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范君文: 作品数：17 被引量：43H指数：4; 供职机构：军事医学科学院实验动物中心更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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梅花鹿鹿茸软骨细胞的培养及X型胶原的克隆和序列分析被引量：4: 2006年; 型胶原是肥大软骨细胞的标志物,据GenBank中收录的人、鼠、牛、猪型胶原基因的序列,进行同源性分析,在同源性高的相对保守区域设计了1对特异性引物。建立梅花鹿鹿茸软骨细胞的分离培养方法,培养鹿茸软骨细胞。提取细胞的总RNA,以总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆了梅花鹿的型胶原基因序列为877的片段,此片段全部位于编码区,与已报道的牛的型胶原基因的序列比较,同源性达到96%。共有35个碱基发生变异。DNAStar软件分析表明,二者推导的氨基酸序列同源性为95.5%。; 冯海华邓旭明岳占碰宋宇李乾学韩学敏范君文姜峰; 关键词：梅花鹿软骨细胞克隆

探讨姜黄素和茶多酚对不同时间UVB致无毛鼠急性光损伤的防御作用被引量：4: 2015年; 目的探讨姜黄素和茶多酚对不同时间UVB致无毛鼠急性光损伤的防御作用。方法取清洁级无毛鼠36只,随机分为对照组及药物组（0s、30s、60s、120s、240s）;每组各2只。于照射前30min在无毛鼠背部涂抹姜黄素或茶多酚,照射距离为15cm,采用3倍最小红斑量（MED）的UVB约200～540mJ/cm2分别照射各组,取皮肤组织,制成石蜡切片,光学显微镜观察。结果对照组无毛鼠皮肤出现不同程度鳞屑,胶原间可见散在淋巴细胞,且120s及240s时出现胶原红染、排列紊乱、均质化等改变。药物组无毛鼠真皮中炎性细胞浸润减少,胶原受损现象得到改善。结论外用姜黄素和茶多酚可通过减轻炎症细胞浸润及减轻胶原受损程度而防御UVB致无毛鼠皮肤急性光损伤。; 高爱莉江娜刘清张倩雯范君文王鹏邓蕙妍田歆梁碧华李润祥马少吟李振洁龚业青朱慧兰; 关键词：UVB 光损伤

29种中药提取物抗结核药物敏感性研究被引量：21: 2009年; 此研究选取29种对结核分支杆菌和其他呼吸疾病有治疗作用生长在中国的药用植物,通过MABA(Microdilution alamar blue assay)药敏试验方法检测了这些药物的乙醇和水提取物对结核分支杆菌M.tuberculosis H37Rv的敏感性。筛选到金银花、大蓟、小蓟和水车前等有显著的抗结核活性,为进一步考查其单体化合物的作用机制和有新型作用机制的抗结核药物开发打下基础。; 范君文于录马兰芝郭娜高全胜赵全民曾范利葛发王全凯邓旭明曾林; 关键词：中药结核分枝杆菌药物敏感性

巴贝西虫感染黑线仓鼠生物学特性的变化被引量：2: 2016年; 目的建立巴贝西虫感染的黑线仓鼠模型,明确感染后黑线仓鼠生物学特性的变化规律,为巴贝西虫病的检测与防治提供基础数据资料。方法腹腔注射含巴贝西虫的血液感染黑线仓鼠,感染的第0、2、4、6、8、10、12、14、16、23、30、37天每次取5只动物采集抗凝血和全血,制备血涂片,通过吉姆萨染色检测虫体繁殖情况;分离血液总DNA,用REAL-TIME PCR检测巴贝西虫的在宿主体内的繁殖规律;用全自动生理生化检测仪测定血液生理生化指标;处死动物后分别采集心、肝、脾、肺、肾等器官,称重测定脏器系数;用ELISA法检测感染动物血清中IL-2浓度。结果感染后第4天黑线仓鼠体内的巴贝西虫数量最多,之后整体呈下降趋势,在第12天有一个短暂升高。感染动物的脏器系数变化最大的属于肝脏和脾脏,心、肺和肾脏系数在整个感染期内稍有波,均在正常值范围内。感染动物的血细胞均有波动,在第10、23天两次达峰值,其中白细胞变化最为剧烈;检测到变化的血液生化指标在第12天达峰值。感染动物血清中的IL-2在第10天达峰值,之后连续下降。结论感染巴贝西虫的黑线仓鼠具有典型的蜱传寄生虫病特点,病原侵入一周内达繁殖顶峰,且病原可在宿主体内长期潜伏。宿主免疫响应在第2周达到峰值,与免疫相关的脏器及血细胞有明显的应激反应。据此,可有针对性的开展巴贝西虫病的诊断与防治。; 叶莉马帅王昱佳郑珺文王冬平李桂军范君文时彦胜张小飞白杰英; 关键词：黑线仓鼠脏器系数细胞因子

东北地区鹿源性大肠杆菌的血清型、耐药性和毒力因子分析: 在2004年～2006年间,本实验室收集了共282株来自东北地区腹泻梅花鹿的大肠杆菌,并对所有收集菌株进行了血清型的鉴定、对15种抗菌药的药敏实验、以及耐药基因、毒力基因的检测。结果表明:这些在菌株中,鉴定出的186株菌...; 范君文; 关键词：大肠杆菌血清型耐药性毒力基因; 文献传递

