金丹
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人乳头瘤病毒-6L1蛋白B-细胞优势表位作为多肽疫苗的研究被引量：3
- 2004年
- 本研究分析了人乳头瘤病毒-6 型 L1 外壳蛋白之 B-细胞优势表位,并拟以此为基础制作表位多肽疫苗。研究中采用 Goldkey 和 PC/Gene 软件系统综合分析 HPV6 之 L1 蛋白 B-细胞优势表位后,Fmoc 固相合成表位多肽,通过 HPLC 纯化和毛细管电泳分析其纯度。与佐剂完全乳化后,免疫小鼠,进行动物水平的免疫效果评价。取免疫小鼠血清,与 HPV-6 DNA 阳性的尖锐湿疣患者疣体组织上清液结合,以鉴定免疫小鼠所产生抗体的特异性。发现 L1 蛋白第 425-439 位和第 486-500 位具有较高的免疫原性,可明显诱导小鼠血清抗体滴度升高,且该抗体与人尖锐湿疣疣体组织上清液呈阳性反应。说明所选这两个肽段为 HPV6 之 L1 蛋白的 B-细胞优势表位,但诱导产生的抗体是否具有功能特异性,正在做进一步研究。
- 李元朝吕凤林曹伟左国伟艾军华金丹胡承香
- 关键词：L1蛋白B细胞表位多肽疫苗
- 人乳头瘤病毒11型DNA中CpG基序甲基化状态分析及生物活性的研究被引量：5
- 2005年
- 目的 对人乳头瘤病毒 11型全核苷酸序列的CpG基序 (CpGmotifs)进行分析 ,为阐明尖锐湿疣的发病机制和提高DNA疫苗的效能奠定理论基础。方法 对从pBR32 2 HPV11重组质粒上酶切下来的HPV11全长DNA进行计算机分析 ,包括分类、计数和定位 ;并用限制性内切酶PCR法分析HPV11DNA中CpG基序的甲基化状态 ,即分别用甲基化敏感的限制性内切酶AccⅡ、HaeⅡ和HpaⅡ对HPV11DNA进行酶切消化 ,再以HpaⅡ切割位点侧翼序列为引物 ,以HpaⅡ酶切产物为模板 ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增HPV11DNA片断 ,并用HPV11DNA刺激表达有pCIneo TLR9的HEK2 93细胞 ,ELISA法检测TNF al pha、IFN alpha和IL 12的分泌。结果 CpG的“C”的侧翼为两个嘌呤 ,“G”的侧翼为两个嘧啶 ,在HPV11中共 14个。HPV11全基因组被AccⅡ切成 2个片断、被HaeⅡ切成 3个片断、被HpaⅡ切成 5个片断 ,而且以HpaⅡ酶切产物为模板进行PCR扩增 ,未能得到相应的片断。HPV 11DNA刺激有人TLR9表达的HEK2 93细胞后能检测到TNF alpha、IFN alpha和IL 12的分泌。结论 乳头瘤病毒 11型DNA中含有GACGTT等非甲基化的CpG基序 。
- 艾军华吕凤林左国伟金丹李元朝胡承香
- 关键词：人乳头瘤病毒11型CPG基序核苷酸序列分析
