申建刚 作品数:21 被引量:29 H指数:3 供职机构: 河北医科大学第二医院 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 河北省卫生厅资助项目 河北省普通高等学校强势特色学科基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Bcl-2与Bax在肝星状细胞凋亡中的作用 目的应用黏着斑激酶相关非激酶(FAK-related non-kinase,FRANK)表达质粒瞬时转染肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),探讨 Bcl-2与 Bax 在肝星状细胞凋亡中的作... 申建刚 张晓岚 霍晓霞 魏娟文献传递 黏着斑相关非激酶对肝星状细胞凋亡的影响 目的:探讨黏着斑激酶(FAK)相关非激酶(FAK-related non-kinase,FRNK)选择性阻断FAK磷酸化对FN介导的HSC凋亡及caspase-3的影响。方法:本研究应用体外细胞培养技术,以FN刺激肝星状... 申建刚 张晓岚 霍晓霞文献传递 黏着斑激酶相关非激酶对CFSC细胞基质金属蛋白酶-2及其抑制因子mRNA表达的影响 被引量:5 2008年 目的探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白刺激的肝星状细胞CFSC胶原代谢的影响及其分子机制。方法用体外细胞培养技术、脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blot方法测定FRNK蛋白表达,鉴定转染效果;用^3H Pro掺入技术测定CFSCI型胶原的合成;用RTPCR方法测定FRNK转染前后基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子(TIMP2)基因在CFSC中表达的变化情况。结果FRNK质粒成功转染CFSC,Ⅰ型胶原合成下降;MMP2基因表达上升,TIMP2基因表达下降,MMP2/TIMP2比值明显上升。结论外源性FRNK在CFSC内大量表达后,CFSC胶原表达减少;FRNK可能通过调节MMP2/TIMP2比值来促进CFSC的胶原降解。 魏娟 张晓岚 姚冬梅 霍晓霞 申建刚 敦志娜关键词:肝星状细胞 明胶酶A 黏着斑激酶相关非激酶 黏着斑激酶相关非激酶对肝星状细胞凋亡及细胞外信号调节激酶的影响 被引量:6 2008年 目的应用黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)表达质粒瞬时转染纤维连接蛋白(FN)预刺激的肝星状细胞(HSC),探讨FRNK对HSC凋亡及细胞外信号调节激酶(ERK)的影响。方法在体外,以FN诱导HSC增殖,采用脂质体介导的方法用FRNK表达质粒瞬时转染HSC,应用膜联蛋白/碘化丙啶双标记流式细胞术、DNA凝胶电泳技术和透射电镜技术检测细胞的凋亡,Western blot及RT-PCR方法检测FRNK、黏着斑激酶(FAK)、p-FAK(Tyr^397)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)、ERK1、PERK蛋白及其mRNA表达。结果FRNK表达质粒成功转染HSC,在翻译后水平抑制FAK磷酸化。与空质粒组比较,FRNK表达质粒转染HSC 48h后,HSC凋亡率由9.28%±1.05%增至25.37%±1.92%(P〈0.01),caspase-3蛋白由185.82±9.69增至264.17±12.60(P〈0.01),caspase-3mRNA由1.07±0.27增至4.19±0.48(P〈0.01)。FRNK抑制FAK磷酸化和在翻译和转录水平抑制ERK1、p-ERK的表达,而FN则促进FAK和ERK1、pERK在翻译和转录水平的表达。结论在脂质体介导下瞬时转染FRNK表达质粒,可使外源性的FRNK在HSC内大量表达,在翻译后水平抑制FAK磷酸化;并可能通过FAK-ERK信号转导通路诱导FN刺激的HSC发生凋亡。 申建刚 张晓岚 霍晓霞关键词:细胞凋亡 肝星状细胞 有丝分裂素激活蛋白激酶类 黏着斑激酶 黏着斑激酶相关非激酶 肝星状细胞凋亡机制研究进展 被引量:2 2006年 研究肝星状细胞凋亡的机制对高选择地诱导肝星状细胞凋亡进而控制或逆转肝纤维化具有重要的意义,近年来发现多条信号通路、多种细胞因子可通过不同机制诱导肝星状细胞凋亡。 申建刚 张晓岚关键词:肝星状细胞 细胞凋亡 膜型基质金属蛋白酶-1在黏着斑激酶相关非激酶调控肝星状细胞胶原代谢中的作用 目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法:应用体外细胞培养... 魏娟 张晓岚 敦志娜 赵春洪 申建刚 霍晓霞 安君艳关键词:肝星状细胞 黏着斑激酶 黏着斑激酶相关非激酶 膜型基质金属蛋白酶-1 胶原 文献传递 膜型基质金属蛋白酶1在黏着斑激酶相关非激酶诱导肝星状细胞凋亡中的作用 被引量:1 2009年 目的应用黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)表达质粒瞬时转染纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC),探讨膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)在FRNK诱导HSC凋亡中的作用。方法在体外,以FN刺激HSC增殖,采用脂质体介导的方法用FRNK表达质粒瞬时转染HSC,应用膜联蛋白/碘化丙啶双标记流式细胞术和透射电镜技术检测细胞的凋亡,蛋白免疫印迹及RT-PCR方法检测FRNK、FAK、p-FAK(Tyr397)、MT1-MMP蛋白及其mRNA表达。结果FRNK表达质粒成功转染HSC,在翻译后水平抑制FAK磷酸化。与空质粒组比较,FRNK表达质粒转染HSC 48小时后,HSC凋亡率由(9.28±1.05)%增加至(25.37±1.92)%(P<0.01)。FRNK抑制FAK磷酸化后在翻译和转录水平上调MT1-MMP表达,2.26±0.14 vs 1.09±0.15(P<0.01);1.58±0.18 vs1.00±0.10(P<0.01)。结论在脂质体介导下瞬时转染FRNK表达质粒可诱导HSC发生凋亡,上调MT1-MMP可能是其机制之一。 申建刚 安君艳 桑荣霞 魏娟 霍晓霞 张晓岚关键词:肝硬化 细胞凋亡 膜蛋白质类 粘着斑激酶与细胞周期相关蛋白在肝星状细胞增殖机制中作用研究 霍晓霞 申建刚 任英霞 赵玉斌 王燕云 邵闳 胡美红 该课题采用胆总管结扎大鼠肝纤维化模型、体外细胞培养方法及脂质体介导的质粒转染技术,应用免疫组织化学、改良MTT法、流式细胞术、Western Blot及RT-PCR技术,从细胞周期角度,系统研究了黏着斑激酶(FAK)促肝...关键词:关键词:细胞周期 相关蛋白 肝星状细胞 粘着斑激酶 FAK-ERK信号转导通路在肝星状细胞凋亡中的作用 目的应用黏着斑激酶相关非激酶(FAK-related non-kinase,FRNK)表达质粒瞬时转染肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),探讨黏着斑激酶(focal adhesion kin... 申建刚 张晓岚 霍晓霞 魏娟文献传递 Bcl-2与Bax在肝星状细胞凋亡中的作用 目的应用黏着斑激酶相关非激酶(FAK-related non-kinase,FRNK)表达质粒瞬时转染肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),探讨 Bcl-2与 Bax 在肝星状细胞凋亡中的作用... 申建刚 张晓岚 霍晓霞 魏娟文献传递