李梁
- 作品数：48 被引量：196H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 造血因子基因修饰的基质细胞诱导造血细胞向巨核系细胞定向扩增的研究
- 2000年
- 目的 为诱导造血细胞在体外向巨核系细胞定向扩增 ,观察了促血小板生成素 (TPO)、白细胞介素 11(IL 11)基因修饰的成纤维样基质细胞 (HFCL)对纯化的脐血CD+34 造血细胞向巨核系细胞定向增殖分化的影响。方法 以未经造血因子修饰的HFCL支持的造血细胞体外扩增作为对照 ,采用流式细胞仪检测脐血CD+34 造血细胞在TPO基因修饰的HFCL(TPO/HFCL)、IL 11基因修饰的HFCL(IL 11/HFCL)以及TPO和IL 11基因共修饰的HFCL(TPO +IL 11/HFCL)的支持下 ,经过 7d的体外扩增后 ,扩增细胞中的CD+34 CD+4 1巨核系祖细胞和表型为CD+4 1CD+61较成熟的巨核系细胞的比例。结果 脐血CD+34 造血细胞经过 7d体外扩增后 ,CD+34 CD+4 1巨核系祖细胞在TPO/HFCL、IL 11/HFCL和TPO +IL11/HFCL支持的扩增细胞中的比例分别为 (13.7± 2 .0 ) %、(9.9± 1.1) %、(14.5± 2 .0 ) % ,高于HFCL的 (6 .5± 1.8) % (P <0 .0 1) ;并表现为TPO/HFCL支持的扩增细胞中巨核系祖细胞的比例高于IL 11/HFCL(P <0 .0 5 )。而表型为CD+4 1CD+61的巨核系细胞在扩增细胞中的比例分别为 (11.9±0 .7) %、(2 4.1± 3 .1) %、(17.6± 1.9) % ,其中IL 11/HFCL和TPO +IL 11/HFCL支持的扩增体系高于HFCL的 (10 .6± 1.5 ) % (P <0 .0 1) ;且IL 11/HFCL对CD+4
- 杨光周雅德裴雪涛李梁
- 关键词：造血细胞IL-11基因修饰
- DNA拓扑异构酶Ⅱ在膀胱移行细胞癌的表达被引量：9
- 1999年
- 目的探讨ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ（ＴＯＰＯⅡ）与膀胱肿瘤的病理分级、临床分期及多药耐药的关系。方法应用抗ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ单克隆抗体ＳＷＴ３Ｄ１对６４例膀胱移行细胞癌进行免疫组化研究。结果ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ增殖指数随肿瘤细胞分级增高而逐步升高，Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３分别为（５６±１７）％、（１３７±１０２）％、（２３２±１５７）％（Ｐ＜００５），ＴＯＰＯⅡ在膀胱癌的表达与临床分期和复发无相关性（Ｐ＞００５）。结论ＴＯＰＯⅡ指数与膀胱癌的生物学特性相关。
- 叶传忠陈仕平裴雪涛冯凯李梁
- 关键词：膀胱肿瘤免疫组化移行细胞癌DNA
- 腺病毒载体介导的人β_2-肾上腺素能受体基因导入心肌细胞的研究
- 1999年
- 目的 观察重组缺陷型腺病毒即腺病毒载体介导的人 β2 肾上腺素能受体 (β2 AR)基因导入大鼠心肌细胞后 β2 AR的表达及其功能。方法 构建含人 β2 AR基因的腺病毒载体 (Adβ2 AR) ,转染大鼠的心肌细胞 ,检测心肌细胞对人 β2 AR的表达及环磷酸腺苷 (cAMP)的含量。结果 Northern印迹杂交显示Adβ2 AR转染的心肌细胞表达人 β2 -ARmRNA ;Western免疫印迹杂交分析表明转染的心肌细胞有人 β2 AR ;放射性配基检测显示转基因心肌细胞的 β AR密度 [(2 34± 6 .4)fmol/mg蛋白 ]是未转染的心肌细胞密度 [(76± 2 .8)fmol/mg蛋白 ]的 3倍 (P <0 .0 1 ) ;经 1 0 μmol/L异丙肾上腺素作用 ,转基因的心肌细胞的cAMP量 [(1 2 4± 6 .8)pmol/ 1 0 6 细胞 ]明显高于对照组 [(58.4± 4 .6)pmol/ 1 0 6 细胞 ] (P <0 .0 1 )。结论 人 β2
- 高文谦李小鹰李梁裴雪涛
- 关键词：腺病毒载体心肌细胞
- 树突状细胞体外定向诱导扩增及其分离纯化被引量：10
- 2000年
- 目的 :探讨定向诱导及纯化树突状细胞 (DC)的方法 ,为进一步研究树突状细胞的功能、特性及临床应用提供技术方法。方法 :利用免疫磁珠法 (MACS)分离纯化脐血CD34 + 细胞 ,在液体培养体系中加入FL、GM CSF、TNF α、IL 4及SCF ,培养 12d后光镜检测细胞形态及流式细胞仪分析表面标志 (CDla、HLA DR及CD80 ) ;利用抗树突状细胞单克隆抗体 (X 11)及免疫磁珠分离纯化树突状细胞 ,流式细胞仪检测纯化后DC的纯度。结果 :经体外定向诱导扩增 ,可成功地将CD34 + 细胞定向诱导为树突状细胞 ,CDla+ 细胞的比例可升至 (2 7.18± 1.5 6 ) %〔对照为 (0 .6 5± 0 .38) % )〕 ,诱导出的DC具有典型的树枝状突起 ,有较高的CDla、HLA DR及CD80表达 ,经免疫磁珠分选 ,树突状细胞 (CDla+ )的纯度可达 (94.6 1± 2 .2 4) %以上。结论 :经特定细胞因子的组合 ,可将CD34 + 细胞定向诱导成DC ,并可通过免疫磁珠法分选出纯度达 90 %以上的DC。
- 白慈贤冯凯李梁裴雪涛
- 关键词：树突状细胞纯化体外定向诱导
- 成人骨髓间充质干细胞体外扩增和定向诱导分化为骨和软骨细胞的研究
- 间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)是骨髓中除造血干细胞以外的另一类干细胞,是一群具有多向分化潜能的均质性细胞,在特定条件下除可诱导分化为多种间质组织细胞,如成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞、...
