李国平
- 作品数：15 被引量：28H指数：3
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- 不同方式诱导白色脂肪组织棕色化过程中差异表达微小RNA及其潜在调控机制
- 2020年
- 目的探究不同刺激条件下,小鼠白色脂肪组织棕色化过程中差异表达的微小RNA(miRNAs),并分析其在棕色化过程中潜在的分子调控机制。方法构建小鼠腹股沟皮下白色脂肪组织棕色化模型,一组为低温刺激,另一组为腹腔注射CL316-243,通过HE染色和产热相关基因表达分析等,确定皮下白色脂肪组织棕色化模型的建立。通过RNA测序得到不同条件下皮下白色脂肪组织的miRNAs表达谱并筛选出两组内差异表达趋势相同的miRNAs,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证;通过生物信息学预测miRNAs靶基因,并通过qRT-PCR进一步验证其表达水平。结果冷刺激和CL316-243均能诱导皮下白色脂肪组织棕色化,同时皮下白色脂肪组织的miRNAs表达谱在诱导前后存在明显差异。经差异表达miRNA筛选后,检测不同白色脂肪组织棕色化诱导条件下,miR-30e-3p表达均升高,miR-181a-5p表达均下降。经靶基因预测及验证,Cdk6和Sirt1分别是miR-30e-3p和miR-181a-5p参与调控皮下白色脂肪组织棕色化的潜在靶点。结论冷刺激及CL316-243处理小鼠皮下白色脂肪组织棕色化后miRNA表达差异明显,其中miR-30e-3p和miR-181a-5p分别可能通过靶基因Cdk6和Sirt1参与调控皮下白色脂肪组织棕色化过程。
- 任航江韩亭亭潘麒羽满永戴大鹏黎健李国平
- 关键词：冷刺激微小RNA
- 树鼩载脂蛋白AV的原核表达纯化
- ：构建树鼩载脂蛋白AV原核表达载体并利用His标签纯化该蛋白.方法：从树鼩肝细胞中提取总RNA,经逆转录合成cDNA第一链.设计载脂蛋白AV特异性引物,含有6个保护碱基和XhoI和EcoRI酶切位点序列.以cDNA第一链...
- 王艳李国平满永王抒黎健
- 关键词：动物模型原核表达蛋白纯化
- 非编码RNA在白色脂肪组织棕色化中的研究进展被引量：3
- 2019年
- 机体内储存脂类的白色脂肪可在生理或药物条件刺激下,具有产热及能量消耗增加的棕色脂肪样功能,生成米色脂肪。白色脂肪组织棕色化能调节能量代谢稳态,可作为治疗肥胖症和代谢综合征等疾病的潜在靶点。影响白色脂肪组织棕色化的因素众多,其中具有调控功能的非编码RNA在该过程起重要作用。本文就近年非编码RNA在白色脂肪组织棕色化中的研究进展进行综述。
- 任航江胡蒙亮韩亭亭李国平
- 关键词：非编码RNA
- 肝脏胰岛素受体急性敲除对载脂蛋白B和三酰甘油分泌的影响
- 2013年
- 目的分析肝脏组织特异性的胰岛素信号急性缺失对载脂蛋白B和三酰甘油分泌的影响。方法应用Cre-LoxP系统原理，在重组酶基因的上游插入肝组织特异性白蛋白基因启动子，以此构建组织特异性表达的腺病毒。扩增纯化后的腺病毒经胰岛素受体Floxed小鼠尾静脉注射，分别在注射2d、4d和6d后收集小鼠血浆，测定新生载脂蛋白B和极低密度脂蛋白三酰甘油分泌速率，抽提肝脏脂质并用酶法检测脂质含量，并用免疫印迹法分析胰岛素受体和脂代谢相关蛋白在肝脏内的表达。结果小鼠在注射含重组酶的腺病毒2d、4d和6d后，胰岛素受体表达依次降低30．50％（P〈0．05）、60．12％（P〈0．01）和99．54％（P〈0．001），极低密度脂蛋白三酰甘油的分泌速率分别降低20．43％（P〈0．05）、33．63％（P〈0．05）和44．21％（P〈0．01）；下调了固醇调控结合蛋白1和脂肪酸合成酶以及极低密度脂蛋白形成相关蛋白的表达，但不影响新生载脂蛋白B100的分泌和肝脏脂质含量；而在含重组酶的腺病毒注射6d后新生载脂蛋白B48升高约35．07％（P〈0．05）。结论肝脏胰岛素信号急性缺失降低极低密度脂蛋白中三酰甘油的分泌速率并呈现时间依赖性，揭示小鼠肝脏分泌较小的极低密度脂蛋白颗粒，这种变化可能和肝脏内脂肪酸的合成速度下降有关。
- 李国平唐蔚青隋靖喆黎健陈保生
- 关键词：肝细胞脂蛋白类VLDL载脂蛋白B类
- 11β-羟基类固醇脱氢酶1型在代谢性疾病中的研究进展被引量：1
- 2021年
