李晓龙 作品数:28 被引量:41 H指数:4 供职机构: 广西医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 广西壮族自治区自然科学基金 国家自然科学基金 广西青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
基于网络药理学预测γ-倒捻子素治疗肝癌的分子机制 2023年 [目的]基于网络药理学预测γ-倒捻子素(Mangosin)治疗肝癌(LC)的潜在靶点和作用机制。[方法]采用SwissADME数据库进行γ-Mangosin的筛选、鉴定,STP数据库(SwissTargetPrediction)对作用靶标预测,Uniprot数据库完成相关Gene Symbol的匹配;GeneCards数据库对LC相关疾病的靶点进行检索,并完成药物和疾病交集靶点的筛选;使用String数据库、Cytoscape 3.8.0软件完成LC靶点的蛋白互作网络(PPI)、“药物-共活性物质-核心靶点基因”互作网络的绘制;借助Metascape数据库完成对基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集通路分析,用AutoDock软件对γ-Mangosin和核心靶点开展分子对接(MD)验证。[结果]筛选出与肝癌相对应的作用靶点共66个,PPI网络分析显示关键靶点有MTOR、MAPK3、AKT1、HSP90AA1、TNF。GO富集分析显示通路主要有蛋白激酶活性、转移酶活性的正调控等,KEGG富集通路集中于癌症通路,MD显示多数核心靶点和γ-Mangosin存在较强的结合性能。[结论]预测出γ-倒捻子素治疗肝癌的关键靶点为MAPK3、MTOR、TNF等,主要作用通路为癌症通路,可为进一步开展γ-倒捻子素治疗LC的基础研究提供思路。 李玲 韦忠琼 周梅 韦子琪 李铨香 吴玉珍 李晓龙关键词:肝癌 网络药理学 α-倒捻子素对免疫抑制小鼠免疫功能的影响 被引量:2 2021年 目的探讨α-倒捻子素对环磷酰胺致小鼠免疫抑制模型免疫功能的影响,为后续的机制研究及开发增加免疫功能的新药提供实验依据。方法将小鼠随机分成5组,每组10只:空白对照组、免疫抑制组、α-倒捻子素高剂量组、中剂量组和低剂量组。采用灌胃给药的方法,前7 d,除空白对照组外,其他4组给予环磷酰胺(CTX)创建免疫低下模型;后14 d,空白对照组继续灌胃生理盐水,免疫抑制组灌胃玉米油,三个剂量组分别灌胃不同剂量的α-倒捻子素。末次给药后24 h处死小鼠,进行迟发型变态反应(DTH)检测、血清溶血素测定(HC_(50))、巨噬细胞吞噬功能的测定(碳廓清实验)及免疫器官胸腺和脾指数测定、自然杀伤细胞(NK细胞)活性测定(MTT法)、外周血白细胞计数的测定,以及脾淋巴细胞增殖实验,研究α-倒捻子素对小鼠免疫功能的影响。结果小鼠免疫抑制模型创建成功。灌胃α-倒捻子素后,三个剂量组能不同程度提高免疫抑制小鼠胸腺和脾指数、半数溶血值、脾淋巴细胞增殖率、NK细胞活性,其中高剂量组,总α-倒捻子素灌胃剂量为100 mg/(kg·d),其效果最为突出,在多个实验中,与免疫抑制组相比,差异极显著,具有统计学意义(P<0.01);而在迟发型变态反应中,除高剂量组与空白对照组及免疫抑制组比较具有显著差异(P<0.05),其他剂量组均无统计学意义(P>0.05);在外周血白细胞计数测定实验中,高剂量组与免疫抑制组比较具有极显著的差异(P<0.01),其他组均无统计学意义(P>0.05);在碳廓清实验中,各剂量组与空白对照组、免疫抑制组比较均无统计学意义(P>0.05)。结论倒捻子素对免疫抑制小鼠的免疫功能具有调节作用,其对免疫抑制小鼠免疫功能改善的最适宜剂量更偏向于高剂量组,在一定范围内具有剂量依赖性。 秦艳萍 李晓龙 李慧茹 陆春果 杨粤 张钧雄关键词:免疫抑制小鼠 免疫功能 山竹果皮中总氧杂蒽酮对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响 被引量:9 2016年 目的探讨山竹果皮中总氧杂蒽酮提取纯化物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法将人鼻咽癌CNE2细胞随机分成阴性对照组和不同浓度山竹果皮中总氧杂蒽酮提取纯化物组。阴性对照组不加药物,正常培养;总氧杂蒽酮提取纯化物组分别以200,400,600,800μmol·L-1总氧杂蒽酮作用24,48,72 h。