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2024年7月7日星期日

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慢病毒介导的MyoD,Mef2c和Myf6诱导猪骨髓间充质干细胞(pMSC)向成肌样细胞分化的研究: 2012年; 慢病毒是一种以人类免疫缺陷I型病毒为基础发展起来的逆转录病毒,能够在细胞中长期稳定的表达或者沉默特定的基因,是一种高效的基因治疗载体。慢病毒源于反转录病毒,但在感染能力方面比反转录病毒强,对神经元细胞、肝细胞、干细胞、肿瘤细胞、心肌细胞等多种传统方法难以转染的细胞均有较强的感染能力,因此具有广阔的应用前景。同时。; 宋奇纪元王罡琦周焱逄大欣唐小春; 关键词：反转录病毒肌样细胞慢病毒感染基因治疗载体

表达FLP重组酶pCEP4-FLP载体的构建及其在FLP/FRT重组系统中的应用: 2012年; 构建重组载体pCEP4-FLP和pEF1a-FRT-stop-FRT-GFP,重组载体pEF1a-FRT-stop-FRT-GFP瞬时转染PK-15细胞24h后,再将重组载体pCEP4-FLP瞬时转染该细胞,利用荧光显微镜观察PK-15细胞GFP蛋白的表达情况,利用细胞流式技术统计绿色荧光蛋白表达效率.结果表明:重组载体pCEP4-FLP在细胞内能够表达FLP重组酶,并且表达的FLP重组酶能够识别FRT位点,删除两同向FRT位点间的DNA片段,为FLP/FRT位点特异性重组系统在转基因猪的应用奠定了基础.; 肖雪宾袁婷纪元宋奇韩晓蕾武蓉林晓晨欧阳红生李莉; 关键词：位点特异性重组

MyoD、Myf6和Mef2c慢病毒过表达载体构建及诱导猪MSC成肌向分化的研究被引量：2: 2012年; 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是重要的成体干细胞,具有多向分化的能力,其成肌分化能力在医学上有广泛的应用,可用于多种疾病的治疗。成肌决定因子(MyoD)和成肌调节因子6(Myf6)同属生肌决定因子基因家族,控制着肌细胞的增殖分化,肌细胞增强因子(Mef2c)是一个具有重要功能的转录因子,可以作为心肌分化过程中的特异性标志。本试验通过构建猪MyoD、Myf6和Mef2c慢病毒表达载体,并在体外感染猪间充质干细胞(pMSC),成功在pMSC中过表达MyoD、Myf6和Mef2c三种调节因子,并且诱导MSC表达肌细胞生成素(MyoG)、肌肉特异型肌酸激酶(CKM)等重要的成肌相关因子。本研究为利用慢病毒过表达成肌相关因子诱导MSC细胞向成肌细胞分化奠定基础,为进一步探明MSC向成肌细胞分化的分子机制提供发新思路。; 宋奇纪元高飞武蓉王罡琦周焱唐小春; 关键词：MYOD 慢病毒骨髓间充质干细胞成肌分化

脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA<sub>2</sub>）转基因猪模型的建立: 动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）可以累及颈动脉、冠状动脉以及其他动脉，是高血压、中风、心肌梗塞等心血管疾病的共同病理基础，是严重危害人类健康的常见病、多发病之一。炎症在动脉粥样硬化形成中扮演重要的角色...; 纪元; 关键词：LP-PLA2 转基因猪动脉粥样硬化

转Lp-PLA-2猪成纤维细胞系的建立及其功能鉴定: 2013年; 根据NCBI上公布的猪Lp～PLA2mRNA序列设计引物，以小型猪肺脏cDNA为模板进行PCR，将扩增产物连接进入具有EFIn启动子的pIRES2-EGFP真核表达载体中，并对其功能进行鉴定。然后，将猪Lp～PLA2表达载体转染入小型猪胎儿成纤维细胞，经过G418抗性筛选，; 纪元宋奇王罡琦; 关键词：小型猪成纤维细胞系真核表达载体胎儿成纤维细胞 NCBI CDNA

转Lp-PLA_2猪成纤维细胞系的建立及其功能鉴定: 2012年; 根据NCBI上公布的猪Lp-PLA2mRNA序列设计引物,以小型猪肺脏cDNA为模板进行PCR,将扩增产物连接进入具有EF1α启动子的pIRES2-EGFP真核表达载体中,并对其功能进行鉴定。然后,将猪Lp-PLA2表达载体转染入小型猪胎儿成纤维细胞,经过G418抗性筛选,鉴定,成功得到5株转Lp-PLA2基因的猪成纤维细胞系。这为下一步建立Lp-PLA2转基因猪及其功能研究奠定基础。; 纪元宋奇王罡琦高飞武蓉王海军唐小春; 关键词：LP-PLA2

PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建: 2012年; [目的]建立PIWIL1基因启动子调控的特异性表达Cre重组酶的转基因猪,为研究piRNA及其相关基因的功能和机制奠定基础。[方法]通过PCR扩增,从猪的全基因组上扩增出PIWIL1基因的启动子。切除猪源Cre重组酶的表达载体pET28a-MHC-Cre-BGHpo1yA-FRT2neor的启动子MHC,将其与PIWIL1基因启动子连接,构建成特异性表达Cre重组酶的pPIWIL1-Cre载体。将该载体转染小型猪胎儿成纤维细胞,通过G418筛选,获得阳性克隆进行核移植。[结果]获得2头PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre酶的转基因猪。[结论]成功构建了PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪,为研究piRNA及其相关基因的功能和机制提供了工具猪。; 段新平高飞武蓉宋奇韩杨姚潮刚纪元; 关键词：PIRNA 转基因猪

Lp-PLA2转基因猪的建立: 脂蛋白相关的磷脂酶A2(Lp-PLA2)是血管特异性的炎症相关酶,由多种炎症细胞产生并分泌,临床上,将其作为Marker来预测和划分心血管疾病发生几率和程度。在小鼠血液循环中,Lp-PLA2主要与HDL,结合,水解PAF...; 纪元宋奇王罡琦韩杨王海军唐小春欧阳红生; 关键词：动物模型 LP-PLA2 转基因猪模型建立动脉粥样硬化

Lp-PLA2真核表达载体的构建及其生物学功能研究: 2012年; Lp-PLA2是磷脂酶超家族的一员,又称为血小板活化因子水解酶(PAF-AH),是钙离子非依赖性的磷脂酶,在动脉粥样化形成过程中由多种炎症细胞(单核细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞和肥大细胞)产生并分泌。在小鼠血液循环中,Lp-PLA2主要与HDL结合,水解PAF,抑制动脉粥样硬化形成,并降低心肌梗塞、中风的发生率;而在人体血液循环中,Lp-PLA2与LDL结合,; 纪元宋奇王罡琦欧阳红生唐小春; 关键词：人体血液循环 LP-PLA2 磷脂酶非依赖性炎症细胞

脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)转基因猪模型的建立: 动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)可以累及颈动脉、冠状动脉以及其他动脉，是高血压、中风、心肌梗塞等心血管疾病的共同病理基础，是严重危害人类健康的常见病、多发病之一。炎症在动脉粥样硬化形成中扮演重要的角色...; 纪元; 关键词：LP-PLA2 转基因猪动脉粥样硬化; 文献传递

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