陶璐薇
- 作品数：5 被引量：65H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝细胞癌DNA修复酶hMTH1基因mRNA及其蛋白的表达被引量：3
- 2004年
- 目的:通过检测DNA修复酶hMTH1 mRNA及其蛋白在肝细胞癌组织及细胞株中的表达,探讨hMTH1在肝细胞癌发生、发展及防御机制中的作用. 方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)研究肝癌(HT,n=33)、癌旁组织(HST,n=33)和正常肝细胞株(L-02)、肝癌细胞株(SMMC772 1,HepG2)中hMTH1 mRNA的表达,同时采用免疫组织化学方法原位检测了上述的肝癌组织(n=17)及癌旁组织(n=17)中hMTH1蛋白的表达. 结果:绝大部分检测对象中均有不同程度hMTH1 mRNA及其蛋白的表达.肝癌组织中hMTH1 mRNA的表达较癌旁组织显著升高(t=2.424,P=0.021<0.05);SMMC7721, HepG2细胞中hMTH1 mRNA的表达显著高于L-02细胞(F=6.810,P=0.009<0.01).SMMC7721与HepG2细胞中hMTH1 mRNA的表达没有显著差异(P=0.395>0.05). hMTH1蛋白主要在肝细胞胞质中表达,肝癌组织中hMTH1 蛋白水平明显高于癌旁组织(f=2.618,P=0.019<0.05). 结论:hMTH1mRNA及其蛋白在肝癌组织及肝癌细胞株中表达升高.
- 周鹤俊林菊生周秀敏黎培员陶璐薇
- 关键词：RNA肝癌组织癌旁组织SMMC7721DNA修复酶基因
- 死亡受体5与肝癌细胞凋亡的相关性被引量：9
- 2006年
- 目的探讨人死亡受体5(DR5)及其配体(TRAIL)和竞争性单克隆抗体(DR5mAb)对肝癌细胞凋亡的影响。方法采用半定量RT-PCR及Western blot法检测肝癌细胞株HepG2、SMMC7721和正常人肝细胞株LO2的DR5在mRNA和蛋白水平的表达含量。应用四甲基偶氮唑盐法测试细胞的生长曲线,以观察TRAIL和DR5mAb对肝癌细胞生长的抑制作用,并用流式细胞仪测定细胞的凋亡率。结果肝癌细胞株HepG2、SMMC7721的DR5高表达,正常人肝细胞株LO2的DR5低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌细胞的增殖率随着TRAIL浓度的增加而逐渐降低,但当TRAIL超过1000ng/ml时,肝癌细胞株的增殖率就不再下降;而肝癌细胞的增殖率随着DR5mAb浓度的增加而逐渐降低,呈现明显的剂量依赖关系。1000ng/ml TRAIL处理24h时,HepG2的凋亡率在14.74%±0.48%,继续增加TRAIL浓度,其凋亡率无显著改变;而同样剂量的DR5mAb处理24h时,HepG2的凋亡率高达52.45%±0.57%,明显高于前者(P<0.05)。同时发现,正常人肝细胞株LO2的增殖率随着TRAIL浓度的增加呈下降趋势,与PBS阴性对照组差异有统计学意义(P<0.05);而DR5mAb的浓度变化对人正常肝细胞株LO2无明显影响。结论死亡受体DR5在诱导肝癌细胞凋亡中起重要的作用;DR5mAb选择性地诱导肝癌细胞凋亡,对人正常肝细胞无诱导凋亡作用。
- 朱冉旭林菊生宋宇虎黎培员陶璐薇
- 关键词：死亡受体5肝肿瘤细胞凋亡
- 肝细胞癌中XIAP mRNA及蛋白表达的意义被引量：24
- 2004年
- 目的:通过检测XIAP mRNA及蛋白在肝细胞癌中的表达程度,探讨XIAP在原发性肝细胞癌发生中的作用. 方法:应用RT-PCR技术检测正常肝细胞株L-02,肝癌细胞株SMMC7721,HepG2和30例肝癌及其相应癌旁组织中XIAP mRNA的水平,同时应用免疫组织化学方法检测了上述细胞株及组织中XIAP蛋白的表达. 结果:三株细胞株均有XIAP mRNA的表达,XIAP/β-actin 均值分别为L-02:0.418±0.045,SMMC7721:0.719±0.1369, HepG2:0.654±0.055.其中L-02细胞株的XIAP mRNA水平显著低于SMMC7721及HepG2(P<0.05),两株肝癌细胞株的XIAP mRNA表达无显著性差异(P>0.05).三株细胞亦均有XIAP蛋白的表达,其细胞爬片平均光度分别为0.158±0.016,0.291±0.022,0.238±0.011,三株细胞的XIAP蛋白水平存在显著性差异(P<0.05).肝癌组织XIAP mRNA表达较癌旁组织显著升高,XIAP/β-actin均值分别为:0.587±0.064,0.313±0.059(P<0.05).免疫组化染色显示:XIAP蛋白表达主要集中在肝细胞胞质中,其在肝癌组织中的表达显著高于癌旁组织,平均光度分别为: 0.276±0.054.0.095±0.014(P<0.05). 结论:XIAPmRNA及其蛋白在肝癌组织及肝癌细胞系中表达水平明显升高,提示他可能是促进肝细胞恶变的—个重要因素.
