陈金
- 作品数：23 被引量：41H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生机械工程更多>>
- Kir5.1在C57BL/6J小鼠耳蜗的年龄相关性表达及其与AHL的关系
- 目的 研究kir5.1钾离子转运蛋白在C57BL/6J小鼠内耳组织中的表达以及其随鼠龄增加表达含量的变化,探讨其在年龄相关性听力损失(Age-related Hearing Loss,AHL)发生中的作用.方法 采用免疫...
- 潘春晨褚汉启刘云陈金周良强陈请国孙彦博
- C57BL／6J小鼠耳蜗质膜钙ATP酶异构体2的年龄相关性表达被引量：1
- 2015年
- 目的研究质膜钙ATP酶异构体2（plasmamembraneCa2＋-ATPaseisoform2，PMCA2）在C57BL／6J小鼠耳蜗组织中的分布及年龄相关性表达，探讨其与年龄相关性听力损失的关系。方法运用免疫荧光组织化学的方法检测PMCA2蛋白在不同鼠龄（4、14、22、45周）C57BL／6J小鼠耳蜗中的分布和表达变化；采用实时定量多聚酶链反应（Real-timePCR）检测PMCA2mRNA在不同鼠龄（4、14、22、45周）小鼠耳蜗中的表达。采用SPSS17．0软件进行统计学分析。结果免疫荧光的结果显示不同鼠龄C57BL／6J小鼠的耳蜗内外毛细胞、血管纹和螺旋神经节细胞均可见PMCA2蛋白表达，螺旋韧带亦可见有少量PMCA2蛋白表达。随着鼠龄的增长，耳蜗毛细胞出现缺失，螺旋神经节细胞数目逐渐减少，PMCA2蛋白的表达也随着鼠龄的增加而逐渐减少。Real—timePCR结果揭示：随着鼠龄的增长，PMCA2mRNA表达水平逐渐下降，14周龄的表达水平与4周龄相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；22周龄表达水平与14周龄相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；45周龄表达水平与14周龄相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PMCA2蛋白主要分布于C57BL／6J小鼠耳蜗内外毛细胞、血管纹和螺旋神经节细胞，随着鼠龄的增长，PMCA2蛋白和mRNA的表达量逐渐减少。PMCA2的表达下降或功能缺失可能与C57BL／6J小鼠内耳形态的年龄相关性改变以及听力损失有一定关系。
- 高燕陶雁玲褚汉启陈金陈请国周良强刘云余洋崔永华
- 关键词：耳蜗老年性聋小鼠近交C57BL
- 钾离子转运蛋白NKCC1、KCNQ1在C57BL/6J小鼠耳蜗的年龄相关性表达及与老年性聋的关系
- 杜智会褚汉启陈金
- 新生大鼠螺旋神经节细胞体外生长特点及脂质体介导的转染效率被引量：3
- 2010年
- 目的探讨螺旋神经节细胞（spiral ganglion cells,SGCs）体外生长规律及特点,并观察阳离子脂质体转染SGCs的情况。方法从出生3~4 d的SD大鼠耳蜗中分离螺旋神经节组织,消化后放在含10%胎牛血清的DMEM/F12中培养,第2 d换用含2%B27及5μmol/L阿糖胞苷的Neurobasal培养基纯化SGCs,取第4 d活性良好的细胞爬片后,通过免疫荧光法用NF-200抗体鉴定SGCs;另外用质粒pEGFP-C2联合Lipofectamine 2000转染SGCs,观察其转染效率及对细胞活性的影响。结果体外培养的SGCs胞体饱满透亮,折光性好,一般能存活2周左右,第3~7 d活性最好。细胞对NF-200染色阳性;约10%的SGCs能被Lipofectamine 2000转染,但小部分细胞轴突缩短,甚至漂浮起来。结论含B27的Neurobasal培养基能培养出活性良好的SGCs;脂质体和质粒pEGFP-C2能成功地转染SGCs,但转染效率较低,并在一定程度上影响细胞的活性。
- 陈请国褚汉启王显红陈金李建玲周良强熊浩王燕李志勇崔永华
- 关键词：螺旋神经节细胞LIPOFECTAMINEB27
- 鼻窦炎伴眶骨膜下脓肿治疗方式的选择被引量：4
- 2017年
