穆永慧
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
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- RyR2-shRNA重组慢病毒载体的构建及其对离体心肌细胞RyR2基因表达的影响
- 2012年
- 目的构建携带RyR2-shRNA的慢病毒载体,并检测其对小鼠离体心肌细胞中RyR2的基因沉默效果。方法设计并合成针对小鼠RyR2基因的shDNA,克隆入含U6启动子和EGFP报告基因的慢病毒载体psiHIV-U6-eGFP,构建表达RyR2-shRNA的慢病毒载体,通过将慢病毒转移质粒和包装质粒共转染293T细胞,得到重组慢病毒载体颗粒,然后离体感染小鼠心肌细胞,采用Real-timePCR检测RyR2在mRNA水平的沉默效应。结果经测序证实RNAi慢病毒载体构建成功并成功包装。流式细胞仪测得重组慢病毒感染小鼠心肌细胞的阳性率达80%以上。Real-timePCR证实,重组慢病毒Lenti-siRyR2感染的小鼠心肌细胞中RyR2在mRNA水平基因抑制率达90%以上。结论成功构建了表达RyR2-shRNA的重组慢病毒表达载体,并在小鼠心肌细胞中实现有效的基因沉默效应。
- 王前段萍朱涵穆永慧赵伟达王志举章茜
- 关键词：慢病毒载体RNA干扰新生小鼠
- RyR2-Ca2+释放对小鼠心肌细胞SK通道功能的调节
- 心肌细胞是一种可兴奋细胞，具有产生动作电位(action potential，AP)的能力。心肌细胞的动作电位分为两个时期，即去极化期和复极化期。在动作电位发生期间，不同离子通道的开放和关闭导致不同的离子进行跨细胞膜的流...
- 穆永慧
- 关键词：动作电位钙瞬变心肌细胞慢病毒载体
- 携带RyR2RNAi重组慢病毒载体的构建及小鼠心肌细胞RyR2基因的表达
- 目的:采用RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术检测RNAi重组慢病毒对原代培养小鼠心肌细胞中RyR2基因表达的影响,为后续进一步研究RyR2的功能奠定基础。方法:设计合成四对针对小鼠RyR2基因不...
- 王前穆永慧朱涵杨春王志举章茜
- 文献传递
- 自发性高血压大鼠心肌小电导钙激活钾通道蛋白的表达
- 2014年
- 目的探讨高血压心脏功能的变化与小电导钙激活钾通道（sK）的关系。方法自发性高血压大鼠作为实验组（雄性，n=15），SKY大鼠作为对照组（雄性，n=11），采用尾套法和标准Ⅱ导联测定2组大鼠的动脉血压（ABP）和心电图；采用免疫印迹检测2组大鼠心脏组织SK2通道蛋白的表达；采用免疫细胞化学观察实验组大鼠心房和心室细胞SK2通道的分布。结果与对照组比较，实验组大鼠血压明显升高[（161．91±2．15）mmHg比（109．67±2．65）mmHg（1mmHg=0．133kPa），P〈0．05）]，P波时长和R．R间期延长[P波：（29．27±0．74）ms比（26．60±0．24）ms，R．R间期（161．64±8．78）ms比（131．40±1．65）ms，均P〈0．05]，而QRS波长和P．R间期与对照组相比差异无统计学意义。与对照组比较，实验组大鼠心房组织SK2蛋白表达降低（P〈0．05），心室组织SK2蛋白表达量与对照鼠差异无统计学意义。SK2通道分布于高血压大鼠心房细胞膜，心室细胞的SK2阳性免疫反应略弱。结论自发性高血压大鼠心脏SK2通道表达下调。
- 孙宝全穆永慧罗天霞郑春光杨阳樊红琨章茜
- 关键词：小电导钙激活钾通道免疫印迹法免疫组织化学
- 8携带RyR2RNAi重组慢病毒载体的构建及小鼠心肌细胞RyR2基因的表达
- 王前穆永慧朱涵杨春王志举章茜
- 文献传递
- 自发性高血压大鼠学习记忆能力和脑组织SK2蛋白的表达被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨高血压对学习记忆能力的影响。方法:取自发性高血压(SH)大鼠和对照Wistar-Kyoto大鼠各7只,采用标准Ⅱ导联记录心电图,尾套法测定鼠尾动脉压,采用Y型迷宫和跳台实验测试大鼠的学习记忆能力,采用Western blot法检测脑组织小电导钙激活钾通道蛋白2(SK2)的表达。结果:与对照比较,SH大鼠鼠尾动脉压增高(t=12.060,P<0.001),QRS时长和R-R间期延长(t=3.147,3.917,P<0.05),Y型迷宫实验学习次数减少(t=3.279,P=0.007),跳台实验上台次数和上台受电击总时间增加(t=4.626,2.516,P<0.05);脑组织SK2蛋白表达也较对照组增加。结论:SK通道可能参与了高血压大鼠认知损害的过程。
- 俞悦王震穆永慧赵伟达韩丽娟张展章茜杨春
- 关键词：自发性高血压记忆能力小电导钙激活钾通道
