徐珏
- 作品数:6 被引量:3H指数:2
- 供职机构:浙江理工大学更多>>
- 发文基金:浙江省教育厅重点资助项目浙江省大学生科技成果推广项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生自动化与计算机技术经济管理更多>>
- 毕赤酵母表达的ACE-C结构域高效发酵及纯化工艺的研究
- 血管紧张素转化酶(ACE,EC3.4.15.1)是由两个独立的活性结构域(N结构域和C结构域)组成的一种单链蛋白,广泛存在于脊椎动物体内。ACE参与血管紧张素(AngⅡ)的生成和缓激肽(BK)的失活,对保持心血管稳态和血...
- 徐珏
- 关键词:毕赤酵母结构域蛋白降解纯化工艺血管紧张素转化酶药物筛选
- 人源血管紧张素转化酶C-结构域在毕赤酵母中的克隆表达方法
- 本发明涉及一种人源血管紧张素转化酶C-结构域在毕赤酵母中的克隆表达方法,PCR扩增人源血管紧张素转化酶C-催化结构域基因片段,克隆至分泌表达载体pPIC9K,转化毕赤酵母GS115,阳性克隆再次电转,用G418筛选高拷贝...
- 张因皎赵钰岚许传莲丁明徐珏房晓敏周志明
- 文献传递
- 人源血管紧张素转化酶-N结构域基因片段在毕赤酵母中的表达
- 2011年
- 利用RT-PCR方法从食管癌细胞TE-1中反转出cDNA,PCR扩增得到血管紧张素转化酶N结构域(ACE-N)基因片段,构建pPIC9K-ACE-N表达载体,转化毕赤酵母GS115,阳性克隆再次电转,并从转化菌株中筛选出多拷贝转化子进行表达。经Ni2+亲和层析柱对表达的蛋白进行纯化,获得的目的蛋白表达量为0.11 g/L,其纯度大于99%。为今后选择性抑制血管紧张素转化酶两个同源结构域的体外研究奠定基础。
- 徐辉徐珏陈成集丁明许传莲
- 关键词:RT-PCR毕赤酵母
- 基于Hadoop的企业营销系统销售预测的研究与实现
- 随着近年来互联网的发展与其在企业中的应用,不仅加速了各个新兴产业的发展,也为各个企业带来了机遇与挑战。企业拥有大量的营销数据和客户信息,这些信息的累积并对其挖掘为企业提供了有效的营销途径。随着时间的推移,企业的营销数据日...
- 徐珏
- 关键词:数据挖掘
- 文献传递
- 毕赤酵母高密度发酵表达血管紧张素转化酶C-结构域被引量:2
- 2010年
- 血管紧张素转化酶(ACE,EC3.4.15.1)在调节血压方面具有重要作用。研究证实,ACE的C结构域(ACE-C)是使血管紧张素I(AngI)分解的主要活性位点。在5L发酵罐中,对重组毕赤酵母表达ACEC-结构域的发酵工艺进行优化,探讨温度、pH、甲醇浓度等主要因素对重组蛋白表达量和酶活力的影响。结果表明,当工业培养基添加2%蛋白胨为氮源时,ACEC-结构域的降解现象得到了有效控制;采用诱导温度为26℃,pH5.5,甲醇含量为1.5%的表达条件,ACEC-结构域表达量和酶活力分别达到446mg/L和38.2U/ml,比活力达到86U/mg,是Sigma公司ACE标准品比活力的2倍,为大规模制备ACEC-结构域蛋白,筛选专一性更强的ACEC-结构域抑制剂奠定了基础。
- 徐珏许传莲杜方尧
- 关键词:毕赤酵母ACE蛋白降解
- 人源血管紧张素转化酶-C结构域在毕赤酵母中的表达被引量:2
- 2010年
- 血管紧张素转化酶(ACE,EC3.4.15.1)在调节血压方面具有重要作用,研究证实,ACE-C结构域是体内使血管紧张素I(AngI)分解的主要活性位点。PCR扩增ACE-C结构域基因片段,克隆至分泌表达载体pPIC9K,转化毕赤酵母GS115,阳性克隆再次电转,用G418筛选高拷贝的酵母菌落进行表达条件优化,获得0.5g/L的蛋白表达量及7.178U/mL的酶活力。经Ni+亲和层析纯化,获得纯度大于97%的目的蛋白。Captopril对酶的抑制试验证明ACE-C结构域可望成为新一代抗高血压药物ACE抑制剂筛选的理想酶靶。
- 赵钰岚徐珏许传莲
- 关键词:血管紧张素转化酶催化结构域毕赤酵母卡托普利