冯凯
- 作品数：127 被引量：610H指数：13
- 供职机构：解放军第309医院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 成人骨髓间充质干细胞体外扩增和定向诱导分化为骨和软骨细胞的研究
- 间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)是骨髓中除造血干细胞以外的另一类干细胞,是一群具有多向分化潜能的均质性细胞,在特定条件下除可诱导分化为多种间质组织细胞,如成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞、...
- 王冬梅杨莉李梁冯凯白慈贤裴雪涛
- 文献传递
- 树突状细胞介导的抗白血病效应的临床研究被引量：13
- 2005年
- 肿瘤的免疫治疗作为恶性肿瘤综合治疗的重要组成部分,近年来受到了广泛的关注。树突状细胞(DC)是已知的功能最强的抗原呈递细胞,不仅能够激活自体的抗肿瘤免疫,同样能够提高异体免疫组织的抗肿瘤效应。为了探讨外周血来源的DC体外培养扩增和临床治疗的可行性和安全性,分析DC免疫治疗对于急性非淋巴细胞白血病自体骨髓移植患者长期生存的影响,利用CS3000Plus采集13例急性非淋巴细胞白血病自体骨髓移植后的病人的外周血单个核细胞,经过2周的体外培养后行DC免疫治疗,治疗后长期随访观察其无病生存时间。结果表明,无一例发现有与DC免疫治疗相关的严重不良反应;KaplanMeier生存分析结果为:DC组5年生存率为75.52%,非DC组5年生存率为45.71%,DC组在累计生存率上明显优于非DC组。结论:外周血来源的DC体外培养和临床治疗是安全可行的,急性非淋巴细胞白血病病人在自体骨髓移植术后应用DC免疫治疗延长了其无病生存时间,提高了长期生存率。
- 陈虎楼晓江岷胡亮钉俞志勇徐晨李渤涛宁红梅李欲航冯凯刘广贤
- 关键词：树突状细胞抗白血病效应自体骨髓移植免疫治疗细胞治疗
- IL-11基因修饰的基质细胞对造血细胞体外扩增的影响被引量：9
- 2001年
- 目的 研究造血因子白介素 11(IL 11)基因修饰的基质细胞对造血细胞体外扩增的影响。方法 采用逆转录病毒载体将IL 11基因转入基质细胞HFCL ,用Northernblot检测基质细胞HFCLIL 11基因的表达 ,用流式细胞仪检测IL 11基因修饰的HFCL支持的脐血CD3 4 + 造血细胞体外扩增中表型为CD3 4 + CD3 8- 早期祖细胞和表型为CD3 4 + CD41+ 巨核系定向祖细胞的比例。结果 基质细胞HFCL能够表达逆转录病毒介导的IL 11基因 ,并且在这种IL 11基因修饰的基质细胞支持下 ,脐血CD3 4 + 造血细胞经过7d扩增 ,扩增细胞中表型为CD3 4 + CD3 8- 的早期祖细胞和表型为CD3 4 + CD41+ 巨核系祖细胞的比例分别为 (1.62± 0 .2 3 ) %、(9.9±1.1) % ,高于未转基因HFCL的 (0 .8± 0 .2 3 ) %、(6.5± 1.8) % ,而在相同条件下细胞因子支持的扩增细胞中则分别为 (0 .19±0 .14 ) %、(6.0± 1.1) %。结论 基质细胞能够表达经逆转录病毒载体介导的IL 11基因 ,而且经IL 11基因修饰的基质细胞能显著促进CD3 4 + CD3 8- 的早期祖细胞和CD3 4 + CD41+ 巨核系祖细胞扩增。
- 杨光周雅德裴雪涛李梁冯凯时维绢
- 关键词：造血细胞体外扩增基质细胞基因修饰
- 靶向造血干细胞的基因治疗被引量：1
- 2005年
- 造血干细胞以其自我复制和分化潜能的特点,成为基因治疗最理想的靶细胞之一。尽管仍然存在着诸如理想载体的选择、转染效率、生物安全性、转基因的高效表达等难题,不同程度地制约着靶向造血干细胞基因治疗的发展,但仍提供了一种全新的、有应用前景的疾病治疗手段。本文就相关的造血干细胞生物学特性、载体系统及临床应用方面作一综述。
- 王军冯凯陈虎
- 关键词：造血干细胞基因治疗靶向转染效率分化潜能自我复制
- Lin^-CD_(34)^-与Lin^-CD_(34)^+细胞差异表达基因的鉴定
- 2003年
