张时良
- 作品数：8 被引量：61H指数：3
- 供职机构：无锡市传染病医院更多>>
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- 应用PCR-LDR法检测乙型肝炎病毒核苷类药物耐药多基因突变位点被引量：3
- 2013年
- 目的用多重聚合酶连接反应-连接酶检测反应分型法(PCR-LDR)同时检测乙型肝炎病毒(HBV)的180、181、184、204、236、250位点突变。方法以50例慢性乙型肝炎患者血清中HBV的DNA为模板,获得PCR-LDR反应探针连接产物,用ABI 3130Sequencer进行检测分析。结果共检测出拉米夫定耐药突变8例(16%)、阿德福韦耐药突变5例(10%),恩替卡韦耐药突变1例(2%),拉米夫定和阿德福韦同时耐药突变1例(2%),突变情况与直接测序法检测的结果完全一致。结论用PCR-LDR法可以快速检测HBV基因的已知位点突变,与直接测序等其他方法相比具有更简单、方便、快捷的优势,有利于临床医生早期发现乙肝病人的耐药情况并及时更改治疗方案。
- 张时良裴豪戴亚新陆炯
- 关键词：乙型肝炎病毒核苷类药物耐药
- 病毒性肝炎血浆内毒素测定及临床意义
- 2011年
- 病毒性肝炎发病率7-8%,一旦演变为肝硬化和重症肝炎死亡率较高。病毒性肝炎尤其是重症肝炎肝脏枯否细胞功能下降,清除能力下降,因而对内毒素及内毒素免疫复合物的清除减少,易发生内毒素血症。为了了解血浆内毒素在各型病毒性肝炎患者中的表现,本文对30例正常对照。
- 戴亚新蒯守刚刘君王旭张时良
- 关键词：病毒性肝炎患者血浆内毒素重症肝炎免疫复合物细胞功能
- 磁珠法在抗酸杆菌快速检测中可行性的研究被引量：3
- 2013年
- 目的通过与BD960快速液体培养法、离心沉淀法的比较来评价磁珠法这一检测手段的优缺点和可行性。方法采用磁珠法检测108例痰液标本,并与BD960快速液体培养法和离心沉淀法的平行检测结果相比较。结果 1)磁珠法和离心沉淀法仅需1天就可以得出结果,BD960快速液体培养法的阳性报告时间需要10.72±4.49天。2)磁珠法阳性占BD960快速液体培养法的88.8%(71/80)。3)离心沉淀法阴性的43例标本中磁珠法有6例标本为阳性,占离心沉淀法阴性标本的14.0%(6/43),且磁珠法的浓集效果更好。结论磁珠法不仅操作简便、快速,其阳性率高,与BD960快速液体培养法有很高的可比性,适合结核诊断实验室的开展。
- 唐淼龙刘君裴豪陈燕燕蒯守刚张时良
- 关键词：磁珠法离心沉淀法结核分枝杆菌
- 亚胺培南耐药大肠埃希菌耐药基因型检测被引量：9
- 2011年
- 目的研究临床分离的2株亚胺培南耐药的大肠埃希菌分子耐药机制。方法通过琼脂稀释法检测亚胺培南耐药的大肠埃希菌对多种抗菌药物的敏感性,采用肠杆菌科基因间重复性一致序列(ERIC)-聚合酶链反应扩增分析(PCR)对耐药菌株进行同源性分析,采用特异性PCR和序列分析、接合试验、质粒提取和质粒消除试验检测耐药菌株的分子耐药机制。结果大肠埃希菌对包括碳青霉烯类和喹诺酮类在内的多种抗菌药物耐药,同源性分析显示2株菌株属于同一克隆型,PCR和序列分析显示耐药株菌携带KPC-2、qnrA、TEM-1和I类整合酶基因并且伴有外膜蛋白OmpK36基因的缺失,质粒提取和质粒消除试验证实KPC-2和I类整合酶基因定位于约54 kb质粒。结论大肠埃希菌中出现质粒型碳青霉烯酶基因KPC-2,并且同时携带其他耐药相关基因,表现为多重耐药,KPC-2合并外膜蛋白缺失是大肠埃希菌对碳青霉烯类耐药主要机制。
- 蒯守刚裴豪陈燕燕刘君张时良戴亚新
- 关键词：大肠埃希菌碳青霉烯类Β-内酰胺酶类耐药微生物敏感性试验
- ATP结合区外排泵基因Rv1217c-Rv1218c表达与结核分枝杆菌耐药的关系
- 2012年
- 目的探讨结核分枝杆菌（MTB）ATP结合区外排泵基因Rvl217c-Rvl218c的表达与耐药表型的关系。方法选择对利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇联合或单一耐药，对二线抗结核药物至少有一种以上耐药的MTB菌株24株和对上述4种一线药物和二线药物均敏感的菌株10株（全敏感组）。提取菌株RNA，反转录，实时RT—PCR方法检测ATP结合区外排泵基因Rvl217c、Rvl218c的表达量，采用t检验和Logistic回归分析法分析外排泵基因表达量在不同菌株耐药表型中的差异。结果与全敏感组（0．42±0．31）比较，Rvl217c基因表达量在耐利福平组（2．13±1．89，t=3．44，P〈0．