汤少华
- 作品数：10 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种新的无传染性的检测HBeAg抗HBe的单克隆酶联免疫吸附法(MonoLISA)的建立与应用被引量：1
- 1991年
- 应用我室自1988年5月以来建立的抗乙型肝炎e抗原两个抗原决定簇的单克隆抗体,和在大肠杆菌中高效表达的乙型肝炎病毒e抗原,组装成检测HBeAg/抗HBe的酶联免疫试剂(简称Mo-noLISA)。测定了该试剂的特异性、敏感性和可重复性,并与用日本单克隆抗体和血清e抗原组装的类似的EIA试剂进行了比较。结果两种试剂检测92份乙肝病人血清e抗原和38份血清e抗体的总符合率,分别为97.8％和100％。用两种试剂同时滴定一份已知HBeAg阳往和一份抗-HBe阳性的血清,证明两者的敏感性无显著差异。重复性试验证实,该试剂的重复率为100％。由此证明,用抗-HBeMcAb和基因工程抗原组装的诊断试剂,特异性强,敏感性高,可重复性好,且无传染性。这不仅为诊断试剂原材料的更新提供了丰富的来源,而且将该类试剂提高到一个新水平。
- 詹美云苏丽娅张文英田瑞光汤少华张满仓刘崇柏
- 关键词：单克隆抗体HBEAG
- 中国丁型肝炎病毒四川株的抗原表达及其某些特征的研究被引量：7
- 1993年
- 利用人工合成的丁型肝炎病毒(HDV)特异引物和PCR法,从本实验室克隆的含我国四川株HDV-cDNA抗原编码区的重组质粒(PGEM/HDC707和PGEM/HDC274)中,获得2个长度分别为653bp(位于1610-957)和220bp(位于1610-1390)的片段,经Klenow DNA聚合酶补平后,平端插入表达载体pBV220的P_RP_L.串连启动子下游的SmaⅠ位点,转化大肠杆菌DH5α。通过原位杂交和快提抗原,分别筛选到表达不同长度抗原的阳性克隆。由核苷酸推导,它们分别由214和74个氨基酸组成。SDS-PAGE和Western blot表明,大抗原的主要分子量为为29kD,另有24kD和17kD的小肽;小抗原是分子量为10kD的单一条带。RNA结合能力试验证明,大抗原具有结合RNA的特性,而小抗原没有这种特性。此外,大抗原还有结合Neo-RNA的活性,其结合机理及其与病毒复制的关系有待进一步研究。本研究证明,保留HDV抗原编码区近N端的57个氨基酸就具有抗原性。这种基因工程表达的丁肝病毒抗原具有很好的免疫原性,用它免疫豚鼠可产生抗HD抗体。中国株丁肝抗原的表达成功和抗体的制备对于发展我国丁肝诊断试剂,研究我国丁肝病毒特征均具有重要意义。
- 汤少华丛旭张满苍詹美云
- 关键词：丁型肝炎病毒基因表达抗原
- 我国丁型肝炎病毒(HDV)分子生物学和血清流行病学研究
- 詹美云刘善虑谭文杰易炎杰汤少华邵立军马虹张文英从旭
- 七年来对我国HDV进行了系统全面的研究：1.在国内首先建立诊断HDV感染的四种方法，其中硷测抗体和抗原的ELISA方法和试剂1989年提供社会，为在我国开展HDV研究，临床诊断，流行病调查提供了手段，节省了外汇，取得较好...
- 关键词：
- 关键词：丁型肝炎病毒分子生物学血清流行病学
- 我国丁型肝炎病毒分子生物学和血清流行病学的研究
- 詹美云刘善虑易炎杰汤少华邵立军谭文杰马虹张文英田瑞光丛旭
- 该成果对我国丁肝病毒的分子生物学和丁肝的分子流行病学进行了系统研究。建立了抗HD的ELISA、HD的IgM检测，丁肝抗原检测和丁肝核酸检测四种诊断法；进行了25省市16个不同民族中9757例HBV感染者中HDV感染的流行...
- 关键词：
- 关键词：肝炎血清
- 应用抗-HBc单克隆抗体研究乙型肝炎核心抗原的抗原位点被引量：2
- 1990年
- 应用基因工程表达的乙型肝炎核心抗原(HBcAg)免疫Balb/c小鼠,取该鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得8株能稳定分泌高滴度抗HBcAg抗体的杂交瘤细胞株.用其中7株(4A4、4B5、3H6、3A5、1G8、1D3、5G10)与HBcAg亲和性相近的单克隆抗体(McAb)首次证明,在HBcAg上存在3个不同的抗原位点,并分别命名为α、β和γ. α抗原位点:能诱生中和及免疫沉淀抗体,在体外能中和HBcAg的抗原活性,能与HBc-Ag产生免疫沉淀线.如3H6、4A4、4B5、3A5等单克隆抗体. β抗原位点:不能诱生中和及免疫沉淀抗体,但此种单克隆抗体与4A4或4B5混合后即可与HBcAg产生免疫沉淀线.如1G8、1D3 McAbs. γ抗原位点:能诱生免疫沉淀抗体,但不能诱生中和抗体.如5G10McAb. 抗相同抗原位点的单克隆抗体之间可产生有意义的互相竞争抑制,而抗不同抗原位点的单克隆抗体之间则无,或很少有竞争抑制.对有关问题进行了讨论.
