李彩红
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠脊髓少突胶质前体细胞的培养与鉴定方法被引量：3
- 2014年
- 目的探讨大鼠脊髓少突胶质前体细胞(OPCs)的分离纯化及诱导分化方法。方法取出生后3 d内SD大鼠脊髓,采用0.125%胰蛋白酶消化获取原代混合胶质细胞,培养10 d左右在37℃恒温摇床采取180 r/min摇速振摇并差速贴壁40 min获得纯化的OPCs;取纯化后培养3 d的OPCs免疫荧光鉴定细胞纯度或诱导分化。结果采用胰蛋白酶消化法获取原代混合胶质细胞、振摇并差速贴壁法分离纯化能够得到纯度较高的OPCs,折光性强,呈双极或三极形态,免疫荧光染色显示95%细胞表达A2B5和NG2(OPCs标志物),经诱导分化后表达O4及MBP(少突胶质细胞标志物)。结论采用振摇差速贴壁法可从大鼠脊髓中分离纯化获得高纯度的OPCs,获得的OPCs体外生长稳定,经诱导可分化为成熟的少突胶质细胞。
- 李彩红张婷陈雪王伟骆翔喻志源
- 关键词：少突胶质前体细胞脊髓细胞培养免疫荧光
- 大鼠脊髓小胶质细胞体外纯化培养方法的建立被引量：1
- 2014年
- 目的：建立一种简易高效的大鼠脊髓小胶质细胞原代培养方法。方法：取新生SD大鼠的脊髓进行脊髓胶质细胞的原代混合培养，第3天换液一次，此后一直不换液。至第10天左右脊髓小胶质细胞长满后，在恒温摇床上振摇（37℃、180 rpm、1~2 h），并采用差速粘附20~40 min，纯化脊髓小胶质细胞。用Iba1和CD11b的免疫荧光染色对分离纯化24 h后的小胶质细胞进行纯度鉴定。结果：成功分离纯化大鼠脊髓小胶质细胞。细胞体呈圆形或者梭形，折光性很强。Iba1和CD11b免疫荧光鉴定结果显示小胶质细胞的纯度≥95%。结论：采取营养剥夺，以及振摇和差速粘附法建立了一种高产量、高纯度的脊髓小胶质细胞培养方法。
- 陈雪张婷李彩红王伟骆翔喻志源
- 关键词：小胶质细胞脊髓原代培养
- NG2细胞在脊髓损伤中的作用
- 2013年
- 脊髓损伤(SCI)后轴突几乎没有再生能力,如何克服SCI后抑制轴突再生的环境、促进轴突再生已成为SCI修复的研究热点。NG2细胞在调控少突胶质细胞应答神经纤维损伤并形成胶质瘢痕过程中起重要作用。
- 李彩红骆翔
- 关键词：脊髓损伤
- 布美他尼对LPS诱导的小胶质细胞活化及炎性分泌的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察钠-钾-氯共转运体(Na+-K+-2Cl-cotransporter 1,NKCC1)的特异性抑制剂布美他尼(Bumetanide)对LPS(脂多糖)诱导的小胶质细胞活化及炎性因子分泌的影响。方法差速贴壁法培养大鼠原代小胶质细胞,纯化的小胶质细胞分为对照组,LPS组(1.0μg/ml)和布美他尼干预组(NKCC1抑制剂,10μM),在干预1、3、6和12 h固定细胞爬片,免疫荧光双标显示小胶质细胞活化形态;各时间点收取上层培养基,用ELISA法测定各组培养基中TNF-α和IL-1β的水平。结果 LPS干预后小胶质细胞活化,体积增大,布美他尼干预后小胶质细胞活化受到抑制。小胶质细胞分泌的TNF-α和IL-1β在LPS干预1 h时开始明显增加,TNF-α的分泌在6 h达到最高峰;IL-1β的分泌在3 h时达到最高峰(P<0.05)。布美他尼干预后与LPS组比较,TNF-α和IL-1β分泌明显减少,其中在3、6、12 h时TNF-α分泌显著降低(P<0.05),而IL-1β的分泌在1、3、6、12 h时明显降低(P<0.05)。结论布美他尼可减少LPS诱导的小胶质细胞活化及炎性因子分泌增加,提示NKCC1通路在小胶质细胞活化及炎性因子分泌中发挥了重要作用。
- 付佩彩喻志源李彩红唐荣华叶茂斌王伟
- 关键词：NKCC1布美他尼小胶质细胞IL-1Β
- ROCK特异性抑制剂Y27632对缺氧后少突胶质前体细胞分化的影响被引量：1
- 2014年
- 目的观察ROCK特异性抑制剂Y27632对缺氧损伤(Oxygen-glucose deprivation,OGD)后少突胶质前体细胞分化的影响。方法培养SD大鼠大脑皮层少突胶质前体细胞,实验分为对照组、对照+Y27632组、OGD组、OGD+Y27632组四组;对细胞进行OGD处理2h,取4d后时间点,进行免疫荧光组化染色和Western blot实验,检测细胞A2B5、NG2、O4及MBP蛋白表达情况。结果与对照组相比,OGD组表达少突胶质细胞特异性蛋白MBP量明显增多(P<0.01);OGD+Y27632组比单纯OGD组表达少突胶质细胞特异性蛋白MBP的量显著增加(P<0.01)。结论 OGD损伤可促进OPCs的分化,Y27632特异性抑制ROCK可以进一步促进OGD损伤后OPCs的分化,提示ROCK信号通路在缺氧诱导OPCs分化的过程中有重要的调控作用。
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- 关键词：ROCK少突胶质前体细胞OGD分化
- RhoA/ROCK通路抑制剂通过ERK信号通路促进小胶质细胞吞噬作用
- 付佩彩喻志源李彩红唐荣华骆翔
- 布美他尼对大鼠脑微血管内皮细胞缺氧损伤后增殖的影响
- 2014年
- 目的观察钠-钾-氯共转运体1(Na+-K+-2Cl-cotransporter 1,NKCC1)抑制剂布美他尼(Bumetanide)对脑微血管内皮细胞(BMEC)缺氧损伤后增殖的影响。方法将原代培养的大鼠BMEC分为3组:对照组、氧糖剥夺/复氧(OGD/Reo)组和OGD/Reo+Bumetanide(10μmol/L)组。在氧糖剥夺/复氧6、12、24和48h时,用MTT法检测细胞活力,Edu染色以及流式细胞术检测细胞增殖及细胞周期情况。结果氧糖剥夺/复氧6、12、24h,BMEC活力下降,Edu染色阳性率减少且S期细胞减少。而与OGD/Reo组相比,OGD/Reo+Bumetanide组BMEC活力增加[复氧6h:(0.497±0.039)vs.(0.612±0.044)],Edu染色阳性率增加[6h时:(5.742±0.195)%vs.(7.125±0.144)%],且S期细胞增多[6h时:(5.845±0.389)%vs.(7.124±0.542)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论布美他尼可促进缺氧损伤后BMEC的活力及细胞增殖,提示NKCC1通路在BMEC缺氧损伤后的细胞增殖中发挥了重要作用。
- 付佩彩喻志源李彩红唐荣华叶茂斌王伟
- 关键词：布美他尼脑微血管内皮细胞