采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度总氧杂蒽酮提取纯化物对CNE2细胞增殖的影响,Annexin-V/PI双重染色、碘化丙啶单染进行流式细胞术检测总氧杂蒽酮提取纯化物对CNE2细胞周期和凋亡的影响。Caspase-3试剂盒检测总氧杂蒽酮提取纯化物对CNE2细胞Caspase-3酶活化的影响。结果总氧杂蒽酮提取纯化物随着浓度增加,可显著抑制人鼻咽癌CNE2细胞的增殖活性,浓度为371.536 7μmol·L-1时可诱导人鼻咽癌CNE2细胞出现明显早期凋亡,并且随着药物作用时间的增加(24,48,72 h),凋亡早期癌细胞的比例显著上升(分别为0.03%,10.54%,26.47%)(P<0.05);总氧杂蒽酮提取纯化物使CNE2细胞G1期细胞比例大幅升高,同时S期细胞比例明显下降;对Caspase-3具有激活作用,Caspase-3酶的活性与药物浓度成正比。结论山竹果皮中总氧杂蒽酮提取纯化物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖有显著抑制作用和促凋亡作用,其作用机制可能与抑制鼻咽癌细胞增殖活性、抑制细胞进入S期和激活Caspase-3有关。 赖燕燕 黄应雯 黄丹玚 伍兰岚 罗彬尤 李晓龙关键词:山竹 鼻咽 CNE2细胞 壮方柔肝化纤颗粒对CCl_(4)复合因素诱导肝纤维化大鼠模型的干预效应及其对α-SMA、E-Cadherin表达的影响 被引量:1 2023年 目的:研究壮方柔肝化纤颗粒对CCl_(4)复合因素诱导肝纤维化大鼠模型的干预效应及其对α-SMA、E-Cadherin蛋白表达的影响。方法:选取48只雄性Wistar大鼠随机分成空白组、病理模型组与柔肝化纤颗粒组,每组均为16只。病理模型组与柔肝化纤颗粒组大鼠皮下注射40%四氯化碳(CCl_(4))油剂联合花生油复合因素建立大鼠肝纤维化动物模型,第5周起给予柔肝化纤颗粒灌胃给药,每周灌胃3次,连续8周,8周后检测肝功能转氨酶指标(ALT、AST),通过HE染色、Masson染色、免疫组化等方法,对比分析各组大鼠肝组织的病理学形态改变,采用酶联免疫分析(ELISA)检测大鼠氧化应激氧化物歧化酶(SOD)与丙二醛(MDA)的表达,并采用RT-PCR、Western Blot等方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙粘蛋白(E-Cadherin)的表达。结果:与空白组比较,病理模型组大鼠血清的ALT、AST水平明显升高,柔肝化纤颗粒组大鼠血清ALT、AST水平均明显下降(P均<0.001)。病理模型组大鼠肝组织内的小叶结构已残缺,出现众多肝脏纤维组织异常增生,增生所形成的胶原纤维汇合成密集的纤维间隔,从而变成假小叶结构,假小叶结构内部出现大量形态各异、大小不均的脂肪变性的肝细胞,炎症细胞弥漫性浸润显著。与病理模型组相比,柔肝化纤颗粒组肝小叶结构被破坏的程度显著减轻,有不同程度增生的胶原纤维组织集中在中央静脉至汇管区范围,纤维间隔相对疏松,有少量炎症细胞浸润,浸润程度较病理模型组减轻。与病理模型组比较,柔肝化纤颗粒组SOD水平较病理模型组与空白组明显升高(P<0.001),柔肝化纤颗粒组MDA水平较病理模型组明显下降(P<0.001),柔肝化纤颗粒组α-SMA的表达水平明显降低(P<0.001),E-Cadherin的表达水平均明显升高(P<0.001)。结论:柔肝化纤颗粒能有效抑制肝纤维组织增生,降低CCl_(4)联合花生油复合溶液联合诱导肝纤维化� 张文富 吴姗姗 戴铭 戴铭 黄晶晶 吕建林 王振常关键词:肝纤维化 Α-SMA E-CADHERIN GM-CSF体外诱导培养C57BL/6J小鼠BMDCs的动态观察及鉴定 2017年 本研究旨在通过培养并观察C57BL/6J小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs)集落、形态、表型的动态变化,为BMDCs的形态、表型等方面提供参考数据。取C57BL/6J小鼠骨髓,用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱导和培养BMDCs,在第3、6、9、12天拍照、HE染色观察BMDCs的集落、形态;FACS分析第3、6、9、12天以及LPS刺激后BMDCs的CD11c、CD80和CD86的表达;扫面电镜拍照LPS刺激后BMDCs的树突与形态。