- 11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)是体内唯一能将无活性皮质酮转变成有活性皮质醇的酶,对调节局部组织中活性糖皮质激素水平至关重要。糖皮质激素失调已被证明与多种代谢性疾病如肥胖、2型糖尿病等密切相关,因此11β-HSD1可能是治疗代谢性疾病的潜在靶点。本文综述11β-HSD1的生物学功能及组织分布,讨论其参与肥胖、2型糖尿病、非酒精性脂肪肝病、高血压、肌少症的生理病理机制,并总结了11β-HSD1抑制剂的最新研究进展。
- 潘麒羽韩亭亭李国平
- 关键词：11Β-羟基类固醇脱氢酶1糖皮质激素类糖尿病2型脂肪肝
- 小鼠肝脏胰岛素受体的特异性敲除降低极低密度脂蛋白中三酰甘油分泌的研究被引量：2
- 2012年
- 目的:建立肝组织特异性胰岛素受体急性缺失的动物模型,分析胰岛素信号缺失对三酰甘油代谢的影响。方法:在构建腺病毒时,利用Cre-LoxP系统机制,在Cre重组酶基因的上游插入肝组织特异性表达的白蛋白基因启动子。扩增纯化病毒,经小鼠尾静脉注射病毒14 d后,收集小鼠血浆,测定极低密度脂蛋白三酰甘油分泌速率,抽提肝脏脂质并用酶法检测脂质含量,用免疫印迹法分析胰岛素受体和脂代谢相关基因在肝脏内的表达。结果:成功构建了肝脏特异性胰岛素受体急性缺失动物模型。胰岛素信号缺失显著降低了小鼠肝脏的极低密度脂蛋白三酰甘油的分泌速度,同时也下调了肝脏脂肪酸合成相关基因和极低密度脂蛋白形成相关基因的表达。结论:肝脏胰岛素信号急性缺失降低极低密度脂蛋白中三酰甘油的分泌速度,这种变化可能和肝脏内脂肪酸的合成速度下降有关。
- 李国平唐蔚青黎健陈保生
- 关键词：肝脏胰岛素受体极低密度脂蛋白三酰甘油
- 中老年男性迟发型性腺功能减退症的研究进展被引量：14
- 2017年
- 男性迟发性性腺功能减退症（LOH）是与年龄相关并具有典型临床症状的综合征，严重影响男性的生殖健康与生活，睾酮相对缺乏是其最主要的特征。Leydig细胞数量的减少和功能的下降是LOH发生的核心机制。雄性激素生物活性的改变、雄激素受体异常和下丘脑-垂体-睾丸轴反馈调节功能障碍等为LOH发病诱因。寻找安全有效的LOH的治疗方法具有非常积极的意义。
- 高丰衣李国平
- 关键词：性腺功能减退症睾酮
- 树鼩载脂蛋白AV系列突变体的细胞内定位分析
- <正>目的研究不易感动脉粥样硬化动物-树鼩载脂蛋白AV基因不同结构域对细胞内定位的影响。方法前期我们实验室利用快速扩增cDNA末端技术成功获得了该基因的cDNA全长,该基因有两个转录本,分别为1948 bp和1937 b...
- 李国平王艳满永王抒黎健陈保生
- 关键词：动脉粥样硬化基因突变体细胞定位
- 文献传递
- 部分炎症因子活化11β-HSD1参与非酒精性脂肪肝发生的研究进展被引量：3
- 2016年
- 非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）是指非过度饮酒及其它明确损肝因素所致的,以肝细胞内大量脂肪沉积为主要特征的,包含非酒精性脂肪肝以及由其发展来的非酒精性脂肪性肝炎、非酒精性脂肪性肝硬化和肝细胞癌在内的一系列进展性疾病的统称。中国多个发达地区（北京、上海、香港等）流行病学研究发现：普通成人的NAFLD患病率已高达20%以上（[1-3]）,
- 徐杰李国平唐蔚青黎健
- 关键词：肿瘤坏死因子Α炎症因子
- 人载脂蛋白AV原核表达载体的构建与纯化研究被引量：1
- 2013年
- 目的:构建人载脂蛋白AV(apolipoprotein AV,apoAV)的原核载体并表达纯化该蛋白。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,以反转录的cDNA第一链为模板,经聚合酶链式反应(PCR)扩增得到含有编码apoAV完整成熟肽段的PCR片段。PCR产物和原核表达载体pET30b经核酸内切酶双切后连接,连接产物经转化至大肠杆菌感受态细胞Top10,挑选克隆测序。重组质粒pET30b-apoAV转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并优化诱导表达条件,重组的apoAV经镍离子螯合树脂纯化获得。结果:经测序证实人apoAV目的基因成功克隆入pET30b原核表达载体中,经过IPTG诱导有约40KD的特异性蛋白表达,与预期大小一致。该蛋白在IPTG诱导下的最佳表达时间为5h,最佳浓度在31.3μmol/L。纯化的apoAV纯度在95%以上,产率约为15 mg/L。结论:成功构建人apoAV的原核表达载体,实现了高效表达和纯化,为进一步研究其结构与功能奠定了基础。
- 李国平隋靖喆毕楠满永王抒陈保生黎健
- 关键词：原核表达蛋白纯化
