王毅
- 作品数：220 被引量：615H指数：13
- 供职机构：中国中医科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理理学更多>>
- 痰热清注射液与头孢他啶联用对铜绿假单胞菌的体外耐药敏化作用研究
- 2023年
- 目的探讨痰热清注射液(TRQ)联用头孢他啶(CAZ)对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)的体外耐药敏化作用。方法选取PA敏感菌株(ATCC 27853)和多重耐药菌株(1508032、1608016、1708116、D1、D2、D5)作为实验菌株,选择指南推荐治疗PA的9种抗生素进行研究。首先采用最小抑菌浓度(MIC)、分级抑菌浓度指数(FICI)筛选出与TRQ联用效果最佳的抗生素;然后通过生长曲线、杀菌曲线以及遗传稳定性实验,分析最佳组合对PA的耐药敏化作用。结果TRQ与CAZ联用是对PA耐药敏化的最佳组合,对敏感菌(ATCC 27853)和多重耐药菌株(1508032、1608016、1708116、D1、D2、D5)均具有协同和相加作用;生长曲线表明TRQ与CAZ联用对PA具有显著的生长抑制作用;杀菌曲线表明TRQ与CAZ联用可显著增强CAZ对PA的杀伤活性。耐药诱导实验表明TRQ与CAZ联用的耐药敏化方式可能有2种,一是可使敏感菌株ATCC 27853维持对CAZ的敏感性,抑制耐药的产生;二是可使临床耐药菌株MDR-PA 1508032恢复对CAZ的敏感性,并抑制耐药发展。遗传稳定性实验表明,TRQ与CAZ联用后的菌株进行空培养5代期间耐药敏化作用未发生显著变化,具有稳定遗传的特点。结论TRQ与CAZ联用可增强CAZ对PA的杀伤作用,恢复PA对CAZ的敏感性,并抑制耐药发展,且该敏化作用具有一定的遗传稳定性。
- 李露刘爽崔开宇杨伟峰张继丹李东影任星王彬王毅
- 关键词：痰热清注射液头孢他啶铜绿假单胞菌
- 二次谐波结合双光子荧光成像方法观察人源胶原蛋白透皮吸收情况被引量：8
- 2017年
- 目的:用二次谐波成像结合双光子荧光成像的方法观察人源胶原蛋白透皮吸收的情况。方法:将荧光标记的人源胶原蛋白(1 mg/mL)涂抹于小鼠表皮层经皮肤吸收1 h后用背向二次谐波观察皮肤内胶原纤维作为真皮层定位标志,用双光子扫描共聚焦显微镜观察人源胶原蛋白透皮吸收深度,吸收方式。结果:二次谐波成像结合双光子荧光成像表明人源胶原蛋白透皮吸收1 h后可观察到荧光信号沿着毛囊聚集,并有部分荧光分子由毛囊扩散至真皮层。结论:二次谐波可以更快速,更灵敏地检测皮肤中的胶原纤维,以此作为检测物质透皮吸收深度的定位标志,具有不受荧光信号干扰的优点。人源胶原蛋白可以沿着毛囊进入真皮层,并从毛囊中扩散至胶原纤维层从而补充皮肤中的胶原纤维。
- 孙娅楠赵静李超华刘珏玲李松林陈辉孙桂荣王毅
- 关键词：二次谐波胶原透皮吸收
- 人参皂苷Rh3对人结肠癌细胞增殖与凋亡的影响被引量：9
- 2010年
- 目的探讨人参皂苷Rh3对人结肠癌细胞SW480增殖与凋亡的影响。方法体外培养的人结肠癌细胞SW480分别用无血清培养液稀释的终浓度为15、30、60、120和240μg/ml的人参皂苷Rh3作用24、48及72h,应用四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖;采用终浓度为15μg/ml的人参皂甙Rh3作用于SW480细胞24及72h,应用原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,采用终浓度为15、20μg/ml的人参皂甙Rh3作用于SW480细胞24及72h;应用丫啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染法计算细胞凋亡率和坏死率。结果 15μg/ml人参皂苷Rh3作用48h即可明显抑制SW480细胞增殖,其作用随剂量增加和作用时间延长而增强,30μg/ml人参皂苷Rh3作用72h抑制率超过80%;15μg/ml人参皂苷Rh3作用24h部分细胞凋亡,胞浆呈棕色,作用72h凋亡细胞增多;15μg/ml人参皂苷Rh3作用24h细胞凋亡率为25.5%,20μg/ml人参皂苷Rh3作用24h细胞凋亡率为31%,未见细胞坏死,15μg/ml人参皂苷Rh3作用72h细胞凋亡率为55%、坏死率为7%,20μg/ml人参皂苷Rh3作用72h细胞凋亡率为67.5%、坏死率为7%。结论人参皂苷Rh3能抑制人结肠癌细胞SW480增殖,诱导其凋亡,作用呈剂量依赖性和时间依赖性。
- 丛中一林双甡丛登立宿晓云王毅周余来
- 关键词：结肠癌细胞凋亡
- 两种荧光探针标记鹿茸提取物的稳定性和生物活性比较研究
- 2019年
- 比较两种荧光探针异硫氰酸荧光素FITC和Cy5标记鹿茸提取物PAEs的最佳方法。用FITC和Cy5分别标记PAEs得到标记物FITC-PAEs和Cy5-PAEs;用SDS-PAGE凝胶电泳检测并比较两种荧光染料标记蛋白分子量的差异;用酶标仪检测在特定波长处OD值计算其标记率;用PC12细胞验证两种荧光染料的生物安全性;将荧光标记物分别与人工胃液和人工肠液共孵育,观察它们在其中的稳定性。结果表明,两种荧光染料标记PAEs蛋白分子量并无明显差异,但FITC-PAEs荧光强度稍强。通过计算标记率表明两种荧光染料均可充分标记PAEs,但Cy5价格昂贵。相比于FITC-PAEs,Cy5-PAEs在人工胃液和人工肠液中稳定性较差。因此,我们选择标记率高,在人工胃液和人工肠液中较为稳定且对机体无毒副作用,价格合理的FITC荧光染料标记PAEs并用于后续实验研究。这为建立蛋白类中药大分子的活性示踪方法,开发口服蛋白类药物奠定基础。
