陈兵
- 作品数：37 被引量：64H指数：4
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省人才开发基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- N-乙酰半胱氨酸体外抗乙肝病毒作用被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨NAC体外抗乙肝病毒活性及其机制。方法 :体外以转染了乙肝病毒的HepG2 2 2 15细胞株作为实验对象 ,培养细胞中加入不同浓度的NAC( 0 ,3 ,10 ,3 0mmol/L)。用酶联免疫吸附法 (ELISA )测定培养上清液中的乙肝表面抗原 (HBsAg)、e抗原 (HBeAg)。半定量PCR测定细胞内及培养上清液中的HBVDNA的变化 ,RT PCR分析细胞内HBV表面抗原mRNA的变化。结果 :NAC对HBsAg、HBeAg均有抑制作用 ,但NAC对HBsAg的抑制较HBeAg强 ,抑制率达 90 %左右。且抑制作用具有剂量和时间依赖性。半定量PCR结果显示细胞内的HBVDNA含量随着NAC浓度的增加而升高 ,而培养上清中的HBVDNA的含量降低。RT PCR结果表明细胞内HBsAgmRNA没有显著变化。结论 :NAC体外具有抗HBV活性 ,其抑制作用发生在转录后水平。
- 张胜权罗欣陈兵徐从贞李宗寅张在和
- 关键词：体外抗乙肝病毒N-乙酰半胱氨酸毒作用RT-PCR分析
- 基于C-met信号分子抗癌先导化合物的筛选及其对相关信号途径的阻断效应
- 肝细胞生长因子(HGF)受体(C-met)广泛存在于肝、脑、消化道、脾、肺、肾、心血管、乳腺、垂体、血液等组织细胞,在几乎所有实体肿瘤细胞均高表达。HGF/met信号途径除①胚胎的正常发育;②表皮、内皮、肝细胞等增殖;③...
- 汪思应陈兵郑红许望翔詹轶群徐师国杨晓明李俊
- 关键词：先导化合物C-MET信号分子相关信号
- RBP4分子RNAi载体的制备及对人肝细胞系LO2中ERK信号通路的影响
- 2012年
- 目的制备人视黄醇结合蛋白4(RBP4)分子RNAi载体,检测其干涉人肝细胞系LO2中RBP4的表达后对ERK1/2表达及磷酸化和葡萄糖摄取的影响。方法分别构建针对RBP4基因表达框5'端和3'端的干涉载体及真核表达载体,经测序和酶切鉴定后将载体转染LO2,RT-PCR和Western blot法确定其干涉RBP4表达的效率,选择干涉较高的载体用于后续实验;Western blot检测ERK1/2的表达及磷酸化水平的改变,葡萄糖氧化酶法检测上清液中葡萄糖的残留量。结果构建的真核表达载体和干涉载体经酶切、测序鉴定结果正确,并有明显的高表达或干涉效果。Western blot结果表明ERK1/2的表达量无明显变化,RBP4高表达组其磷酸化显著下降,RBP4干涉组其磷酸化显著上升。胰岛素刺激后RBP4高表达组的葡萄糖摄取明显下降,RBP4干涉组的葡萄糖摄取明显增加。结论成功制备RBP4基因的干涉载体并应用于LO2细胞中ERK1/2通路的研究,为后续RBP4的进一步功能研究奠定基础。
- 陈冠军陈利春钱磊陈莉陈兵鲁云霞
- 关键词：视黄醇结合蛋白4RNA干涉葡萄糖摄取
- 卡维地洛对人外周血单个核细胞CD25表达的影响
- 2005年
- 目的 研究新型β受体阻滞剂卡维地洛(Car)对单个核细胞表达CD25的影响。方法 分离外周血单个核细胞(PBMC),以PMA+A23187作为刺激剂,分组体外培养。用MTT方法检测PBMC的活性;用流式细胞仪检测单个核细胞的凋亡率和CD25的表达水平。结果 (1) 20μmol以内的Car对PBMC没有毒性; (2)Car能显著抑制PBMC表达CD25, 24h时,浓度3组为(8. 23±267)%,与对照组(30. 73±4. 10)%比较,差异有显著性(P<0. 01)。结论 Car可以抑制PBMC表达CD25。这可能是卡维地洛治疗慢性心衰的机制之一。
- 王昌会徐岩张胜权陈兵翟志敏
- 关键词：卡维地洛外周血单个核细胞CD25慢性心力衰竭
- 一株新蛋白磷酸酶基因(Sy2)的原核表达载体构建及鉴定
- 2006年
