肖亚莉
- 作品数：10 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸭坦布苏病毒弱毒株及其应用
- 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒弱毒株，该弱毒株是由鸭坦布苏病毒强毒株FX2010经在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续传代培养后突变获得。本发明还公开了预防或治疗鸭坦布苏病毒病的疫苗，该疫苗是以上述鸭坦布苏病毒弱毒株为种毒的鸭...
- 李泽君李国新肖亚莉李雪松滕巧泱
- 文献传递
- 鸭坦布苏病毒弱毒株及其应用
- 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒弱毒株，该弱毒株是由鸭坦布苏病毒强毒株FX2010经在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续传代培养后突变获得。本发明还公开了预防或治疗鸭坦布苏病毒病的疫苗，该疫苗是以上述鸭坦布苏病毒弱毒株为种毒的鸭...
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- 文献传递
- 鸭坦布苏病毒在鸡胚成纤维细胞上的传代致弱研究
- 自2010年4月以来，以引起蛋鸭产蛋下降为特征的鸭坦布苏病毒病的爆发，给我国养鸭业造成了巨大的经济损失。目前，该病已经在我国大部分养鸭地区流行。目前，尚无商品化的鸭坦布苏病毒病疫苗用来预防该病。 在鸭坦布苏病毒病在我国发...
- 肖亚莉
- 关键词：致弱
- 文献传递
- 密码子优化的鸭坦布苏病毒E基因在昆虫细胞中的表达被引量：1
- 2013年
- 为了使鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)的E蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统中高效表达,本研究将DTMUV的E基因按照昆虫细胞偏嗜性密码子进行了优化,合成了基因optiE,并将其插入到pFastBac HT载体上,得到质粒pFastBac-optiE。将该质粒转化DH10BAC感受态细胞,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组转座子rBacmid-optiE。将rBacmid-optiE转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,间接免疫荧光试验和Western blot方法都证实目的蛋白在重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞中获得了表达。本研究为进一步研究DTMUV E蛋白的结构与功能奠定了基础。
- 肖亚莉刘建龙李雪松余磊滕巧泱闫丽萍李国新李泽君
- 关键词：E蛋白密码子优化
- 鸭坦布苏病毒TaqMan荧光定量PCR方法的优化被引量：8
- 2013年
- 为提高鸭坦布苏病毒(DTMUV)TaqMan荧光定量PCR方法的敏感性和简化反应条件,本研究在前期建立的TaqMan荧光定量PCR方法的基础上,设计一条特异性的反转录引物,优化反应体系,建立了简便、快速、敏感的TaqMan荧光定量PCR方法。该荧光定量PCR方法最低检测限为10拷贝,敏感性是未优化的荧光定量PCR方法的5倍、是普通PCR方法的100倍,并且该方法对DTMUV的最低检测限是0.01半数鸡胚致死量(ELD50)。通过批内和批间实验的变异系数表明优化的荧光定量PCR方法的重复性比未优化的荧光定量PCR方法好。通过该优化的荧光定量PCR方法检测其它常见的鸭病病毒的DNAs或RNAs,证明了该方法特异性好。对现地60份疑似DTMUV的样品进行检测,用该方法检出57份样品为阳性,明显高于普通PCR,并且在区分35Ct值左右样品试验中敏感性优于未优化的荧光定量PCR方法。该优化的DTMUV TaqMan荧光定量PCR方法更适用于DTMUV的快速定量流行病学诊断。
- 彭珊闫丽萍李国新李雪松滕巧泱肖亚莉何文兴李泽君
- 关键词：荧光定量PCR
- 鸭坦布苏病毒在鸡胚成纤维细胞上的传代致弱研究
- 自2010年鸭坦布苏病毒病在中国发生以来,该病给我国的养鸭产业造成了巨大的经济损失.目前,仍没有有效的措施预防和控制该病的发生和流行.为了获得鸭坦布苏病毒的弱毒株,我们把鸭坦布苏病毒强毒株FX2010在鸡胚成纤维细胞(C...
- 李国新吴晓刚颜丕熙闫丽萍滕巧泱童光志李泽君高旭元肖亚莉刘绍琼彭珊李雪松石迎张月娥余磊
- 鸭坦布苏病毒E蛋白中和性单克隆杭体的制备被引量：9
- 2012年
- 本试验利用纯化的鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus , DTMUV)奉贤株(FX2010)免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,筛选获得3株能够稳定分泌杭DTMUV的杂交瘤细胞,分别命名为:J1-E5-E4, 7B5和1E5-B6,3株杂交瘤细胞诱导同品系刁、鼠的杭体效价为1:12 800,1:6 400和1:25 600。间接ELISA和IFA结果显示,3株单杭均可以与DTMUV发生特异性反应。进一步研究发现,J1-E5-E4可以与DTMUV-E蛋白结合,使得表达E蛋白的293T细胞显现出特异性的绿色荧光;在病毒中和试验中,J1-E5-E4可以中和DTMUV,使其失去致死鸡胚的能力。这些结果表明,J1-E5-E4是一株针对DTMUV-E蛋白中和表位的单杭,该单杭将在DTMUV诊断和杭原分析中发挥重要作用。
- 姬希文李雪松李国新肖亚莉颜丕熙徐大伟范钊张七斤李泽君
- 关键词：E蛋白单克隆抗体
- 鸭坦布苏病毒Taq Man荧光定量PCR方法的优化
- 鸭坦布苏病毒病是由鸭坦布苏病毒(DTMUV)引起一种以鸭产蛋下降和死亡为特征的新发病毒性传染病，建立该病的快速诊断方法是有效防控该病的前提。
- 彭珊闫丽萍李国新李雪松滕巧泱肖亚莉李泽君
- 鸭坦布苏病毒E蛋白结构域III原核表达产物诱导中和抗体的研究被引量：6
- 2014年
- 黄病毒E蛋白结构域Ⅲ能够介导病毒与宿主受体结合以及诱导产生中和抗体,本研究利用原核表达系统表达了鸭坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅲ,并研究了其免疫原性。按照大肠杆菌偏好性密码子对鸭坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅲ核苷酸序列进行优化并合成后,克隆至pCold-TF载体构建重组质粒pCold-TF-optiEDIII。Western blot证实重组蛋白能与鸭坦布苏病毒特异性血清发生反应。用纯化的重组蛋白免疫BLAB/c小鼠3次,间接ELISA和间接免疫荧光实验证实E蛋白结构Ⅲ诱导了鸭坦布苏病毒特异性的体液免疫反应。中和实验证实鸭坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅲ可诱导产生中和抗体。本研究为进一步研制鸭坦布苏病毒诊断抗原和亚单位疫苗奠定了基础。
- 余磊闫大为高旭元肖亚莉刘绍琼李雪松闫丽萍滕巧泱李国新李泽君
- 关键词：E蛋白中和抗体
- 密码子优化的鸭坦布苏病毒E基因在昆虫细胞中的表达
- 为了使鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)的E蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统中高效表达,本研究将DTMUV的E基因按照昆虫细胞偏嗜性密码子进行了优化,合成了基因optiE...
- 肖亚莉刘建龙李雪松余磊滕巧泱闫丽萍李国新李泽君