- 李超华李超华王建农孙娅楠
- 关键词：鹿茸提取物
- 拼接法构建人分泌型Klotho真核表达载体
- 焦平马杰周余来王毅宿晓云
- 关键词：外显子
- 光学相干断层扫描技术在皮肤医学领域的应用进展
- 2023年
- 近年来,光学相干断层扫描(OCT)已被广泛应用于各种皮肤病研究,用于早期发现疾病及评估治疗效果。相较于传统病理诊断方法,OCT在检测速度、无创等方面具有极大优势,因此被越来越多的皮肤病学者重视,以挖掘其更大的应用价值。本文比较了OCT与皮肤病学中其他非侵入性成像技术的差异,并回顾了OCT系统的基本原理、分类及其在皮肤病学领域最新的应用进展。
- 苏仁敬王毅孙娅楠贺改英杨伟峰马淑骅
- 关键词：体层摄影光学相干非侵入性成像技术
- 肿瘤干细胞的研究进展
- 2009年
- 徐媛媛陈月王毅
- 关键词：肿瘤干细胞肿瘤分离纯化多药耐药
- 谈“法依病机、拆方依法”的经方拆方研究思路及其优势被引量：7
- 2011年
- 根据多年来半夏泻心汤及其拆方实验研究的成果,阐述了"法依病机、拆方依法"经方拆方研究思路的理论基础,强调经方拆方研究不能忽视病机与治法这一基本原则,认为"法依病机、拆方依法"的经方拆方研究思路较好地体现了"方证要素对应"的方剂组方原则,同时具有符合辨证论治体系,凸显中医理法方药的理论指导、显著提高实验效率、有效揭示经方效应机制和配伍规律,深化对经方的理解和指导经方临床实践等诸多优势,值得深入研究和推广。
- 祝小惠钟相根程发峰王毅
- 关键词：经方拆方研究
- 前列腺酸性磷酸酶体外诱导结肠癌特异性CTLs的研究
- 2008年
- 目的探讨前列腺酸性磷酸酶(PAP)是否可以诱导结肠癌患者的外周血单核细胞(PBMCs)产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)。方法利用负载有PAP213-221(LYCESVHNF)多肽、Flu多肽(阳性对照)、EBV多肽(阳性对照)、HIV多肽(阴性对照)的C1R-A2402细胞与结肠癌患者(5例)及健康人(8例)的HLA-A24+PBMCs在体外进行CTLs诱导,ELISA法检测PAP多肽特异性IFN-γ的分泌水平,51Cr释放法测定CTLs的细胞毒活性。结果3例结肠癌患者和1例健康人的PBMCs与负载有PAP213-221多肽的C1R-A2402细胞孵育后所分泌的IFN-γ,显著高于与负载有HIV多肽的C1R-A2402细胞孵育后分泌的INF-γ水平(P<0.05),说明本实验诱导出了PAP多肽特异性的CTLs。与对PAP-/HLA-A24+淋巴母细胞的杀伤率比较,这种CTLs对PAP+/HLA-A24+的结肠癌细胞colo320的杀伤率显著增高,而对PAP+/HLA-A24-的结肠癌细胞colo205的杀伤率无显著增加。而且这种CTLs的细胞毒活性可以被抗CD8和抗HLAclassⅠ的抗体所封闭,说明其细胞毒活性依赖于CD8+的T淋巴细胞。结论PAP可能成为结肠癌特异性免疫治疗的新靶点。
- 王毅王研赵宏宇周余来原田守山田亮伊东恭悟
- 关键词：前列腺酸性磷酸酶结肠肿瘤细胞毒性T淋巴细胞
- 二苯乙烯苷对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞外氨基酸,细胞内钙离子浓度的影响被引量：4
- 2015年
- 目的:观察二苯乙烯苷(TSG)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用并探讨相关机制。方法:以SH-SY5Y细胞为研究对象,以100μmol·L-16-OHDA建立SH-SY5Y细胞损伤模型,以浓度6.25,12.5,25,50,100,200μmol·L-1TSG作用损伤的SH-SY5Y细胞,另设空白组,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,观察不同浓度的TSG对其的保护作用,激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度的变化,高效液相-荧光法检测上清液中兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu),抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(GABA)含量。结果:与空白组比较,模型组细胞存活率降低,游离钙明显增多(P<0.01),细胞外Glu及GABA浓度明显升高(P<0.01);与模型组比较,TSG预处理24 h可以改善6-OHDA造成的细胞存活率的下降,其中12.5μmol·L-1的细胞保护作用最为明显(P<0.05),明显降低内游离钙含量,明显降低细胞外Glu及GABA浓度(P<0.05,P<0.01),TSG对其有明显的抑制作用。结论:TSG可能通过减轻钙超载及兴奋性毒性对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞起到保护作用。
- 焦玥李涛马淑骅欧阳竞峰王毅孙丹丹王丹巧梁嵘
- 关键词：二苯乙烯苷6-羟基多巴胺钙离子
