程联胜
- 作品数：39 被引量：58H指数：6
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- ^(125)I标记的抗p185抗体的体外代谢与体内生物学分布
- 2005年
- 目的:研究125I标记的抗p185抗体(鼠mAbA21、人鼠嵌合抗体A21scFv-Fc及单链抗体A21scFv)在体外的细胞代谢和在体内的生物学分布,为其在诊断和治疗高表达p185肿瘤的临床应用提供依据。方法:通过FACS检测抗体是否与高表达膜表面抗原p185的SKOV3特异结合。采用氯胺T法进行碘标记抗体,用细胞放射免疫分析实验,检测抗体在SKOV3细胞中的代谢。建立荷SKOV3裸鼠模型,以观察抗体的体内生物学分布。结果:体外细胞代谢实验表明,抗体在与细胞膜表面结合后,进而被内吞入细胞,在细胞内降解和脱碘,最后被分泌出细胞外。体内药物代谢实验表明,抗体在动物体内肿瘤部位出现选择性放射性浓聚,而无关抗体未出现放射性浓聚,呈全身分布。结论:mAbA21,A21scFv-Fc和A21scFv对于高表达p185的卵巢癌在体内和体外都具有亲和力,可望用作高表达p185肿瘤的诊断和治疗。
- 汪海洋刘海波董艳秋杨建虹程联胜刘兢
- 关键词：代谢生物学分布P185
- 慢病毒介导的RNA干涉对乳腺癌SKBR3细胞HER2受体的下调及生长抑制被引量：8
- 2007年
- 大约30%的乳腺癌中有表皮生长因子受体家族蛋白HER2的过表达,HER2表达水平与病人的预后以及恶性程度密切相关。RNA干涉(RNAi)是最近发展起来能特异性抑制哺乳动物细胞中基因表达的新技术。在以往鉴定的对HER2有良好RNAi效应的靶序列的基础上,构建了一系列U6和H1双启动子小干涉RNA(siRNA)表达载体,并转染HER2高表达乳腺癌SKBR3细胞定量测定了其HER2下调效应。随后,siRNA表达盒经LR重组反应被克隆入慢病毒载体中并成功包装成病毒。病毒感染SKBR3后经荧光定量PCR、蛋白印迹杂交和流式细胞仪一系列实验证明:慢病毒介导的RNAi确实能有效地下调肿瘤抗原HER2的表达,而且经慢病毒处理后细胞生长受到了抑制。为进一步阐明HER2与癌症恶化的关系以及发展新的基因治疗药物提供了新的工具。
- 程联胜查昭席甲甲江冰刘兢姚雪彪
- 关键词：RNA干涉小干涉RNA慢病毒基因治疗
- 一种抗原-抗体复合物晶体及其制备方法与抗原表位
- 本发明公开了一种抗原-抗体复合物晶体及其制备方法与抗原表位。本发明的抗原和chA21抗体复合物晶体，由肿瘤表面抗原p185/HER2胞外区部分片段EPI和抗体chA21经木瓜蛋白酶酶切后得到的单链抗体scFv组成；所述E...
- 刘兢程联胜刘洋周晖皓滕脉坤朱娟娟魏海明肖卫华
- 文献传递
- 细胞动粒蛋白Hec1启动子的结构及功能分析
- 2006年
- 细胞的分裂是一个严格调控,高度有序的过程.为了将复制后的染色体均匀、准确地传递给两个子细胞,细胞在分裂中后期受到纺锤体检验点的严格监控.Hec1定位于动粒,是纺锤体检验点调控的关键蛋白之一,它通过螺旋-螺旋结构域与其他动粒蛋白相互作用调节姐妹染色体的精确分离.为研究Hec1转录水平的调控机理,采用BLAST工具,从GenBank中搜索到了人Hec1基因上游的序列,并利用在线工具http://mbs.cbrc.jp/research/db/TFSEARCH.html提供的转录因子结合位点搜索引擎,对其5′启动子调节区段进行了分析.分析结果表明:在Hec1基因上游-200～-1序列内,存在E2F、ATF4和cAMP应答元件结合蛋白(CREB)等转录因子调控元件.在结构分析的基础上,提取HeLa细胞基因组DNA,用PCR方法克隆了Hec1基因启动子,并构建了多个含启动子不同区段的pGL3荧光素酶报告基因表达质粒.瞬时转染HeLa细胞后的结果表明,-70～-63以及-155～-144之间的启动子区对维持荧光素酶活性最为关键.凝胶迁移实验证明,这两个区段分别能够和转录因子CREB以及ATF4结合.随后,采用野生型的以及含有133位磷酸化位点突变的CREB转染HeLa细胞,通过荧光定量PCR实验发现,Hec1的表达水平分别出现明显上升和下降.该结果表明,Hec1表达的调控是通过CREB的活化来完成的.
