李妍
- 作品数：5 被引量：22H指数：3
- 供职机构：广州医学院第二附属医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠心肌干细胞的体外分离培养被引量：1
- 2006年
- 目的自大鼠心脏中分离得到心肌干细胞,体外培养并观察其向心肌细胞的分化能力。方法无菌操作取下新生鼠心脏,经反复消化后,弃去消化液,将所得残余组织块进行培养,视生长情况进行传代(一般1周左右)。传代细胞采用不同培养液进行培养,约2周后,镜下可见搏动细胞时,分别对原代细胞和传代细胞进行流式细胞鉴定及免疫组化染色。结果从消化后残留心肌组织块中成功培养出原代细胞,经流式细胞仪鉴定其表型为c-kit,CD 31阳性,CD 34,CD 45、心肌钙蛋白T(Cardiac Troponin T,CTnT)阴性。细胞经传代培养2周后,单个细胞开始出现搏动,亦可见成团细胞的同步收缩。再次流式鉴定的结果,表型有所改变,主要是CD 31转阴性,CTnT阳性,而c-kit、CD 34、CD 45无明显变化。免疫组化证实,原代细胞并不表达心肌细胞结构蛋白CTnT,而在部分传代细胞内可见CTnT表达。结论成功自心脏中分离得到一类表型为c-kit^+、CD 31^+、CD 34^-、CD 45^-、CTnT^-的细胞,经使用不同成份培养液传代培养,可分化可搏动的心肌细胞,并表达心肌结构蛋白。
- 吴昊陆东风黄璟李妍
- 关键词：流式细胞术免疫组化
- 新生SD大鼠心肌干细胞的体外分离培养与鉴定被引量：13
- 2006年
- 目的自新生大鼠心脏中分离得到心肌干细胞,体外培养并观察其向心肌细胞分化的能力。方法无菌操作取下新生鼠心脏,经反复消化后,弃去消化液,所得残余组织块进行培养,视生长情况进行传代。传代细胞采用诱导分化培养液进行培养,细胞生长至镜下可见搏动细胞时,分别对原代细胞和传代细胞进行流式细胞鉴定及免疫组化染色。结果从消化后残留心肌组织块中成功培养出原代细胞,经流式细胞仪鉴定其表型为c-kit、CD31阳性,CD34、CD45阴性,心肌钙蛋白T(CTnT)阴性。细胞经传代培养两周后,单个细胞开始出现搏动,亦可见成团细胞的同步收缩。再次流式鉴定,表型有所改变,主要是CD31转阴性,CTnT阳性,而c-kit、CD34、CD45无明显变化。免疫组化再次证实,原代细胞并不表达心肌细胞结构蛋白CTnT,而在部分传代细胞内可见CTnT表达。结论成功自心脏中分离得到一类表型为c-kit+CD31+CD34-CD45-CTnT-的细胞,经使用不同成分培养液传代培养,可分化为可搏动的心肌细胞,并表达心肌结构蛋白。
- 陆东风吴昊黄璟李妍
- 关键词：心肌干细胞流式细胞术免疫组化
- 比较雷公藤内酯醇与西罗莫司洗脱支架预防再狭窄被引量：4
- 2007年
- 目的比较雷公藤内酯醇洗脱支架与西罗莫司(sirolimus,雷帕霉素)洗脱支架预防冠状动脉支架植入术后再狭窄的作用。方法选用杂种幼猪30只,随机分成裸支架组、雷公藤内酯醇洗脱支架组和西罗莫司洗脱支架组,每组各植入支架10枚。术后28d,进行冠状动脉造影、组织病理检查以及免疫组化检测血管平滑肌细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)。结果雷公藤内酯醇洗脱支架组与西罗莫司洗脱支架组支架内最小内径相似(P>0.05),均大于裸支架组(P<0.01);雷公藤内酯醇洗脱支架组新生内膜面积与西罗莫司洗脱支架组相似(P>0.05),均小于裸支架组(P<0.01)。雷公藤内酯醇洗脱支架组与西罗莫司洗脱支架组的PCNA阳性细胞数相似(P>0.05),均少于裸支架组(P<0.01)。结论雷公藤内酯醇洗脱支架能抑制平滑肌细胞增殖,其预防冠状动脉支架内再狭窄的作用与西罗莫司洗脱支架相似。
- 张莉陆东风李妍黄璟江中喜
- 关键词：雷公藤内酯醇药物洗脱支架西罗莫司洗脱支架再狭窄
- 成体心肌干细胞的研究进展被引量：2
- 2007年
- 近来的研究表明无论在正常还是病理情况下心室肌细胞中均存在处于分裂周期的细胞,即成体心脏内存在具有特异性心肌分化潜能的多能干细胞———成体心肌干细胞。本文综述了成体心肌干细胞的发现、特征、功能和目前研究中仍存在的问题与展望。
- 李妍陆东风
- 关键词：心肌梗死心肌再生
- 新生小鼠心肌干细胞培养与分化的研究被引量：4
- 2007年
- 目的了解新生小鼠心肌干细胞原代和传代的培养及其分化潜能,为缺血及坏死心肌重建的临床应用提供科学依据。方法在无菌超净台中剪取新生小鼠心脏组织,经胰酶反复消化后,弃去消化液,所得剩余组织块用胶头滴管反复吹打后离心,加入培养液培养,待其长满培养瓶后进行传代,传代培养约1周可见搏动的心肌细胞,也可见成团细胞的同步收缩。结果采用改良后的方法从消化后的心肌组织块中成功培养得到原代细胞,进行免疫荧光染色、流式细胞仪鉴定其表型为c-kil、8ca-1阳性的细胞,表面不表达CD 34、CD 8、肌球蛋白重链(MHCⅡ)。细胞经传代培养1周左右,开始出现搏动,也可见成团细胞的同步收缩。再次经免疫荧光染色、流式细胞仪鉴定其表型为c-kit、sca- 1阴性,MHCⅡ阳性的细胞,仍然不表达CD 34、CD 8。结论在原方法的基础上,通过对其进行改良,从心脏中成功分离得到纯度更高、活性更好的心肌干细胞,其表型为c-kit^+、sca-1^+、CD 34^-、CD 8^-、MHCⅡ^-,经过传代培养之后,分化为搏动的心肌细胞,细胞表面标记变为c-kil^-、sca-1^-、CD 34^-、CD 8^-,并表达心肌结构蛋白MHCⅡ。
- 李妍陆东风张莉杨镇军
- 关键词：心肌干细胞心肌再生心肌缺血