- 王冬梅杨莉李梁冯凯白慈贤裴雪涛
- 文献传递
- IL-11基因修饰的基质细胞对造血细胞体外扩增的影响被引量：9
- 2001年
- 目的 研究造血因子白介素 11(IL 11)基因修饰的基质细胞对造血细胞体外扩增的影响。方法 采用逆转录病毒载体将IL 11基因转入基质细胞HFCL ,用Northernblot检测基质细胞HFCLIL 11基因的表达 ,用流式细胞仪检测IL 11基因修饰的HFCL支持的脐血CD3 4 + 造血细胞体外扩增中表型为CD3 4 + CD3 8- 早期祖细胞和表型为CD3 4 + CD41+ 巨核系定向祖细胞的比例。结果 基质细胞HFCL能够表达逆转录病毒介导的IL 11基因 ,并且在这种IL 11基因修饰的基质细胞支持下 ,脐血CD3 4 + 造血细胞经过7d扩增 ,扩增细胞中表型为CD3 4 + CD3 8- 的早期祖细胞和表型为CD3 4 + CD41+ 巨核系祖细胞的比例分别为 (1.62± 0 .2 3 ) %、(9.9±1.1) % ,高于未转基因HFCL的 (0 .8± 0 .2 3 ) %、(6.5± 1.8) % ,而在相同条件下细胞因子支持的扩增细胞中则分别为 (0 .19±0 .14 ) %、(6.0± 1.1) %。结论 基质细胞能够表达经逆转录病毒载体介导的IL 11基因 ,而且经IL 11基因修饰的基质细胞能显著促进CD3 4 + CD3 8- 的早期祖细胞和CD3 4 + CD41+ 巨核系祖细胞扩增。
- 杨光周雅德裴雪涛李梁冯凯时维绢
- 关键词：造血细胞体外扩增基质细胞基因修饰
- Lin^-CD_(34)^-与Lin^-CD_(34)^+细胞差异表达基因的鉴定
- 2003年
- 目的 克隆并鉴定Lin-CD3 4-细胞区别于Lin-CD3 4+细胞的可能与其性状相关的基因。方法 以Lin-CD3 4-细胞作为检测对象 ,Lin-CD3 4+细胞作为驱动细胞 ,应用抑制消减杂交技术构建Lin-CD3 4-细胞的cDNA消减文库。选取部分克隆测序 ,测序结果与GenBank进行同源性比较和功能分析。结果 共获得 593个含有插入片段的克隆 ,片段的长度为 30 0～ 50 0bp。随机选取 53条EST进行测序 ,其中 37条EST代表了 1 0个已知基因 ,其余 1 6条EST代表了 4个未知序列。结论 利用抑制消减杂交技术鉴定出部分Lin-CD3 4-细胞特异表达的基因 ,可能与Lin-CD3
- 王冬梅杨莉李梁冯凯白慈贤陈琳裴雪涛
- 关键词：造血干细胞抑制消减杂交技术差异表达基因
- CD_(34)^-细胞是否为更原始的造血干细胞被引量：1
- 1999年
- 李梁裴雪涛
- 关键词：造血干细胞
- 内部核糖体进入位点控制hytk基因和绿色荧光蛋白的表达被引量：1
- 2000年
- 构建一种带有绿色荧光蛋白基因（ ｇｆｐ）和 ｈｙｔｋ ｃＤＮＡ（潮霉素磷酸转移酶和 ＨＳＶ－ｔｋ的融合基因）的 新型真核表达载体，用于简便、快速地了解自杀基因在恶性肿瘤中的转染效率。利用脑炎心肌炎病毒 （ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｏｃａｒｄｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ， ＥＭＣＶ）的内部核糖体进入位点（ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｒｉｂｏｓｏｍｅ ｅｎｔｒｙ ｓｉｔｅ， ＩＲＥＳ），将 ｇｆｐ 的ｃＤＮＡ与ｈｙｔｋ真核表达载体重组，构建获得含ｇｆｐ和ｈｙｔｋ基因的重组质粒：Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导下分别转染 ＣＯＳ－７细胞及人膀胱癌细胞株ＥＪ，并检测其表达情况。结果示该载体在瞬时表达及稳定表达时均可获得ｈｙｔｋ 及 ｇｆｐ的良好表达。说明含 ｇｆｐ和 ｈｙｔｋ基因双顺反子真核表达载体的构建成功，为临床应用自杀基因治疗膀 胱恶性肿瘤提供了新的治疗工具及随访检测手段。
- 叶传忠陈仕平裴雪涛李梁冯凯
- 关键词：HYTK基因IRES
- 一种分离巨核系祖细胞的方法
- 本发明包括利用系特异性单克隆抗体的混合物(包括CD2,CD3,CD14,CD16,CD19,CD24,CD56,CD66b,CD41及Glycophorin A)及免疫磁珠分离体系先去除已确定分化方向的细胞,再利用IL－...
- 裴雪涛冯凯王冬梅李梁杨雷南雪白慈贤张锐
- 文献传递