发现GM-CSF诱导和培养的C57BL/6J小鼠BMDCs在第3天形成明显的集落、第6天集落释放较多的BMDCs;显微镜下HE染色显示,第3天可见BMDCs有突起、第6天明显,第12天有明显突起的细胞数量增多;FACS分析显示,随着培养时间的增加,BMDCs的CD11c、CD80、CD86的表达逐渐上调,第12天表达较明显,LPS刺激能提高CD80、CD86的表达;扫描电镜显示,LPS刺激的BMDCs有明显的树突状突起。因此GM-CSF诱导和培养的C57BL/6J小鼠BMDC具有典型的树突状突起、表达CD11c、CD80、CD86等树突状细胞(DCs)分子标记,LPS刺激能促进CD11c、CD80、CD86的表达。 赖燕燕 李日伦 黄应雯 李晓龙关键词:粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 骨髓来源树突状细胞 脂多糖类 基于miR-135a/FOXO1/PINK1通路探讨柔肝化纤颗粒调控线粒体自噬抑制肝星状细胞活化的机制 被引量:1 2024年 目的基于miR-135a/FOXO1/PINK1通路探讨柔肝化纤颗粒通过调控线粒体自噬来抑制肝星状细胞活化与增殖的影响及其机制。方法HSC-T6分为空白组、H_(2)O_(2)组、miR-135a-NC组、miR-135a-mimic组、miR-135a-in-hibitor-NC+H 2 O2组、miR-135a-inhibitor+H_(2)O_(2)组、柔肝化纤颗粒含药血清对照组、H_(2)O_(2)+含药血清对照组、H_(2)O_(2)+含药血清组、H_(2)O_(2)+含药血清+miR-135a-NC组及H_(2)O_(2)+含药血清+miR-135a-mimic组。分别采用Real-time PCR、Western Blot、ELISA及流式细胞术检测miR-135a、FOXO1、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ、Smad2、p-Smad2、转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、NF-κB p65、p-NF-κB p65、α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TNF-α表达及线粒体膜电位、活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成。结果给予H_(2)O_(2)及过表达miR-135a可显著上调HSC-T6 miR-135a、α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、p-Smad2、TGF-β1、p-NF-κB p65、TNF-α表达及ROS生成(P<0.01);下调FOXO1、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ表达与线粒体膜电位(P<0.01)。给予柔肝化纤颗粒及抑制miR-135a表达可显著下调HSC-T6 miR-135a、α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、p-Smad2、TGF-β1、p-NF-κB p65、TNF-α表达及ROS生成(P<0.01);上调FOXO1、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ表达与线粒体膜电位(P<0.01)。给予柔肝化纤颗粒同时过表达miR-135a可抑制柔肝化纤颗粒对HSC-T6的影响(P<0.01)。结论线粒体自噬可抑制HSC-T6活化,其机制与线粒体自噬抑制ROS生成,进而抑制TGF-β1/Smad2通路及炎症反应有关;柔肝化纤颗粒亦可抑制HSC-T6活化,其机制与柔肝化纤颗粒抑制miR-135a表达,活化FOXO1/PINK1通路,从而促进线粒体自噬有关。 张文富 吴姗姗 戴铭 吕建林 黄晶晶 黄晶晶 王振常关键词:HSC-T6 FOXO1 探究壮方柔肝化纤颗粒对肝纤维化大鼠肝组织病理影响机制 2023年 目的:探究壮方柔肝化纤颗粒对肝纤维化大鼠肝组织病理影响机制。