张志玲
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胚胎成纤维细胞的培养及饲养层的制备被引量：2
- 2008年
- 目的从人胚胎躯干中分离、培养人胚胎成纤维细胞,建立人胚胎成纤维细胞饲养层用于人精原干细胞的培养。方法利用酶消化法从孕5～9周龄人胚胎躯干中分离培养人胚胎成纤维细胞,制作饲养层,使用不同浓度丝裂霉素C处理,以细胞形态、生长曲线作为胚胎成纤维细胞和饲养层的评价指标。结果从人胚胎中成功分离培养出人胚胎成纤维细胞,该细胞可传代15代以上,且经过传代及冷冻复苏后生物学特性无改变。12.5mg/L丝裂霉素C作用2h可达到较好处理效果。结论成功分离和培养人胚胎来源的成纤维细胞,用于人精原干细胞饲养层的制作。
- 王毓斌陈斌张志玲王颖超王鸿祥向祖琼卢永宁胡凯杨怡珂韩银发汪铮王益鑫黄翼然
- 关键词：成纤维细胞胚胎细胞培养技术
- 人胚胎成纤维细胞饲养层支持人精原干细胞的生长
- 2008年
- 目的:探讨人精原干细胞分离、纯化及以人胚胎成纤维细胞为饲养层培养的方法和条件。方法:利用两步酶法和Percoll不连续密度离心法分离、纯化人精原干细胞,在人胚胎成纤维细胞饲养层上培养;用免疫组织化学方法检测精原干细胞表面标志SSEA-1和OCT4;检测精原干细胞克隆碱性磷酸酶活性;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测精原干细胞相关基因的表达。结果:精原干细胞在人胚胎成纤维细胞饲养层上可以存活并增殖形成集落。集落未分化标志检测显示SSEA-l、OCT4呈阳性,碱性磷酸酶活性呈强阳性,并表达精原干细胞相关基因。结论:人胚胎成纤维细胞饲养层可以支持人精原干细胞的生长。
- 王毓斌陈斌王颖超张志玲王鸿祥卢永宁向祖琼胡凯杨怡珂韩银发汪铮王益鑫黄翼然
- 关键词：精原干细胞饲养层纯化细胞培养
