马文煜
- 作品数：126 被引量：426H指数：10
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- 相关领域：医药卫生生物学化学工程文化科学更多>>
- 日本脑炎病毒E蛋白在酵母双杂交系统中的表达及其对报告基因激活作用的检测被引量：3
- 2003年
- 用日本脑炎病毒(JEV)E蛋白基因片段构建酵母双杂交诱饵载体,并检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用。用RT-PCR从JEV感染的鼠脑中扩增出JEVE蛋白基因片段,克隆入pUC19质粒,经测序正确后,再亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中。将重组质粒导入酵母菌AH109,检测其表达产物在酵母细胞中对报告基因有无激活作用。成功获得JEVE蛋白基因片段,表达的E蛋白对酵母菌AH109无毒性,对报告基因亦无激活作用。为利用酵母双杂交GAL4系统3进行JEV细胞受体蛋白的研究奠定了基础。
- 丁天兵张伟任君萍马文煜
- 关键词：日本脑炎病毒E蛋白酵母双杂交系统报告基因受体
- 单纯疱疹病毒囊膜糖蛋白模拟短肽的筛选
- 为了获得可替代单纯疱疹病毒(HSV)囊膜糖蛋白作为该病毒亚单位疫苗免疫原的小片段短肽,我们将一株有强动物保护活性的抗HSV糖蛋白C型共同性单克隆抗体
- 杨乔欣马文煜余颖任君萍黎志东
- 文献传递
- 噬菌体表达短肽模拟乙脑病毒糖蛋白的研究被引量：1
- 2002年
- 为研究日本脑炎病毒 (JEV )E蛋白模拟肽 ,将抗JEVE蛋白的mAb 2H4淘筛噬菌体 15肽库。经夹心ELISA、竞争ELISA鉴定后 ,随机挑取 10个阳性克隆 ,测序并与JEVE蛋白同源比较。将阳性噬菌体免疫小鼠 ,检测血清中特异性抗体。ELISA结果显示筛选到的噬菌体能特异地与mAb 2H4结合 ,并且这种结合可被JEV天然抗原所竞争抑制。 10个阳性克隆的氨基酸序列相同 :—RQDPQWPYANSTIAR— ,同源分析得到的序列STXAR可能为mAb 2H4识别的模拟表位。阳性噬菌体表达的 15肽能够刺激小鼠产生特异性抗体。该噬菌体表达短肽模拟JEVE蛋白的部分抗原性。
- 任君萍马文煜杨乔欣丁天兵黎志东
- 关键词：随机肽库表位日本脑炎病毒
- PEG6000沉淀结合差速离心方法浓缩水中脊髓灰质炎病毒被引量：14
- 2000年
- 目的 建立一种简便、有效的从细胞培养物中纯化PV1病毒的方法用于水病毒消毒实验 .方法 PV 1 Henan株在 Hep- 2细胞中增殖后用聚乙二醇 (PEG) 6 0 0 0沉淀结合差速离心的方法纯化病毒 .RT- PCR和透射电镜 (TEM)鉴定提纯病毒的形态学和分子生物学特性 .结果 p H值 7.5时终浓度 70 g· L- 1的 PEG6 0 0 0沉淀病毒的感染性回收率(PFU计数 )为 79.2 % ,提纯系数 (PF)为 1 0 6 ,再经差速离心(1 6 0 0 0 g30 m in,1 0 0 0 0 0 g4.5 h)浓缩病毒的感染性回性率和提纯系数分别为 2 9.0 %和 1 6 8.RT- PCR和 TEM最终鉴定提纯物为 PV 1 Henan株 .结论 PEG 6 0 0 0结合差速离心的方法较之蔗糖密度梯度区带离心方法易于操作 ,且比单独PEG沉淀有更高的纯化系数 ,是一种简便、有效的方法 .
