田梅
- 作品数:5 被引量:16H指数:1
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 晚期氧化蛋白产物的制备及纯化
- 2009年
- 背景:晚期氧化蛋白产物是血液透析患者免疫功能紊乱、加速性动脉粥样硬化、透析相关性淀粉样变等长期并发症的重要致病环节。但是对于晚期氧化蛋白产物的基础性研究相对较少。主要原因之一就是不能获得高纯度且具有生物学活性的晚期氧化蛋白产物。目的:制备及纯化晚期氧化蛋白产物,并对其进行鉴定,以寻求一种制备高纯度且具生物活性的晚期氧化蛋白产物的方法。设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-09/10在解放军第三军医大学检验系临床生化教研室完成。材料:人血白蛋白为成都容生有限公司产品,Hitrap26/60sephacryl S-300为GE Healthcare产品。方法:首先纯化人血白蛋白,将纯化的人血白蛋白与次氯酸体外孵育法制备晚期氧化蛋白产物-人血白蛋白,经Hitrap26/60 sephacryl S-300分离纯化。并经变性及非变性电泳、分子筛蛋白标准鉴定其相对分子质量,经单核细胞肿瘤坏死因子α分泌实验鉴定其结构特征和生物学活性。主要观察指标:①人血白蛋白的纯化及电泳结果。②晚期氧化蛋白产物纯化及电泳结果。③晚期氧化蛋白产物-人血白蛋白促单核细胞肿瘤坏死因子α分泌的量效关系。结果:经变性及非变性电泳、分子筛蛋白标准鉴定其相对分子质量为670000,能够显著刺激单核细胞肿瘤坏死因子α的分泌,时间效应显示AOPPs-HSA(1g/L)刺激6h,单核细胞肿瘤坏死因子α的分泌量就已显著性升高,12h升至最高水平。结论:采用上述方法能够制备及纯化晚期氧化蛋白产物,且纯化后的晚期氧化蛋白产物具有生物学活性,为晚期氧化蛋白产物的进一步研究奠定了基础。
- 田梅易维京余荣杰吴雄飞
- 关键词:晚期氧化蛋白产物纯化凝胶层析人血白蛋白
- 晚期氧化蛋白产物的研究进展被引量:16
- 2010年
- 晚期氧化蛋白产物(AOPPs)是新近发现的一类尿毒症毒素。它能激发单核细胞呼吸爆发,刺激以肿瘤坏死因子(TNF-α)为主的大量促炎性细胞因子合成、释放,促发单核细胞的炎症反应,引起全身微炎症状态。是慢性肾衰竭(CRF)患者免疫功能紊乱、动脉粥样硬化、透析相关性淀粉样变等长期并发症的重要致病环节。本文就近年来关于AOPPs的观点作一综述。
- 田梅吴雄飞
- 关键词:晚期氧化蛋白产物
- 晚期氧化蛋白产物单克隆抗体制备的实验及应用研究
- 晚期氧化蛋白产物/(Advanced oxidation protein products,AOPPs/)是Witko-Sarsat等于1996年首先报道的由尿毒症血液透析/(Hemodialysis,HD/)患者血浆中...
- 田梅
- 关键词:晚期氧化蛋白产物慢性肾衰单克隆抗体双抗夹心法
- 文献传递
- 晚期氧化蛋白产物抗体的制备和鉴定
- 2009年
- 目的制备和鉴定抗人晚期氧化蛋白产物(AOPPs)单克隆抗体(McAb)。方法用次氯酸(HOCl)和纯化的人血白蛋白(HSA)孵育获得AOPPs-HSA,取凝胶层析纯化后的第1峰免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗AOPPs-HSA的McAb,用间接ELISA、Western blot鉴定其特异性及亚类。结果成功筛选出3株稳定分泌抗AOPPs,1株既抗HSA又抗AOPP的McAb杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类3株为IgG1,1株为IgG2b,间接ELISA和Westernblot证明制备的抗体可以特异地和天然或体外制备的AOPPs结合。结论获得抗人AOPPs-HSA的McAb细胞株4株,为进一步研究AOPPs生物学活性及其相关疾病的诊断和预后奠定基础。
- 田梅易维京吴雄飞余荣杰
- 关键词:晚期氧化蛋白产物单克隆抗体
- 免疫学检测晚期氧化蛋白方法的建立及临床应用
- 2009年
- 田梅吴雄飞余荣杰易维京
- 关键词:晚期氧化蛋白产物酶联免疫吸附反应单克隆抗体肾功能不全