张晓宁
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:山东大学医学院医学免疫学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 乙肝病毒核心蛋白真核表达载体的构建与表达被引量:1
- 2010年
- 目的构建2种包含乙肝病毒核心蛋白(HBc)基因的真核表达载体,检测其在人肝癌细胞系BEL7402中的表达。方法以质粒pUC19/3.0HBV作为模板,PCR扩增HBc基因,分别以pcDNA3.0和pEGFP-N1为母本,构建含HBc基因的真核表达载体pcDNA-HBc-HA及pEGFP-HBc。通过单、双酶切、PCR及DNA测序鉴定其正确性。利用脂质体将其分别转染入人肝癌细胞系BEL7402,并采用RT-PCR、Western blot及荧光显微镜观察的方法,分别检测其mRNA、蛋白质水平的表达。结果获得与预期分子量大小一致的DNA片段,转染2种质粒的BEL7402细胞均可高水平表达HBc mRNA,而空载体转染组则无表达,转染pEGFP-HBc转染组及pEGFP-N1转染组,均有较强的绿色荧光表达,pcDNA-HBc-HA转染组细胞可检测到HBc-HA融合蛋白的表达。结论成功构建2种携载HBc基因的真核表达载体,并可在人肝癌细胞系BEL7402中有效表达。
- 赵培庆曲忠花盖潇潇张晓宁高立芬梁晓红
- 关键词:病毒核心蛋白质类基因表达
- 慢性乙型肝炎患者NK细胞中TIM-3的表达及其作用研究
- HBV感染引起的免疫功能低下或免疫耐受是慢乙肝发生发展的重要原因。已有多种研
- 鞠瑛侯楠张晓宁赵地刘莹朱法良高立芬马春红
- 文献传递