01）、耐异烟肼组（1．84±1．86，t=3．16，P〈0．01）、耐链霉素组（1．86±1．96，t=2．78，P〈0．05）和耐乙胺丁醇组（3．36±2．35，t=3．04，P〈O．05）均升高，差异有统计学意义。与全敏感组（0．65±0．42）比较，Rvl218c基因表达量在耐利福平组（2．54±1．84，t=3．82，P〈0．01）、耐异烟肼组（2．34±1．84，t=3．72，P〈0．01）、耐链霉素组（2．15±1．86，t=3．01，P〈0．01）和耐乙胺丁醇组（3．78±1．78，t=4．22，P〈O．01）均升高，差异有统计学意义。耐多药组Rvl217c、Rvl218c基因表达量为2．74±2．07和3．33±1．77，高于多耐药组的0．79±0．47和1．03±0．79，差异有统计学意义（t=2．91，P〈0．05；t=3．84，P〈0．01）。Logistic回归分析显示，Rul217f基因高表达与利福平耐药呈正相关，但与Rvl218c基因高表达呈负相关（P〈0．01）；Rvl217c基因高表达与异烟肼耐药呈负相关，但与Rvl218c基因高表达呈正相关（P〈0．01）；两基因高表达与乙胺丁醇耐药均呈正相关（P〈0．01）；两基因高表达与耐多药呈正相关（P〈0．01）。链霉素耐药与两基因的表达无关（P〉0．05）。结论ATP结合区外排泵基因Rv1217rRul218f表达量与MTB对多种药物�
- 裴豪张时良刘君戴亚新黄飚王旭胡敏涛蒯守刚王柯
- 关键词：分枝杆菌结核抗药性抗结核药
- 肝癌和肝病患者血清甲胎蛋白异质体的检测及临床意义被引量：30
- 2013年
- 目的探讨甲胎蛋白异质体(AFP-L3)检测在肝癌鉴别诊断中的意义。方法应用微量离心柱法分离检测小扁豆凝集素结合型AFP-L3的含量,同时检测血清中AFP总含量,由此得出AFP-L3的百分含量(AFP-L3%)。结果以AFP-L3%>10%作为阳性判断标准,27例肝癌患者血清AFP-L3阳性率为70%,肝硬化和慢性肝炎AFP-L3%分别为10%和9.6%,肝癌AFP-L3%水平明显高于肝硬化和慢性肝炎(P<0.01);以AFP>25ng/ml作为阳性判断标准,肝癌、肝硬化和慢性肝炎患者血清中AFP阳性率分别为78%、60%和55%;以AFP、AFP-L3%作为诊断肝癌指标的灵敏度分别是78%、70%,特异度分别是43%、90%。结论 AFP-L3%能有效区分肝癌和慢性肝病,弥补肝癌诊断的不足,具有一定的临床实用价值。
- 戴亚新张时良裴豪
- 关键词：甲胎蛋白甲胎蛋白异质体肝癌
- 慢性乙肝患者血清铁蛋白与肝组织病理学的关系被引量：13
- 2006年
- 探讨慢性乙型肝炎(CHB)血清铁蛋白(serum ferritin,SF)含量与肝功能、肝纤维化指标及肝脏病理的关系。对140例行肝组织活检患者的血清标本进行SF、肝功能、肝纤维化指标检测。结果显示:CHB临床各型SF水平随着病程的进展逐渐升高,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。SF与肝组织病理分级、分期、肝纤维化指标及肝功能存在相关性。认为SF可作为肝脏组织病理损害的判断指标之一,检测SF有助于了解肝细胞受损程度。
- 裴豪陆忠华季瑞云钱金娟张时良
- 关键词：慢性乙型肝炎肝脏病理血清铁蛋白
- ABC外排泵基因Rv1747c在结核分枝杆菌中的表达与耐药相关性研究被引量：3
- 2011年
- 目的研究临床结核分枝杆菌中ABC外排泵基因Rv1747c的表达及与耐药性产生的关系,探讨临床结核分枝杆菌耐药的分子机制。方法采用SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法,检测ABC外排泵基因Rv1747c在临床结核分枝杆菌中的表达水平。结果 Rv1747c基因在临床耐药菌株的表达水平(1.30±1.02)高于敏感菌株的(0.70±0.59),但差异无统计学意义,Rv1747c基因在敏感株中无高表达,在耐药组中发生7株菌的高表达占29.2%,差异有统计学意义(P<0.05);在利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇耐药菌株中均出现Rv1747c基因的高表达。结论结核分枝杆菌临床分离株的耐药性与ABC外排泵基因Rv1747c的高表达相关;ABC外排泵基因的高表达可以使药物外排能力增加,从而导致耐药性产生。同时可能还有其他机制参与结核分枝杆菌耐药性的生成。
- 裴豪张时良刘君戴亚新黄飚王旭胡敏涛蒯守刚王柯
- 关键词：结核分枝杆菌外排泵耐药性
