高博
- 作品数:8 被引量:22H指数:3
- 供职机构:东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学化学工程农业科学更多>>
- 两种蛋白水解物的Fenton反应修饰与抗氧化活性变化被引量:1
- 2010年
- 利用碱性蛋白酶分别水解大豆分离蛋白、酪蛋白,对两种水解物进行Fenton反应修饰。用紫外吸收及Lowry法评价修饰反应对两种水解物的影响,结果表明,修饰后产物与原水解物显著不同,表明修饰反应对水解物组成产生影响。抗氧化活性分析发现,大豆分离蛋白水解物的修饰产物的IC50从2.92mg/mL降低至1.36-2.28mg/mL,酪蛋白水解物的修饰产物的IC50从2.80mg/mL降低至0.89~2.12mg/mL,表明Fenton反应可提高修饰产物对DPPH自由基的清除能力。
- 高博徐微赵新淮
- 关键词:大豆分离蛋白酪蛋白水解物FENTON反应
- 内切β--1,4--葡聚糖酶基因在黑曲霉中的同源表达
- 纤维素作为地球上分布最广、含量最丰富的碳水化合物,同时也是自然界中存在的最廉价、最丰富的可再生资源,具有丰富的研究价值和意义。内切β-1,4-葡聚糖酶是纤维素酶系中研究最为广泛,最为深入的一种酶,其作用于纤维素的非结晶区...
- 高博
- 关键词:黑曲霉同源重组
- 文献传递
- 超绿水稻叶片的持绿性研究
- 高博
- 关键词:持绿性生理特性
- 内切葡聚糖酶基因在黑曲霉中的同源表达被引量:5
- 2014年
- 内切葡聚糖酶作用于纤维素的非结晶区,随机水解β-1,4-糖苷键,将长链的纤维素截断,对纤维素的整体降解起重要作用。研究从黑曲霉CICC2462中扩增得到内切葡聚糖酶基因Eng1,并针对黑曲霉中高表达的糖化酶基因glaA位点,构建Eng1基因表达载体pSZHG-Eng1,进一步通过农杆菌介导法转化黑曲霉CICC2462。经潮霉素筛选和PCR鉴定获得2株在glaA基因位点发生基因置换的同源重组转化子。在摇瓶发酵条件下,发酵液上清中的内切葡聚糖酶活力最高可达到272 U·mL-1,是出发菌株5.2倍。SDS-PAGE分析显示,两株重组菌株都有约36 ku目的蛋白条带,表达量为165~193μg·mL-1。结果表明,研究实现内切葡聚糖酶在黑曲霉中的同源表达,可为食品级内切葡聚糖酶的大规模工业化生产奠定基础。
- 李杰高博江连洲刘君邓晨旭陈璐璐张会
- 关键词:内切葡聚糖酶黑曲霉同源重组
- 耦合Plastein反应的大豆蛋白降压肽酶法制备技术被引量:8
- 2010年
- 利用碱性蛋白酶酶解大豆分离蛋白,制备出水解度为16.6%的大豆蛋白水解物,随后对水解物进行Plas-tein反应修饰。利用响应面分析优化修饰反应条件,得到适宜参数:底物质量分数45%、酶添加量275U/g蛋白质、反应时间3~4h、温度30℃。制备修饰反应程度不同的9种修饰产物并评价其体外ACE抑制活性,发现修饰产物的IC50值为0.64~1.30mg/mL,均小于大豆蛋白水解物IC50值(1.45mg/mL)。排阻色谱分析结果确认,修饰产物中有更多的高分子质量肽段存在。结果显示,大豆蛋白的酶解以及耦合Plastein反应修饰,是一种制备高ACE抑制活性大豆蛋白降压肽的新技术。
- 高博赵新淮
- 关键词:大豆蛋白水解物ACE抑制活性碱性蛋白酶
- 猪磷脂酶A2基因在黑曲霉中的表达被引量:1
- 2014年
- 目的:在黑曲霉中表达猪磷脂酶A2基因(PLA2、PLA2M)。方法:分别构建含有自身信号肽或糖化酶信号肽的猪磷脂酶A2基因PLA2重组表达载体pSZHG-PLA2、pSZHGS-PLA2M,并通过农杆菌介导法转化黑曲霉。结果:经筛选各得到1株同源重组转化子。对筛选出的同源重组菌株进行发酵培养,并进行胞内以及胞外酶活检测,结果显示由自身信号肽引导分泌的同源重组菌株的胞内和胞外酶活分别为21.68U/mL和2.12 U/mL,由糖化酶信号肽引导分泌的同源重组菌株的胞内以及胞外酶活分别为15.07U/mL和3.10U/mL。结论:表明在黑曲霉表达系统中自身信号肽和糖化酶信号肽都不能引导重组猪磷脂酶A2的有效分泌。
- 邓晨旭江连洲陈璐璐刘君高博李杰
- 关键词:黑曲霉同源重组酶活性
- 阿魏酸酯酶在黑曲霉中的同源表达被引量:3
- 2014年
- 利用食品级黑曲霉表达系统同源表达阿魏酸酯酶是提高阿魏酸酯酶产量、降低生产成本的有效途径。利用PCR技术扩增黑曲霉阿魏酸酯酶A基因(faeA)的编码区,构建黑曲霉表达载体pSZHG-faeA,并通过农杆菌介导法转化黑曲霉。经筛选获得将faeA基因整合到糖化酶基因位点的同源重组转化子4株。在酶摇瓶发酵条件下,重组菌株培养液上清中的阿魏酸酯酶活性最高达18.6mU/mL。SDS-PAGE分析显示,4株重组菌株都有约36ku目的蛋白条带,表达量为188-262μg/mL。结果表明,实现了阿魏酸酯酶在黑曲霉中的同源表达,为食品级阿魏酸酯酶的大规模工业化生产奠定了基础。
- 刘君江连洲高博邓晨旭陈璐璐张会王多佳李杰
- 关键词:阿魏酸酯酶黑曲霉同源重组
- 大豆蛋白水解物的两种修饰及其活性变化
- 大豆蛋白是优质的植物蛋白,具有乳化、起泡和胶凝等功能性质,可以广泛地应用于各类食品中。利用蛋白酶水解大豆分离蛋白,获得的水解物具有抗氧化、抑制ACE等生物活性。本研究利用Fenton反应和类蛋白反应,分别修饰大豆蛋白水解...
- 高博
- 关键词:大豆蛋白水解物FENTON反应类蛋白反应DPPH自由基清除活性ACE抑制活性
- 文献传递