张新民
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院动物繁殖研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 水牛抑制素α亚基基因的克隆与原核表达被引量：5
- 2009年
- 采用RT-PCR方法从水牛卵巢总RNA中扩增抑制素α亚基基因,并克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切及测序鉴定。序列分析结果表明:水牛抑制素α亚基基因编码序列长为1083 bp,编码360个氨基酸,与牛、人、猪抑制素α亚基基因CDS成熟蛋白氨基酸的同源性分别为96%、80%、87%,表明抑制素α亚基是一组在进化上高度保守的蛋白质。将水牛抑制素α亚基基因CDS克隆到pET-30a表达载体中,转化宿主菌BL21(DE3)进行原核表达。在1 mmol/L IPTG中,37℃诱导表达4 h后抑制素α亚基基因重组蛋白可成功获得表达。将表达产物进行SDS-PAGE分析,结果表达产物主要以包涵体形式存在,分子质量约为40 ku。
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- 关键词：水牛原核表达
- Ghrelin对水牛体外受精和孤雌激活胚胎体外发育的影响被引量：6
- 2009年
- 本研究的目的是探讨Ghrelin对水牛体外受精和孤雌激活胚胎体外发育的影响。体外成熟的水牛卵母细胞经体外受精或离子霉素孤雌激活后,分别在含0,0.5,5,50和500μg/L Ghrelin的培养液中进行体外培养,观察各组胚胎的卵裂率和囊胚率。结果显示,在培养液中添加不同浓度的Ghrelin对体外受精和孤雌激活胚胎的卵裂率均无显著影响(P>0.05),但添加500μg/L的Ghrelin显著提高体外受精胚胎的囊胚发育率(33.5%vs 13.7%,P<0.05),50μg/L或500μg/L的Ghrelin均显著提高孤雌激活胚胎的囊胚发育率(32.4%和34.6%vs 14.5%,P<0.05)。结果表明,培养液中添加Ghrelin对胚胎的早期卵裂没有影响,但可促进水牛体外受精和孤雌激活胚胎囊胚的形成。
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- 关键词：GHRELIN水牛体外受精孤雌激活胚胎培养
- 水牛Ghrelin基因的克隆与序列分析
- 根据Gene Bank中公布的牛、人等物种的Ghrelin核苷酸序列设计合成一对引物，以水牛皱胃组织总RNA为模板，采用RT-PCR法，扩增出Ghrelin成熟蛋白编码cDNA序列，将此扩增产物克隆入pMD18-T载体，...
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- 关键词：生长激素核苷酸序列
- 文献传递
- 水牛Ghrelin基因的克隆与序列分析被引量：2
- 2009年
- 根据GenBank中公布的牛、人等物种的Ghrelin核苷酸序列设计合成一对引物,以水牛皱胃组织总RNA为模板,采用RT-PCR法,扩增出Ghrelin成熟蛋白编码cDNA序列,将此扩增产物克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切鉴定及序列测定与分析。结果表明,扩增的水牛Ghre-lin基因编码序列长为351 bp,编码116个氨基酸。同源性分析表明,水牛Ghrelin基因与牛、人、猪、小鼠及绵羊基因相应序列的同源性分别为97%、79%、81%、75%和95%,氨基酸同源性与牛、羊、人、猪、小鼠分别为96%,94%,73%,76%和75%,说明Ghrelin是一组在进化上高度保守的蛋白质。水牛Ghrelin成熟蛋白cDNA的成功克隆,为进一步研究水牛Ghrelin基因结构、基因表达与调控奠定了基础。
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- 关键词：GHRELIN水牛