- 张文清马文煜骆文静姜绍谆胡艳冰侯悦张进于碧云
- 关键词：脊髓灰质炎病毒纯化聚乙二醇水消毒离心法
- 抗Doppel蛋白(叠朊蛋白)单克隆抗体细胞系的建立及其初步鉴定
- 2002年
- 丁天兵肖毅任君萍吴玉水杨敬胡玲郭振英宋建华马文煜秦克锋
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞系
- RDS-ELISA的建立及其在检测JEV抗原和抗体中的应用被引量：2
- 1989年
- 通过用鞣酸处理微板、在稀释液中加入4％PEG、提高NaC1浓度,用鸡蛋清代替鸡血清、TMBS代替OPD底物、自来水代替PBS洗液、提高试验温度、缩短反应时间等措施,建立了一种快速酶联免疫吸附试验双夹心法(RDS-ELISA),并用该法对日本脑炎病毒(JEV)及其单抗进行了测定。不仅整个试验可在1小时内完成,而且所得结果与常规双夹心法相同,比血凝试验约高4倍;抗体效价与常规法相同或高10倍,比间接法高10～10,000倍。该法是一种快速、简便、特异、敏感的方法。
- 张明杰汪美先姜绍谆马文煜于碧云
- 关键词：ELISA日本脑炎病毒
- 全文增补中
- 单纯疱疹病毒糖蛋白模拟位的研究被引量：10
- 2002年
- 目的为了充分认识单纯疱疹病毒(HSV)糖蛋白的抗原表位，寻找HSV多组分疫苗和新型基因工程疫苗更有效的小片段短肽作为该病毒疫苗的备选免疫原。方法利用有动物保护活性的抗HSV糖蛋白C（gC）单克隆抗体（McAb）1A12淘筛噬菌体随机12肽库，经4轮筛选后进行ELISA检测，随机挑取14个阳性克隆进行序列测定,序列比较后得到保守序列，做ELISA阻断实验进一步鉴定筛选结果并与相关天然蛋白HSV gC进行序列比较。结果获得保守序列-SG(L)RHII-和其侧翼辅助序列-AK-、-VW-，其与天然相关蛋白HSV gC 114～116位氨基酸十分相似。携有此短肽的噬菌体可以与McAb特异结合，并可部分阻断抗体与HSV囊膜抗原的反应。结论所筛选到的保守序列可模拟McAb针对的抗原表位，可能是HSV的替代抗原。这一研究方法有望使短肽替代庞大的糖蛋白全长氨基酸序列，为研制更有效及更广谱的基因工程疫苗提供依据，也使研制基于抗原表位水平的特异诊断试剂成为可能。
- 杨乔欣马文煜余颖
- 关键词：单纯疱疹病毒噬菌体随机肽库模拟位抗原表位
- 抗单纯疱疹病毒CHA9-3D8单链抗体三维结构的计算机模建和分析被引量：1
- 1997年
- 将１株分别来自单纯疱疹病毒ＭｃＡｂ（重链）和出血热病毒ＭｃＡｂ（轻链）的杂化单链抗体基因序列，在ＳＧＩ图形工作站上，利用同源蛋白结构预测的方法，建立起了其三维结构模型，以寻找轻、重链空间结构的相互关系，观察抗体的结构及表面静电性和疏水性的变化。结果表明，杂化链抗体的轻、重链位置得当，轻链参与组成了“疏水口袋”的形成，并有约五分之二的“袋口”部分由其围成，Ｌｉｎｋｅｒ链位置贴切，游离于轻、重链之外。轻、重链的３个超变区围绕于疏水口袋附近。这一研究为进一步分析轻、重链在抗体功能中的作用，以及改造抗体并提高抗体活性等方面提供了一种途径。
- 杨乔欣马文煜孙苗陈常庆
- 关键词：单纯疱疹病毒单链抗体空间结构
- 基因免疫诱导9.1C3分子内影像类抗独特型抗体的产生被引量：1
- 1997年
- 本文分别采用真核表达载体ｐＥＦ－ＢＯＳ及ｐＣＭＶ４构建含起始码和终止码的抗９．１Ｃ３分子单克隆抗体重链可变区基因重组表达质粒９．１Ｃ３ＶＨｐＥＦ－ＢＯＳ及９．１Ｃ３ＶＨｐＣＭＶ４，并将其分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫小鼠血清对Ｋ５６２细胞进行间接免疫染色和流式细胞仪分析表明，基因免疫小鼠体内可诱导９．１Ｃ３分子内影像类抗独特型抗体的产生。
- 夏海滨金伯泉马文煜田方李恩善
- 关键词：基因免疫单克隆抗体独特型抗独特型抗体
- 抗JEV McAb及其F(ab′)_2对感染小鼠保护活性的比较
- 1997年
- 抗ＪＥＶＭｃＡｂ及其Ｆ（ａｂ′）２对感染小鼠保护活性的比较张聚良严鹏飞杨波黄庆生＊马文煜＊刘利兵＊（第四军医大学９３年级学员＊微生物学教研室，西安７１００３２）两株鼠源性抗乙脑病毒（ＪＥＶ）ＭｃＡｂ的临床初步应用已显示出较好的治疗效果。但由于完整的鼠...
- 张聚良严鹏飞杨波黄庆生马文煜刘利兵
- 关键词：乙型脑炎病毒单克隆抗体小鼠