- 詹美云汤少华张文英田瑞光张满仓刘崇柏
- 关键词：乙型肝炎核心抗原抗原位点
- 我国25省市自治区丁型肝炎病毒感染的流行病学调查研究被引量：9
- 1991年
- 应用本室先后建立的酶联免疫吸附法和核酸打点杂交法,检测我国25省布自治区、16个不同民族共9 758例乙型肝炎病毒感染者中的丁型肝炎病毒抗原、抗体和核酸。其中乙型肝炎病人4 714例,HBsAg慢性携带者5 044例。病人和携带者中丁型肝炎抗原阳性率分别为4.25％和3.0％,丁型肝炎抗体阳性率分别为1.46％和1.18％,丁型肝炎病毒核酸阳住率分别为3.70％和2.2％。在不同地区不同民族丁型肝炎的这些指标有一定差异。在16个民族中,维吾尔族、蒙族和藏族丁型肝炎抗体阳性率明显高于其他民族,黎族丁型肝炎核酸阳性率高于其他民族。但在1136例不同临床型乙型肝炎病人中,丁型肝炎感染率无明显区别。丁型肝炎感染与暴发性肝炎的关系有待进一步研究。
- 詹美云汤少华马虹易炎杰张文英田瑞光张满苍刘崇柏
- 关键词：丁肝病毒流行病学
- 我国丁型肝炎病毒分子生物学和血清流行病学研究
- 1999年
- 丁型肝炎病毒(HDV)感染呈全球分布,特别是在南美的一些地区,曾发生HDV的暴发流行,我国是乙型肝炎病毒感染高发区,人群中HBV感染率达58.4％。为了解我国HDV感染状况,研究我国HDV基因组特征以及在我国是否存在HDV亚型。
- 詹美云刘善虑谭文杰易炎杰汤少华邵立军马虹张文英丛旭
- 关键词：丁型肝炎病毒基因亚型流行病调查乙型肝炎病毒感染乙肝表面抗原
- 检测丁型肝炎病毒RNA打点杂交法的建立及其应用
- 1994年
- 经缺口平移法以ａ－３２Ｐ－ｄＣＴＰ标记１．０ｋｂ的丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）ｃＤＮＡ片段为探针，采用蛋白酶Ｋ直接从血清中提取ＨＤＶＲＮＡ，建立了检测血清中ＨＤＶＲＮＡ的打点杂交法，其灵敏性可达１ｐｇ水平，与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ无交叉杂交反应；并应用于检测我国５９４９份ＨＢｓＡｇ阳性血清中的ＨＤＶＲＮＡ，共检出１７６份ＨＤＶＲＮＡ阳性，检出率为２．９５％。
- 易炎杰汤少华詹美云
- 关键词：丁型肝炎病毒RNA
- 抗丁型肝炎病毒(HDV)抗体酶联免疫测定(ELISA)方法的建立与应用被引量：3
- 1989年
- 利用大肠杆菌表达的丁型肝炎病毒抗原(HDAg)和从人血清中纯化的抗-HDV IgG,首次在我国建立了检测抗-HDV抗体的ELISA方法。用此法检测53份HBsAg阳性病人和HBsAg携带者血清,并以Abbott Anti-Delta-EIA试剂进行标化,结果完全相同。检测1份抗-HDV抗体阳性血清,其ELISA滴度为80000,高于Abbott EIA试剂检测的ELISA滴度10000。 用此法检测国内部份省市地区HBsAg阳性病人和携带者的血清标本1155份,阳性者同Abbott检测的一致,无假阳性。此法可用于HDV感染的临床诊断,流行病学调查和其它研究,为在我国开展HDV肝炎的研究提供了可靠方法。
- 马虹詹美云汤少华张文英田瑞光刘崇柏
- 关键词：丁型肝炎病毒ELISA
- 我国丁型肝炎病毒分子生物学和血清流行病学研究被引量：4
- 1996年
- 本研究课题属国家“863”资助项目(863-102-14-3)获1995年卫生部科技成果二等奖。现将几年来我们研究的主要结果报告如下。丁型肝炎病毒是缺陷型单股负链RNA病毒。
- 詹美云刘善虑易炎杰汤少华邵立军谭文杰马虹
- 关键词：丁型肝炎病毒基因亚型感染率乙肝感染