- 陶璐薇林菊生陈孝平周鹤俊蔡晓坤李超
- 关键词：肝细胞癌XIAPMRNA蛋白RT-PCR技术
- pcDNA3.0/PNP-CD和pcDNA3.0/PNP表达载体的克隆和表达被引量：1
- 2004年
- 目的 :构建新型PNP/Mep dR自杀基因系统的融合和单基因表达载体。方法 :利用DNA重组技术制备融合自杀基因PNP CD ,将其和PNP单基因分别插入真核表达载体pcDNA 3 0中 ,构建融合与单自杀基因表达载体pcDNA 3 0 /PNP CD和pcD NA 3 0 /PNP ;酶切、PCR及测序鉴定两重组体。结果 :成功构建了两个新型自杀基因载体并实现在HepG2肝癌细胞株中的表达。结论 :两个新型自杀基因表达载体 ,尤其是PNP CD融合自杀基因载体 ,是肿瘤基因治疗中广谱、高效的治疗载体。
- 蔡晓坤林菊生刘址忠陶璐薇梁扩寰
- 关键词：嘌呤核苷磷酸化酶基因疗法
- 肝癌组织中遗传印记基因PEG10表达的特异性及其意义被引量：29
- 2005年
- 目的:研究PEG10在肝癌组织中表达的特异性,为其作为一个潜在的肝癌基因治疗的新的分子靶点提供实验依据.方法:从来自不同器官组织的肿瘤细胞系(人肝癌细胞株HepG2、人胃癌细胞株SGC7901、人结肠癌细胞株Lovo、人胰腺癌细胞株PC3、人黑色素瘤细胞株A375、人T淋巴瘤细胞株Jurkat)、正常人胎肝细胞株L02、32例肝癌患者的肝癌组织、癌旁组织、10例良性肝病患者肝组织、10例正常人外周血单个核细胞中抽提总RNA,经RT逆转录合成cDNA,再以PCR方法检测PEG10的表达.同时,肝癌组织和癌旁组织标本经RT-PCR检测AFP的表达.结果:经RT-PCR扩增的PEG10基因片段为455bp,AFP基因的扩增片段为140bp,与原设计一致;PEG10在人肝癌细胞株HepG2中明显表达,人胃癌细胞株SGK7901、人结肠癌细胞株Lovo、人胰腺癌细胞株PC3中弱表达,而正常人胚胎肝细胞株LO2和其他肿瘤细胞株(人T淋巴细胞瘤、人黑色素瘤)中表达均为阴性雇32例肝癌及相应癌旁组织中,PEG10的表达阳性率分别为78.1%和0%;而AFP基因的阳性率分别为93.8%和59.4%.经McNemar检验,显示PEG10基因在肝癌组织中表达的敏感性与AFP表达敏感性之间无显著性差异(X20.01,1=1.78,P>0.05);而癌旁组织中PEG10表达率(0/32)明显低于AFP表达率(19/32)(X20.01,1=17.05,P<0.01).另外10例良性肝病患者(肝硬化4例,自身免疫性肝病2例,肝血管瘤2例,丙型肝炎1例,血色素病1例)肝组织标本及正常人的外周血细胞进行PEG10基因检测,结果均为阴性.结论:PEG10的表达不但具有比AFP更高的肝癌组织特异性,而且具有相对器官组织特异性.本实验为PEG10作为一个新的肝癌标志物和基因治疗的分子靶点提供了实验依据.
- 常莹陶璐薇陈孝平周秀敏宋宇虎黄锦张琼林菊生
- 关键词：肝癌组织特异性基因治疗
