吴乐
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金温州市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 癌胚抗原T、B细胞表位短肽诱导特异性体液免疫反应研究被引量：1
- 2012年
- 目的筛选癌胚抗原含T、B细胞表位的短肽并分析其诱导机体产生体液免疫的特性。方法利用免疫信息学方法预测CEA CTL表位,结合我们早期对CEA B表位预测的结果,选择含多个CTL表位肽和B表位肽的CEA氨基酸序列580～598处短肽作为目的基因。目的基因密码子优化后采用pET32a(+)原核表达系统表达融合蛋白,经SDS-PAGE和Western blot-ting鉴定融合蛋白的抗原性;经镍螯合亲和层析柱(Ni-NTA Agarose)纯化CEA580～598全长融合蛋白,纯化蛋白用佐剂乳化后经日本大耳白家兔背部皮下多点免疫注射,采用Western blotting检测血清抗体的特异性,采用ELISA法检测血清抗体水平及变化趋势。结果含多个T、B细胞表位的短CEA580～598在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量占总蛋白的25.6%;表达产物的相对分子质量(Mr)约21kDa,与预期Mr相符;Western blotting分析结果显示,在21kDa处出现特异性条带。日本大耳白兔经CEA580～598融合蛋白免疫后产生高水平的特异性抗体,与空载体和PBS对照组比较具有显著性差异(P<0.05),制备的免疫血清不但能特异识别CEA580～598短肽,而且能特异识别天然CEA抗原。结论 CEA580～598短肽融合蛋白具有较强的免疫原性,诱导的兔免疫血清能特异性结合CEA抗原,为基于CEA表位疫苗的研究奠定理论和实验基础。
- 陈江肖德双吴乐蒋佩佩邵欢义应江辉朱珊丽薛向阳张丽芳朱冠保
- 关键词：癌胚抗原ELISACTL
- 人类表皮生长因子受体2的B细胞表位初步预测分析被引量：2
- 2010年
- 目的预测人类表皮生长因子受体2(HER2/neu)的B细胞表位,为肿瘤免疫治疗提供理论基础。方法以生物信息学软件综合预测筛选HER2/neu可能B细胞表位,以吴氏平均抗原性指数为标准,确定目的表位。结果HER2/neu为一跨膜蛋白,其二级结构中以无规则卷曲的区域出现较多。其N端第497～504,939～943,1 106～1 116,1 140～1 158,1 166～1 175,1 225～1 234,1 240～1 246区段,可能为HER2/neu的优势B细胞表位。结论应用多参数预测HER2/neu的B细胞表位,可进一步为HER2/neu相关肿瘤治疗性表位疫苗分子设计和研究提供理论依据。
- 周珠哈王安吴乐朱珊丽朱冠保张丽芳
- 关键词：人类表皮生长因子受体2B细胞表位预测肿瘤疫苗
- 微小RNA-199a在胃癌中的表达及临床意义被引量：7
- 2011年
- 目的探讨miR-199a-3p和miR-199a-5p在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法提取32例胃癌及其癌旁正常胃黏膜组织标本的总RNA，采用茎环逆转录实时定量聚合酶链反应（PCR）方法检测miR-199a-3p和miR-199a-5p的表达量，并分析其与分化程度、淋巴结转移等临床病理特征的关系。结果与癌旁正常胃黏膜组织比较，miR-199a-3p和miR-199a-5p在癌组织中高表达（表达值中位数分别为2．07和1．97，P〈0．05），其中miR-199a-3p的表达与胃癌的淋巴结转移状态（P〈0．01）、肿瘤分化程度（P〈0．01）及TNM分期（P〈0．05）相关；miR-199a-Sp的表达与肿瘤分化程度（P〈0．01）及肿块部位相关（P〈0．05），ROC曲线分析显示，miR-199a-3p和miR-199a-5p评价胃癌细胞分化程度的特异性和敏感性均为71．4％和93．3％。结论miR-199a-3p和miR-199a-Sp在胃癌中的异常表达可能与胃癌的发生发展有关。
- 陈俊薛向阳吴乐朱冠保林巧爱沈贤
- 关键词：MIRNA胃癌细胞分化
- 癌胚抗原CEA168～183多表位肽的免疫原性研究
- 2012年
- 本研究旨在通过免疫信息学手段预测癌胚抗原（CEA）表位，选择富含T、B细胞免疫优势表位的短肽并对其免疫原性进行分析。
- 沈贤应江辉吴乐王鹏飞朱珊丽薛向阳张丽芳
- 关键词：免疫原性癌胚抗原表位肽