一种利用结晶紫染色检测结核分枝杆菌生物被膜方法: 本发明公开了一种结晶紫染色检测结核分枝杆菌生物被膜方法，它包括：洗涤生物被膜；50摄氏度干燥，在0.5-1.5%结晶紫溶液中孵育；洗涤后，50摄氏度干燥；加95%乙醇孵育，涡旋震荡，制备悬液；分光光度计测悬液A570nm...; 于录杨志强孟日增唐旭东范君文汪杨宋宇郭娜张巧丽王超; 文献传递

一种结核分枝杆菌生物被膜检测方法: 本发明提供了一种结核分枝杆菌生物被膜检测方法，采用Sytox green/Sytox orange荧光染色，用酶标仪检测悬液，进行结核分枝杆菌生物被膜检测，检测方法步骤简单，对仪器的要求低；能在短时间内，检测结核分枝杆菌...; 于录杨志强宾文范君文庞旭东汪杨申凤鸽张巧丽王超安雅男; 文献传递

抗sAPRIL抗体的制备及细胞增殖抑制功能分析: 2011年; 本研究旨在通过免疫小鼠制备抗人可溶性增殖诱导配体(soluble a proliferation-inducing ligand,sAPRIL)的多抗,检测其对人sAPRIL促细胞增殖活性的抑制作用。以丧失天然生物学活性,但保留良好免疫原性的sAPRIL重组突变体蛋白为免疫原,加上佐剂免疫人化SCID小鼠,6周后取血清,用间接ELISA法测定抗体滴度,Westernblot测定抗体特异性,MTT法检测所获抗血清抑制sAPRIL促Raji和Jurkat细胞增殖的作用。结果表明,免疫小鼠,获得特异性的小鼠抗人sAPRIL抗体,抗血清滴度达到1∶640。功能实验显示,抗sAPRIL血清可明显降低sARPIL刺激Raji和Jurkat细胞增殖的作用(p<0.05)。结论:成功制备了抗人sAPRIL多克隆抗体,该抗体可以在体外抑制sAPRIL促Raji和Jurkat细胞增殖活性。; 杜本军高全胜兰芝范君文丁路静李敏祁园园孔伟; 关键词：RAJI细胞 JURKAT细胞细胞增殖

鹿茸角软骨细胞体外培养方法的建立及生长特性分析被引量：5: 2007年; 【研究目的】建立梅花鹿鹿茸软骨细胞体外分离培养和扩增方法,观察鹿茸软骨细胞在体外培养的生物学特性,为鹿茸再生机理的研究奠定基础;【方法】体外分离培养鹿茸软骨细胞,采用组织学、MTT比色法、免疫组化等多种手段动态检测细胞生长增殖情况;【结果】核心部分,约150字鹿茸软骨细胞贴壁生长,原代细胞比传代生长速度快,原代及传代4代内的鹿茸软骨细胞均有活跃的增殖能力,软骨细胞呈三角形,多边形等多种形态,II型胶原免疫组化,甲苯胺蓝染色为阳性;【结论】体外分离培养鹿茸软骨细胞具有较强的增殖能力,传代培养4代内细胞生长旺盛并维持其生物学特性,可满足后续实验研究要求。; 冯海华赵丽红岳占碰宋宇李乾学范君文邓旭明; 关键词：软骨细胞细胞培养鹿茸

比格犬雌激素受体ERβ以及剪切异构体ERβ_(419)、ERβ_(431)的转录活性分析: 2017年; 目的分析比格犬雌激素受体ERβ以及剪切异构体ERβ_(419)、ERβ_(431)的转录活性。方法将细胞分为6组,空白对照组(正常含有培养液的293T细胞),LV5-ERβ组(稳定表达ERβ的293T细胞),LV5-NC组(感染慢病毒LV5空载体的293T细胞),Lenti-OE-Flag-ERβ_(431)组(稳定表达ERβ_(431)的293T细胞),Lenti-OE-Flag-ERβ_(419)组(稳定表达ERβ_(419)的293T细胞),Lenti-OE-Flag-ERβ_(419)-NC组(感染慢病毒Lenti-OE-Flag空载体的293T细胞)。其中每组组内又分为2组,每组细胞瞬时转染构建的重组质粒ERE-LUC和RLUC,每组中的其中一组加入终浓度为10μmol/L的E_2,而另一组内加入等量无水乙醇。分别检测每组加入刺激(E_2和无水乙醇)前后的荧光素酶活性。结果成功地将雌激素反应元件ERE克隆到荧光素酶报告载体pGL3-Vector启动子上;设计引物扩增出的hRluc-neo基因成功克隆到pGL3-Basic载体;加入雌激素后,比格犬ERβ转录活性明显升高(P<0.01),而ERβ_(419)和ERβ_(431)转录活性在雌激素加入前后变化不大(P>0.05)。结论成功建立了比格犬ERβ的转录激活系统,而ERβ_(419)和ERβ_(431)的LBD区域都有部分的缺失,使得其不能与雌激素结合,继而转录活性无法被激活。; 沈欢欢沈欢欢范君文范君文曾林曾林; 关键词：ERΒ 雌激素转录活性

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