- 目的探讨鼻窦炎伴眶并发症的临床表现、诊疗过程及治疗效果,特别对鼻窦炎合并眶骨膜下脓肿(ChandlerⅢ期)治疗方式的选择进行探讨。方法对随访资料完整的33例鼻窦炎伴眶并发症病例进行回顾性分析,并着重分析鼻窦炎伴眶骨膜下脓肿患者中单纯保守治疗患者(保守治疗组)和保守治疗无效后行手术治疗患者(保守治疗+手术治疗组)之间临床表现差异。结果鼻窦炎伴眶并发症患者共33例按Chandler分期包括:Ⅰ期5例,Ⅱ期11例,Ⅲ期16例,Ⅳ期1例,其中Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期保守治疗有效率分别为20.0%、27.3%和31.3%。Ⅲ期患者中保守治疗+手术治疗组患者治疗前眼部体征包括眼突>4mm、视力下降、眼球运动障碍、复视和眼压升高的发生率均高于保守治疗组患者,差异具有统计学意义;保守治疗组患者治疗前眶骨膜下脓肿在CT上测得的长、宽、高径均小于保守治疗+手术治疗组患者,差异具有统计学意义。33例患者经治疗后除2例患者视力未恢复外,其余症状均有不同程度改善,随访6个月以上均未复发。结论鼻窦炎伴眶并发症Ⅰ期、Ⅱ期可先给予以抗生素为主的保守治疗48h,症状无缓解者应及时行手术治疗;Ⅲ期成人患者若未出现眼突>4mm、视力下降、眼球运动障碍、复视、眼压>21mmHg和脓肿高径>0.50cm等临床表现时也可先行保守治疗,并严密观察48h,若保守治疗无效应及时行手术治疗;Ⅳ期患者首选急诊手术治疗。
- 龙小博王慧陈金王恒刘争
- 关键词：鼻窦炎鼻内镜手术
- L型钙离子通道蛋白α1D亚基与老年性耳聋关系的研究被引量：2
- 2014年
- 目的研究L型钙离子通道蛋白α1D亚基（Cav1．3）在老年性耳聋小鼠耳蜗组织中的表达和意义。方法应用听性脑干反应（ABR）分别检测4、14、24、48周龄的C57BL／6小鼠的听力，苏木素-伊红（HE）染色观察内耳形态的变化。免疫荧光方法观察Cav 1．3在内耳组织中的分布，同时采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测其基因CACNA1D在内耳组织的mRNA表达。结果Cav 1．3主要分布在小鼠耳蜗内外毛细胞、螺旋神经节、螺旋韧带、血管纹、螺旋（板）缘细胞。与4周龄小鼠比较，[短声（27．08±9．19）dBSPL、4KHz（23．79±13．31）dBSPL、8KHz（18．83±12．18）dBSPL3，14、24、48周龄ABR反应阈值提高（F=95．86，P〈0．05）；48周龄小鼠ABR反应阈值[短声（87．81±8．36）dBSPL、4KHz（85．63±9．88）dBSPL、8KHz（79．50±9．83）dBSPL3，较4、14、24周龄大鼠均提高（F=115．97，P％0．01）。随着鼠龄的增长，内耳毛细胞和螺旋神经节细胞逐渐出现缺失；血管纹和螺旋韧带也呈现萎缩；Cav 1．3表达含量逐渐减少，4周218．94±11．29，14周184．67±11．92，24周148．18±8．35与48周98．04±4．52比较，差异有统计学意义（F=119．17，P〈0．01）。结论老年性耳聋小鼠Cav 1．3钙离子通道蛋白表达含量随年龄增长而减少，其功能的异常和缺失可能在老年性耳聋的发病中起一定作用。
- 陈金褚汉启周良强余洋陈请国冰丹刘云王少立张平黄孝文崔永华
- 关键词：听觉丧失钙通道毛细胞听觉
- 合并支气管哮喘的慢性鼻-鼻窦炎的围手术期治疗
- 王恒陈金年婉青王慧尹丽丽高起学崔永华刘争
- C57BL／6J小鼠耳蜗钾离子转运蛋白KCNQ1和NKCC1的年龄相关性表达及其与听力的关系被引量：5
- 2011年
- 目的观察钾离子转运蛋白KCNQ1和Na-K-2C1联合转运子1（Na—K-2C1CO—transporter1，NKCC1）在C57BL／6J小鼠耳蜗侧壁的年龄相关．陛表达，探讨这两种转运蛋白在年龄相关性听力减退发病中的作用。方法通过听性脑干反应（ABR）检测C57BL／6J小鼠各年龄段（4、8、14、24、40周龄）的听力变化。应用免疫组化法确定KCNQ1和NKCC1在C57BL／6J小鼠耳蜗中的表达定位，并检测各年龄段小鼠耳蜗中两种转运蛋白含量随着年龄增加的表达变化。采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测KCNQ1和NKCC1的mRNA在不同鼠龄小鼠耳蜗中的表达水平。结果随着C57BL／6J小鼠年龄的增加，其ABR反应阈值逐渐升高，4周龄小鼠的短声（click）和4kHz、8kHz的ABR反应阈值与8周龄小鼠相比，差异均无统计学意义（P值均〉0．05）；14周龄后，三种刺激声的ABR反应阈逐渐升高，与低龄组小鼠相比其差异均具有统计学意义（P值均〈0．05）。KCNQ1蛋白主要表达于耳蜗血管纹的边缘细胞顶膜，而NKCC1蛋白主要表达于血管纹边缘细胞、螺旋韧带的Ⅱ型纤维细胞及螺旋缘下的纤维细胞。随着年龄的增加，血管纹KCNQ1和NKCC1蛋白的表达逐渐减少。KCNQ1和NKCC1mRNA的表达量也随着年龄的增加呈现减少的趋势。结论C57BL／6J小鼠随着年龄的增加其听力逐渐下降。KCNQ1和NKCC1两种钾离子转运蛋白随着小鼠年龄的增加逐渐减少；KCNQ1和NKCC1mRNA表达水平亦呈现随年龄增加而逐渐减少的趋势。耳蜗侧壁KCNQ1和NKCC1可能在年龄相关性听力减退的发生中起一定作用。