- 李良维刘兢姚雪彪程联胜
- 关键词：动粒启动子
- 抗HER-2抗体chA21对人乳腺癌SKBR3细胞凋亡的诱导作用及其机制被引量：2
- 2006年
- 目的探讨抗HER-2工程抗体chA21在体外对高表达HER-2的人乳腺癌SKBR3细胞凋亡的诱导作用及其分子机制。方法采用透射电镜和原位末端标记技术(TUNEL)观察和检测chA21对SKBR3细胞凋亡的诱导,采用免疫细胞化学技术检测凋亡相关基因bc l-2、bax、Fas及caspase-3表达的改变。结果chA21作用72 h,可见SKBR3细胞凋亡,chA21高浓度组(5.4mg/L)凋亡指数显著高于低浓度组(0.2 mg/L)(P<0.01);chA21处理组SKBR3细胞的bax、Fas及caspase-3表达增加,而bc l-2表达及bc l-2/bax比值降低,上述改变在chA21高、低两个浓度组间有显著差异(P<0.01)。结论chA21在体外可诱导SK-BR3细胞凋亡,其分子机制与调节凋亡相关基因bax、bc l-2、Fas及caspase-3的表达有关。
- 薛花吴强胡向阳凌晓光丁向东程联胜刘兢
- 关键词：HER-2/NEUCHA21细胞凋亡FAS
- 抗HER-2抗体诱导人卵巢癌裸小鼠移植瘤细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响被引量：6
- 2006年
- 目的探讨Herceptin对高表达HER-2的人卵巢癌SKOV-3裸小鼠移植瘤细胞的凋亡诱导作用及其可能的分子机制。方法建立动物模型,随机分为生理盐水(NS)组和Herceptin组。给药6周后,取肿瘤组织,HE染色和电镜观察细胞凋亡;并利用组织芯片为平台,TUNEL技术检测凋亡指数,进一步应用免疫组化技术结合显微图像分析技术检测肿瘤组织中的bc l-2/bax、Fas和caspase-3的表达。结果Herceptin组肿瘤细胞凋亡指数(7.96±3.04)显著高于NS组(2.58±1.49),其bax、Fas和caspase-3的表达增加,bc l-2和NF-κB的表达及bc l-2/bax比值下降。结论Herceptin可诱导人卵巢癌SKOV-3裸小鼠移植瘤细胞凋亡,其可能的机制是上调bax、Fas和caspase-3以及抑制bc l-2和NF-κB的表达。
- 凌晓光吴强薛花杨枫程联胜刘兢
- 关键词：细胞凋亡HERCEPTINSKOV-3细胞FAS蛋白
- 125I标记的抗p185抗体的体外代谢与体内生物学分布
- 目的:研究125I标记的抗p185抗体(鼠mAbA21、人鼠嵌合抗体A21scFv-Fc及单链抗体A21scFv) 在体外细胞代谢和在体内生物学分布,为其在诊断和治疗高表达p185肿瘤的临床应用提供依据。方法: 1 抗体...
- 汪海洋刘海波董艳秋杨建虹程联胜刘兢
- 文献传递
- 抗P185工程抗体表达与纯化研究被引量：4
- 2006年
- 人类的原癌基因Her-2编码一个185kDa的跨膜受体酪氨酸激酶,也称为p185,是肿瘤相关蛋白,在多种癌细胞,特别在乳腺癌中有高表达。构建了抗p185/HER-2的二价的嵌合抗体(scFv-Fc),并证明其保留了亲本抗体的特异结合活性,进而建立了高表达的细胞株。对该嵌合抗体进行滚瓶大规模培养,并对培养产物的纯化条件进行了摸索,建立了亲和层析和阳离子交换层析两步法。最终产物的纯度在95%以上,回收率为63%。摸索了嵌合抗体的冻干保存条件,抗体可以保持其稳定性和结合活性一年以上。嵌合抗体纯化工艺和保存条件的确定,为进一步的临床研究奠定了基础。
- 乔婧娟刘海波朱娟娟程联胜刘兢
- 关键词：嵌合抗体稳定性
- 310例中国人基因组干扰素α1/α2基因多态性研究被引量：1
- 2021年
- 目的若药品α-干扰素亚型与人体体内基因型不一致,接受抗病毒治疗的患者可被诱导产生更多的抗干扰素中和抗体,导致不应答和治疗失败。通过分析中国人群干扰素α1(IFNA1)和α2(IFNA2)基因多态性,可帮助阐明重组人干扰素α1和α2在中国人群中的遗传背景,为临床用药提供参考。方法在单核苷酸多态性数据库中分别检索IFNA1基因和IFNA2基因编码区错义突变单核苷酸多态性(SNP)位点,再在千人基因组数据库查询收录的中国人IFNA1和IFNA2等位基因的分布情况,分析两种基因多态性并计算出相关的等位基因频率。结果在千人基因组数据库共收录310例中国人双倍染色体基因组序列,所有中国人均有IFNA1和IFNA2基因座,其中,IFNA1基因座含有IFNα1、IFNα1(Ala137Val)和IFNα1(Arg148Gln)三种等位基因,基因频率分别为99.6%、0.2%和0.2%;IFNA2基因座也含有IFNα2b、IFNα2b(Leu140Val)和IFNα2b(Ala120Thr)三种等位基因,基因频率分别为98.4%、0.2%和1.4%。结论IFNα1和IFNα2b分别是中国人群IFNA1和IFNA2基因座的优势等位基因,在我国批准上市的IFNα1b、IFNα2a和IFNα2b三种亚型α-干扰素中,仅有IFNα2b与中国人基因型一致。
- 王兵盛海卢晨程联胜龚庆国
- 关键词：病毒性肝炎Α-干扰素等位基因基因多态性
- 一种抗原－抗体复合物晶体及其制备方法与抗原表位
- 本发明公开了一种抗原－抗体复合物晶体及其制备方法与抗原表位。本发明的抗原和chA21抗体复合物晶体，由肿瘤表面抗原p185/HER2胞外区部分片段EP I和抗体chA21经木瓜蛋白酶酶切后得到的单链抗体scFv组成；所述...
- 刘兢程联胜刘洋周晖皓滕脉坤朱娟娟魏海明肖卫华
- 文献传递