方法:选取80只雄性Wistar大鼠随机将其平均分成正常对照组、病理模型组、柔肝化纤颗粒低、中、高剂量组,每组各16只。四氯化碳复合因素造模,观察记录大鼠肝脏形态,采用HE染色、Masson染色观察大鼠肝组织和胶原纤维变化,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)指标数值,分析大鼠肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、羟脯氨酸(HYP)、超氧化物歧化酶(SOD)与丙二醛(MDA)的含量。结果:柔肝化纤颗粒低、中、高剂量组大鼠肝细胞变性、坏死及纤维化组织增生程度均较病理模型组明显减轻。柔肝化纤颗粒低、中、高剂量组血清ALT、AST指标数值与肝组织中HYP、MDA指标水平较病理模型组呈现剂量依赖性降低(P<0.001),而柔肝化纤颗粒高剂量组GSH-Px、SOD的指标含量显著高于病理模型组,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论:柔肝化纤颗粒可有效改善肝纤维化大鼠的肝细胞损害情况,减轻其肝组织炎症程度,对肝纤维化大鼠有一定的保肝护肝与抗肝纤维化作用,其机制可能与提高GSH-Px与SOD的水平、降低HYP与MDA的含量、降低氧化应激水平、调节脂质代谢、减少机体胶原蛋白合成等相关。 张文富 吴姗姗 戴铭 吕建林 吕建林 李晓龙 黄晶晶关键词:肝纤维化 病理 肝癌新标记物用于肝癌早期诊断研究体系的建立和应用研究 周素芳 蓝秀万 凌敏 蔡丹昭 邓勇 李晓龙 张鹏 林朝群 黄朋 范升龙 涂镇波 李玲 张胜昌 该项目来源于广西科技研究与技术开发项目“肝癌新标记物用于肝癌早期诊断研究体系的建立和应用研究”(桂科攻10124001A-2)。利用改良的SEREX技术从广西肝癌人cDNA文库和人胚胎干细胞cDNA文库中筛选到了30个与...关键词:关键词:肝癌 一个中国汉族皮肤和粘膜多发静脉血管畸形家系的单倍型分析 被引量:2 2012年 根据患者的临床体征以及家系的遗传方式,文章对一个中国汉族皮肤和粘膜多发静脉血管畸形(Mucocutaneous venous malformations,VMCM)家系进行了临床诊断。家系中连续5代都有患者,男女患者比例约1:1,为常染色体显性遗传方式。患者皮肤、口腔粘膜、舌头以及四肢等处可见蓝紫色、突出皮面、质硬、压之不褪色的瘤体,组织病理学显示,静脉血管的管腔极不规则,部分管壁存在缺失,部分管壁明显增厚。患者无消化道出血史,无心脏和脑部异常,临床诊断为VMCM。为了进行致病基因的定位和单倍型分析,采集了家族中26人的外周血并提取基因组DNA,并设计微卫星引物进行了连锁和单倍型分析。两点间连锁分析的结果表明,在D9S1121处有最大LOD值为Z=5.38(θ=0.00),单倍型分析的结果提示,致病基因定位于9号染色体短臂上D9S1121和D9S161之间约7 cM的范围内。文章首次报道了中国汉族VMCM家系,其致病基因定位定位于9p,与已报道的欧洲家系相同。用4个微卫星标记D9S1121、D9S 169、D9S161和D9S248确定了该家系致病基因的单倍型,为不同种族和人群VMCM疾病相关研究提供参考。 舒伟 林有坤 华荣 罗彦彦 方玲 许淑茹 何娜 马军 胡启平 李晓龙 袁志刚关键词:血管畸形 汉族 SMP30对肝癌细胞行为学影响及其与糖代谢关系研究 被引量:2 2017年 糖代谢是癌症的一个典型特征,研究显示SMP30(senescence marker protein 30)是一种肝癌相关抗原,与脂代谢关系密切,为了探讨SMP30与糖代谢的变化是否相关,我们构建了稳定转染SMP30的人SK-HEP1肝癌细胞株。通过迁移实验、侵袭实验和CCK8实验对比检测了过表达SMP30组与对照组肝癌细胞的迁移、侵袭、增殖的情况;同时还检测了细胞的葡萄糖吸收、乳酸排出的情况。结果显示,与对照组相比,SMP30对SK-HEP1肝癌细胞株的迁移、侵袭有明显的抑制作用(p<0.01);对细胞的增殖作用不明显(p>0.05)。过表达SMP30对肝癌细胞的葡萄糖吸收和乳酸排出作用不显著(p>0.05)。SMP30对肝癌细胞SK-HEP1的迁移、侵袭有一定的抑制作用,但这种作用与糖代谢关系不明显。 庄园 李晓龙 郑顺心 王峰 莫之婧 宾晓芸 吕智略 郭顺利 谢美玉 石明霞 周素芳关键词:肝癌 行为学 糖代谢