- 李建玲褚汉启周良强熊浩王燕陈请国陈金李志勇刘云崔永华
- 关键词：老年性聋小鼠近交C57BL
- PDCD5和caspase 3在不同年龄段C57BL／6J小鼠耳蜗中的表达被引量：3
- 2011年
- 目的检测程序化细胞死亡分子5（programmed cell death 5，PDCD5）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase 3）在不同年龄段C57BL／6J小鼠耳蜗中的表达，初步探讨其在年龄相关性听力下降发生、发展中的作用。方法选择3、6、9及12月龄段C57BL／6J小鼠各15只，即按月龄分为四组。检测各组小鼠双侧短声（click）及短纯音（6、8kHz）听性脑干反应（ABR）阈值。采用免疫组化和蛋白质印迹杂交（Western blotting）检测各月龄段小鼠耳蜗PDCD5和Caspase3蛋白的表达，实时荧光定量PCR（real—time PCR）检测各月龄段小鼠耳蜗PDCD5和caspase3基因mRNA的表达。结果随着年龄的增长，C57BL／6J小鼠各频率ABR阈值逐渐提高，耳蜗PDCD5和Caspase3蛋白的表达亦逐渐增强。3月龄和6月龄小鼠耳蜗毛细胞和血管纹细胞仅出现少量PDCD5和Caspase3蛋白表达，9月龄时表达有明显增加，至12月龄时表达最强，各月龄组间比较，差异具有统计学意义（P值均〈0．05）。Real—time PCR检测显示PDCD5和caspase3基因mRNA随着年龄的增长表达逐渐增强，与其蛋白变化趋势相一致。结论C57BL／6J小鼠耳蜗PDCD5和caspase3随着年龄的增长表达增强，与耳蜗的老化密切相关，可能是老年性聋发病机制中的一个重要因素。
- 王燕褚汉启周良强陈金李志勇刘云张平黄孝文崔永华
- 关键词：肿瘤蛋白质类凋亡调节蛋白质类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3耳蜗
- 质膜钙ATP酶异构体1～3在新生大鼠耳蜗基底膜的表达
- 2016年
- 目的通过Western blot方法检测质膜钙ATP酶异构体1～3（plasma membrane Ca2＋-ATPase isoforms 1～3,PMCA1～3）在新生大鼠耳蜗基底膜（basilar membrane,BM）的表达,并检测PMCA2在单个新生大鼠耳蜗毛细胞纤毛的表达量。方法 1取出生后2天（P2）和8天（P8）健康SD大鼠各4只,断头后分离出BM,提取总蛋白,分别取20μg,通过Western blot法检测BM的PMCA1～3表达。2取P2和P8大鼠BM总蛋白3μg,通过Western blot方法检测BM的PMCA2的表达。3取4只P8大鼠,分离出BM,提取总蛋白,分别取5、10、20μg总蛋白并取100、400和800ng牛血清白蛋白（BSA）作为对照组,跑完电泳后将胶分为2部分,部分泳道用于SYPRO染胶,其余泳道用于Western blot检测PMCA2的表达。结果 1在20μg的P2和P8大鼠BM总蛋白中,PMCA1仅有微弱的表达（分别为0.126±0.024、0.131±0.012）,PMCA2表达水平较高（分别为4.16±0.528、4.25±0.319）,PMCA3几乎没有表达（均为0）,三者间差异有统计学意义（P〈0.05）。2在3μg的P2和P8大鼠BM总蛋白中,P8大鼠PMCA2的表达水平（4.571±0.336）高于P2大鼠（3.622±0.285）,差异有统计学意义（P〈0.05）。3PMCA2在单个P8大鼠BM的含量约为2.5ng。结论 PMCA1～3在新生大鼠耳蜗BM的表达水平不同,PMCA2表达量最大,这可能是由于耳蜗毛细胞对这几种PMCA亚型有不同的Ca2＋调节需求。
- 陈请国褚汉启周良强陈金刘云罗蜜陶雁玲
- 关键词：基底膜耳蜗
