;中国妇幼保健协会临床诊断与实验医学分会根据26家妇幼保健机构和儿童医院的研究结果,制定了"中国儿童全血C反应蛋白检测系统性能评价标准建立专家共识",旨在通过分析全血CRP检测系统的性能状况,结合临床需求、生物学变异、行业标准,进一步明确全血CRP检测系统性能评价要求,以保证检测质量。 中国妇幼保健协会临床诊断与实验医学分会 潘秋辉 向贇 马丽娟 佘尚扬 莫丽亚 叶辉铭 郑磊关键词:全血 C反应蛋白 性能评价 宫颈癌患者宫颈上皮细胞中硫氧还蛋白2的表达水平及临床意义分析 被引量:4 2021年 目的探讨宫颈癌患者宫颈上皮细胞中硫氧还蛋白2(thioredoxin,Trx2)相对表达水平及临床意义。方法选取2018年8月至2019年12月在武汉市妇幼保健院经病理学确诊的宫颈癌患者32例、子宫颈上皮瘤样变患者39例及健康人对照者30例的宫颈刷片组织,分别采用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)法检测宫颈上皮细胞标本中Trx2的表达状况,并分析宫颈癌患者不同临床病例特征下Trx2表达水平的差异。结果宫颈癌组Trx2水平(251.62±43.77)比子宫颈上皮瘤样变组(443.18±57.53)和健康人对照组(668.44±50.61)显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Trx2表达水平与宫颈癌患者年龄、组织学类型及肿瘤大小无关(P>0.05),而与肿瘤分化程度、是否存在淋巴结转移及FIGO分期密切相关(P<0.05)。结论宫颈癌患者宫颈上皮细胞中Trx2表达显著降低,与宫颈癌进展、分化程度有关,Trx2可能在宫颈癌进展中发挥重要作用。 王军 袁纯辉 孙红 向贇关键词:宫颈上皮细胞 宫颈癌 高危型人乳头瘤病毒16 E6蛋白通过外泌体传递热休克蛋白70调控巨噬细胞介导宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移 被引量:10 2020年 目的初步探讨高危型人乳头瘤病毒16(human papillomavirus 16,HPV16)E6蛋白促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的潜在免疫调控分子机制。方法构建HPV16 E6蛋白过表达慢病毒并感染C33A细胞,获得C33A-E6稳定细胞系,采用qRT-PCR和Western blot法检测C33A和C33A-E6组细胞内HSP70的表达。放线菌素D(ActD)和放线菌酮(CHX)处理细胞后不同时间采用qRT-PCR和Western blot法分别检测HSP70 mRNA和蛋白质降解速率。超速离心法提取两组细胞外泌体,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外泌体中HSP70含量。提取C33A和C33A-E6细胞干扰HSP70表达后的外泌体,ELISA检测经外泌体处理的THP-1细胞培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的表达水平。将外泌体处理的THP-1细胞与C33A细胞共培养,CCK-8法检测C33A细胞增殖。Transwell小室评估C33A细胞侵袭和迁移状态。结果与C33A细胞相比,C33A-E6细胞HSP70 mRNA水平显著增高(P<0.05),但蛋白质水平没有明显变化(P>0.05)。经ActD/CHX处理不同时间的两组细胞中HSP70 mRNA和蛋白质降解速率差异无统计学意义(P>0.05),但C33A-E6组分泌的外泌体中HSP70含量明显增高(P<0.001)。C33A-E6细胞分泌的外泌体可增强THP-1细胞分泌IL-6、TNF-α和IL-10的水平(P<0.001),并且外泌体处理后的THP-1细胞可促进C33A细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.001);而干扰C33A-E6细胞中HSP70的表达可显著降低外泌体诱导的THP-1细胞分泌IL-6和IL-10及THP-1细胞对C33A细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用(P<0.001)。结论高危型HPV16 E6蛋白可上调宫颈癌细胞外泌体中HSP70的表达,进而促进巨噬细胞分泌IL-6和IL-10,并介导宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。 王军 袁纯辉 孙红 向贇 肖晗关键词:宫颈癌 巨噬细胞 幽门螺杆菌尿素酶B通过与TLR2结合负向调控巨噬细胞免疫功能 2021年 目的尿素酶B(UreB)是幽门螺杆菌疫苗设计的重点候选抗原,本研究拟探究UreB对巨噬细胞的免疫调控作用及潜在机制。方法用重组UreB蛋白刺激小鼠骨髓来源M0型巨噬细胞,经流式细胞术和ELISA检测巨噬细胞凋亡、极化和抗原提呈分子表达;共培养试验、CFSE和流式细胞术检测CD4+T细胞增殖及IFN-γ表达水平。构建UreB截短体,NanoBiT和免疫共沉淀检测UreB与TLR2结合表位。结果UreB可诱导巨噬细胞凋亡并逆转脂多糖诱导的巨噬细胞M1型极化,促进巨噬细胞向M2型极化。同时,UreB也能抑制巨噬细胞抗原提呈分子MHCⅡ和CD86的表达,并进而抑制CD4+T细胞增殖和IFN-γ表达。分子机制研究表明UreB主要依赖于C端7个氨基酸残基与TLR2结合发挥以上调控作用。结论本研究证实UreB可通过C端7个氨基酸残基与TLR2结合发挥免疫负调控功能,有助于以UreB为基础的幽门螺杆菌疫苗设计及优化。 李智超 沈芯 袁纯辉 王军 向贇 蔡秦真关键词:尿素酶B 巨噬细胞 抗原提呈