- 目的 克隆并鉴定Lin-CD3 4-细胞区别于Lin-CD3 4+细胞的可能与其性状相关的基因。方法 以Lin-CD3 4-细胞作为检测对象 ,Lin-CD3 4+细胞作为驱动细胞 ,应用抑制消减杂交技术构建Lin-CD3 4-细胞的cDNA消减文库。选取部分克隆测序 ,测序结果与GenBank进行同源性比较和功能分析。结果 共获得 593个含有插入片段的克隆 ,片段的长度为 30 0～ 50 0bp。随机选取 53条EST进行测序 ,其中 37条EST代表了 1 0个已知基因 ,其余 1 6条EST代表了 4个未知序列。结论 利用抑制消减杂交技术鉴定出部分Lin-CD3 4-细胞特异表达的基因 ,可能与Lin-CD3
- 王冬梅杨莉李梁冯凯白慈贤陈琳裴雪涛
- 关键词：造血干细胞抑制消减杂交技术差异表达基因
- 人造血干/祖细胞体外诱导分化为T淋巴细胞的研究进展
- 2006年
- 本文介绍人造血干/祖细胞在体外微环境中产生并分化发育为成熟T淋巴细胞的相关环节和影响因素,涉及到人体外微环境的建立,包括模仿胸腺微环境的培养体系、无胸腺组织的培养体系;与T细胞分化有关的细胞因子的研究;T细胞在体外的分化过程;T细胞分化研究的应用与展望。
- 白宝君冯凯陈虎
- 关键词：微环境诱导分化
- 造血干/祖细胞体外大规模定向诱导分化及其临床应用前景被引量：4
- 2002年
- 体外利用细胞培养技术和不同的细胞因子组合可将造血干细胞定向分化为中性粒细胞、红细胞、巨核细胞以及树突状细胞等细胞成分,利用这一特性可望在体外开发可应用于临床的造血细胞工程产品。本文就造血干/祖细胞体外定向诱导分化的细胞产品及其临床应用的前景进行综述。
- 冯凯裴雪涛
- 关键词：体外定向诱导分化细胞治疗干细胞移植
- 内部核糖体进入位点控制hytk基因和绿色荧光蛋白的表达被引量：1
- 2000年
- 构建一种带有绿色荧光蛋白基因（ ｇｆｐ）和 ｈｙｔｋ ｃＤＮＡ（潮霉素磷酸转移酶和 ＨＳＶ－ｔｋ的融合基因）的 新型真核表达载体，用于简便、快速地了解自杀基因在恶性肿瘤中的转染效率。利用脑炎心肌炎病毒 （ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｏｃａｒｄｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ， ＥＭＣＶ）的内部核糖体进入位点（ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｒｉｂｏｓｏｍｅ ｅｎｔｒｙ ｓｉｔｅ， ＩＲＥＳ），将 ｇｆｐ 的ｃＤＮＡ与ｈｙｔｋ真核表达载体重组，构建获得含ｇｆｐ和ｈｙｔｋ基因的重组质粒：Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导下分别转染 ＣＯＳ－７细胞及人膀胱癌细胞株ＥＪ，并检测其表达情况。结果示该载体在瞬时表达及稳定表达时均可获得ｈｙｔｋ 及 ｇｆｐ的良好表达。说明含 ｇｆｐ和 ｈｙｔｋ基因双顺反子真核表达载体的构建成功，为临床应用自杀基因治疗膀 胱恶性肿瘤提供了新的治疗工具及随访检测手段。
- 叶传忠陈仕平裴雪涛李梁冯凯
- 关键词：HYTK基因IRES
- 一种分离巨核系祖细胞的方法
- 本发明包括利用系特异性单克隆抗体的混合物(包括CD2,CD3,CD14,CD16,CD19,CD24,CD56,CD66b,CD41及Glycophorin A)及免疫磁珠分离体系先去除已确定分化方向的细胞,再利用IL－...
- 裴雪涛冯凯王冬梅李梁杨雷南雪白慈贤张锐
- 文献传递
- 人骨髓间质干细胞体外扩增和向内皮细胞定向诱导分化的研究被引量：6
- 2005年
- 目的:体外分离、扩增成人骨髓间质干细胞(MSCs)和向内皮细胞(ECs)定向诱导分化,开辟心血管组织工程种子细胞的新来源。方法:采用Percoll(1073g/L)从正常成人骨髓中分离出MSCs,纯化和扩增后流式细胞仪鉴定其纯度;用血管内皮生长因子(VEGF)诱导MSCs向ECs分化,Ⅷ因子(vWF)免疫组化和透射电镜(TEM)鉴定细胞性质。结果:5·0×105个MSCs在体外扩增15代后,获得8·0×1012个MSCs,扩增了约1·6×107倍;MSCs在加入VEGF诱导培养大约14-21d,80%-90%的诱导细胞对Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应;TEM可观察到胞浆内有Weible-palade小体,证实为ECs。结论:成人骨髓MSCs在体外具有定向诱导分化为ECs的潜能,这为心脏组织工程瓣体外构建,尤其是在小儿先天性心脏病组织工程研究中种子细胞的来源提供了可能性。
- 冯滨刘迎龙冯凯龚茹陈虎
- 关键词：骨髓间质干细胞内皮细胞