- 目的用含有人Sy2酪氨酸磷酸酶基因的pOTB7质粒,构建Sy2原核表达重组子,并用该重组子转化原核细胞,表达出含Sy2的融合蛋白,为将来以此融合蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体,进一步研究该基因的功能打好基础。方法用PCR扩增Sy2的PP2C结构域序列,限制性内切酶双酶切,构建到表达载体pET28a(+)中,酶切、测序等鉴定后,重组子pET28a(+)-Sy2转染原核细胞,用载体标签His抗体经SDS-PAGE、Western blot方法检测Sy2重组蛋白的表达。结果成功构建出pET28a(+)-Sy2重组质粒,Western blot方法检测出融合蛋白的表达。结论成功构建原核表达载体并在原核细胞中表达成包涵体,这种包涵体可以作为抗原制备Sy2的单克隆抗体。
- 马广文陈兵鲁云霞李菲菲倪芳郑红汪思应
- 关键词：蛋白磷酸酶聚合酶链反应
- 蛋白磷酸酶LY1基因原核表达载体的构建及蛋白的初步表达
- 2007年
- 目的构建蛋白磷酸酶LY1基因的原核表达载体,并在E.coliBL21(DE3)中表达。方法PCR扩增LY1的CDs基因片段,并将其克隆入原核表达载体pET28a(+)中构建重组质粒pET28a(+)-LY1。经限制性内切酶Nhe I、XhoⅠ双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白。SDS-PAGE、Western blot方法检测重组蛋白的表达。结果获得全长为1179bp的LY1基因片段,以构建的重组质粒pET28a(+)-LY1转化E.coliBL21(DE3)后,经IPTG诱导,表达出分子量约为42kD的重组蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在于E.coliBL21(DE3)的胞质中。Western blot方法检测出LY1融合蛋白的表达。结论成功构建了原核表达载体pET28a(+)-LY1,并表达出重组LY1蛋白,为进一步单克隆抗体的制备和生物信号转导的相关研究奠定了实验基础。
- 彭万仁陈兵倪芳鲁云霞郑红李菲菲汪思应
- 关键词：基因蛋白基因表达
- 人白细胞介素-21cDNA克隆及其在大肠杆菌系统的表达被引量：4
- 2004年
- 目的 :克隆人细胞因子IL 2 1全长cDNA及其在大肠杆菌中表达 ,并进一步检测其表达产物的功能。方法 :抽取外周血 ,分离淋巴细胞 ;抗CD3抗体刺激后 ,提取总RNA ,通过RT PCR获得两个部分重叠的IL 2 1cDNA片段 (分别为 5′端 2 4 2bp ,3′端 4 2 5bp) ,重组PCR扩增出IL 2 1全长cDNA。DNA测序正确后 ,将成熟IL 2 1cDNA的编码框序列构建到原核表达载体pET2 8a(+)中。卡那霉素平板筛选及PCR鉴定 ,挑出阳性克隆进行扩增、转化大肠杆菌进行IPTG诱导表达。SDS PAGE、Westernblotting鉴定 ,亲和层析分离纯化得到Mr 为 186 0 0的带有组氨酸标签重组人IL 2 1融合蛋白。透析法重折叠复性 ,MTT法测定其对T细胞增殖活性。结果 :成功获得人IL 2 1全长cDNA ,并以包涵体形式表达于大肠杆菌中。重折叠后的rhIL 2 1融合蛋白具有与抗CD3抗体共刺激T细胞增殖作用。结论 :获得具有生物学活性的rhIL 2 1细胞因子 ,为进一步研究其功能奠定基础。
- 张胜权陈兵罗欣徐从贞
- 关键词：克隆包涵体重折叠T细胞增殖
- CD44v6在胃癌、癌前病变及癌旁组织中的表达及其临床意义
- 研究目的： 胃癌在我国各种恶性肿瘤中居首位,其发病率呈逐年上升趋势,如何能够提高胃癌的早期诊断及改善预后仍是胃癌诊断治疗中非常棘手的问题。本研究旨在探讨细胞黏附分子CD44v6在不同胃组织中的表达及其临床意义,为胃癌的...
- 陈兵
- 关键词：CD44V6蛋白胃癌癌前病变癌旁组织
- 扬子鳄肌肉组织蛋白水解液的制备
- 2002年
- 摸索得到酶法水解扬子鳄肌肉组织的最佳条件,即以扬子鳄肌肉为原料,充分匀浆后高压蒸煮,调pH至8.5,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶2:1一次性加入,37℃10～12h后活性碳脱色得到淡黄色蛋白水解液,其蛋白质利用率为52%。
- 鲁云霞陈兵杨敏张在和
- 关键词：扬子鳄肌肉组织胰蛋白酶木瓜蛋白酶蛋白水解液营养价值
- 重组人乙酰胆碱受体a亚基1-210诱导实验性重症肌无力模型
- 目的:重症肌无力(MG)是一种主要累及神经肌肉接头突触后膜乙酰胆碱受体,由乙酰胆碱受体抗体(AchR- ab)介导的自身免疫性疾病,致残率高,严重危害人类健康,寻找有效手段治疗一直是研究者努力的方向。实验性重症肌无力(E...
- 许文华许功林陈兵鲁云霞任明山
